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公开(公告)号:CN110004249A
公开(公告)日:2019-07-12
申请号:CN201910194623.X
申请日:2019-03-14
Applicant: 华南农业大学 , 广东海大畜牧兽医研究院有限公司
Abstract: 本发明公开了一种鉴定新型鹅细小病毒的方法,本发明荧光定量PCR检测方法灵敏度高,可检测到10拷贝数的新型鹅细小病毒目的基因,普通PCR只能检测到104拷贝数,灵敏度高1000倍;特异性强,根据经典鹅细小病毒和番鸭细小病毒与新型鹅细小病毒基因差异性区域设计合成一对特异性引物,能特异性扩增出新型鹅细小病毒基因片段;重复性好,可以准确、快速地进行分析,有利于在临床实践中推广应用。
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公开(公告)号:CN114686612B
公开(公告)日:2024-05-07
申请号:CN202210444378.5
申请日:2022-04-26
Applicant: 广东海大畜牧兽医研究院有限公司
Abstract: 本发明属于生物检测技术领域,公开了一种罗非鱼链球菌病双重荧光PCR检测引物探针组及冻干型试剂盒,具体公开了一种试剂,包括引物组和/或探针组。本发明提供的试剂可用于同时检测无乳链球菌和海豚链球菌,实现在一管反应中只进行1次PCR扩增即可对罗非鱼链球菌病的两种病原进行检测。
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公开(公告)号:CN114686612A
公开(公告)日:2022-07-01
申请号:CN202210444378.5
申请日:2022-04-26
Applicant: 广东海大畜牧兽医研究院有限公司
Abstract: 本发明属于生物检测技术领域,公开了一种罗非鱼链球菌病双重荧光PCR检测引物探针组及冻干型试剂盒,具体公开了一种试剂,包括引物组和/或探针组。本发明提供的试剂可用于同时检测无乳链球菌和海豚链球菌,实现在一管反应中只进行1次PCR扩增即可对罗非鱼链球菌病的两种病原进行检测。
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公开(公告)号:CN108865941A
公开(公告)日:2018-11-23
申请号:CN201810782440.5
申请日:2018-07-17
Applicant: 广东海大畜牧兽医研究院有限公司
Abstract: 本发明公开了一种鸭大肠杆菌的高密度发酵方法,以高密度发酵培养基为基础,使用发酵罐进行鸭大肠杆菌高密度发酵。发酵过程中,设定pH7.0~7.5、温度36.5~37.5℃、转速90~420rpm、空气通气量1.2~5.2L/min。接种前流加适量消泡剂,接种后,待细菌OD600nm达到4.0~6.0时,以流速10~25mL/h/L流加45~55(w/v)%葡萄糖溶液,流加葡萄糖的量为每升高密度发酵培养基流加葡萄糖50~100g。本发明所述的鸭大肠杆菌高密度发酵方法,基于高密度发酵培养基,其营养丰富,通过流加葡萄糖,可实现鸭大肠杆菌高密度发酵,可用于大规模发酵生产鸭大肠杆菌疫苗。
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公开(公告)号:CN105861452A
公开(公告)日:2016-08-17
申请号:CN201610395175.6
申请日:2016-06-03
Applicant: 广东海大畜牧兽医研究院有限公司
CPC classification number: C12N7/00 , C12N2770/24051
Abstract: 本发明公开一种鸭坦布苏病毒的半灌流式培养方法;包括步骤:1)采用细胞培养装置进行病毒增殖:将装有载体的细胞培养装置进行高压灭菌,加入培养液;无菌接入非洲绿猴肾细胞;2)更换培养液:每天测定培养液中葡萄糖含量以及pH值,进行培养液更换;3)病毒接种:接入含鸭坦布苏病毒的尿囊液,进行病毒扩增培养;4)补充培养液:收集粗制病毒液,然后补入等量的新鲜培养液继续培养;5)保存:将步骤4)收获的粗制病毒液于?100~?20℃,反复冻融1~5次,冻融后离心取细胞碎片、过滤,得到病毒液,?20℃保存;本发明提高病毒生产效率,每培养一批细胞可以连续收获多次粗制病毒液。
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公开(公告)号:CN108865941B
公开(公告)日:2021-08-03
申请号:CN201810782440.5
申请日:2018-07-17
Applicant: 广东海大畜牧兽医研究院有限公司
Abstract: 本发明公开了一种鸭大肠杆菌的高密度发酵方法,以高密度发酵培养基为基础,使用发酵罐进行鸭大肠杆菌高密度发酵。发酵过程中,设定pH7.0~7.5、温度36.5~37.5℃、转速90~420rpm、空气通气量1.2~5.2L/min。接种前流加适量消泡剂,接种后,待细菌OD600nm达到4.0~6.0时,以流速10~25mL/h/L流加45~55(w/v)%葡萄糖溶液,流加葡萄糖的量为每升高密度发酵培养基流加葡萄糖50~100g。本发明所述的鸭大肠杆菌高密度发酵方法,基于高密度发酵培养基,其营养丰富,通过流加葡萄糖,可实现鸭大肠杆菌高密度发酵,可用于大规模发酵生产鸭大肠杆菌疫苗。
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公开(公告)号:CN109082388A
公开(公告)日:2018-12-25
申请号:CN201810782235.9
申请日:2018-07-17
Applicant: 广东海大畜牧兽医研究院有限公司
IPC: C12N1/20 , A61K39/108 , A61P31/04 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种鸭大肠杆菌高密度发酵培养基及其制备方法,该培养基配方为每升水中含有酵母浸出物30.0~40.0g,胰蛋白胨5.0~15.0g,大豆蛋白胨5.0~15.0g,水解乳蛋白5.0~10.0g,酪蛋白胨5.0~10.0g,胃蛋白胨4.0~7.0g,麦芽浸粉1.0~3.0g,磷酸氢二钾2.0~5.0g,甘油1.0~3.0mL,铁盐2.0~10.0mg,锰盐2.0~10.0mg,铝盐2.0~10.0mg。本发明所述培养基价格低廉,配制方法简单,可实现鸭大肠杆菌高密度发酵,可用于大规模发酵生产鸭大肠杆菌疫苗。
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公开(公告)号:CN106085965B
公开(公告)日:2018-05-18
申请号:CN201610395224.6
申请日:2016-06-03
Applicant: 广东海大畜牧兽医研究院有限公司
Abstract: 本发明公开一种鸭坦布苏病毒、由该病毒制备的疫苗及其制备方法,该病毒命名为鸭坦布苏病毒GDHD2014‑3;所述病毒于2016年4月11日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏号为CCTCC No:V201621;所述治疗鸭坦布苏病毒的疫苗的制备方法,包括以下步骤:1)病毒培养:将鸭坦布苏病毒GDHD2014‑3接种至病毒培养用细胞中,然后收获病毒液并过滤;2)病毒灭活:将病毒液中加入甲醛溶液灭活24~48h;3)乳化:将疫苗原液,与白油佐剂混合进行乳化,获得疫苗;疫苗中的抗原免疫原性好,采用较低浓度病毒制成疫苗即可起到保护作用,保护率达90%以上。
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公开(公告)号:CN105861452B
公开(公告)日:2018-05-18
申请号:CN201610395175.6
申请日:2016-06-03
Applicant: 广东海大畜牧兽医研究院有限公司
Abstract: 本发明公开一种鸭坦布苏病毒的半灌流式培养方法;包括步骤:1)采用细胞培养装置进行病毒增殖:将装有载体的细胞培养装置进行高压灭菌,加入培养液;无菌接入非洲绿猴肾细胞;2)更换培养液:每天测定培养液中葡萄糖含量以及pH值,进行培养液更换;3)病毒接种:接入含鸭坦布苏病毒的尿囊液,进行病毒扩增培养;4)补充培养液:收集粗制病毒液,然后补入等量的新鲜培养液继续培养;5)保存:将步骤4)收获的粗制病毒液于‑100~‑20℃,反复冻融1~5次,冻融后离心取细胞碎片、过滤,得到病毒液,‑20℃保存;本发明提高病毒生产效率,每培养一批细胞可以连续收获多次粗制病毒液。
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公开(公告)号:CN106085965A
公开(公告)日:2016-11-09
申请号:CN201610395224.6
申请日:2016-06-03
Applicant: 广东海大畜牧兽医研究院有限公司
CPC classification number: C12N7/00 , A61K39/12 , A61K2039/5252 , A61K2039/552 , C12N2770/24051 , C12N2770/24134
Abstract: 本发明公开一种鸭坦布苏病毒、由该病毒制备的疫苗及其制备方法,该病毒命名为鸭坦布苏病毒GDHD2014‑3;所述病毒于2016年4月11日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏号为CCTCC No:V201621;所述治疗鸭坦布苏病毒的疫苗的制备方法,包括以下步骤:1)病毒培养:将鸭坦布苏病毒GDHD2014‑3接种至病毒培养用细胞中,然后收获病毒液并过滤;2)病毒灭活:将病毒液中加入甲醛溶液灭活24~48h;3)乳化:将疫苗原液,与白油佐剂混合进行乳化,获得疫苗;疫苗中的抗原免疫原性好,采用较低浓度病毒制成疫苗即可起到保护作用,保护率达90%以上。
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