一种鸭大肠杆菌的高密度发酵方法

    公开(公告)号:CN108865941A

    公开(公告)日:2018-11-23

    申请号:CN201810782440.5

    申请日:2018-07-17

    Abstract: 本发明公开了一种鸭大肠杆菌的高密度发酵方法,以高密度发酵培养基为基础,使用发酵罐进行鸭大肠杆菌高密度发酵。发酵过程中,设定pH7.0~7.5、温度36.5~37.5℃、转速90~420rpm、空气通气量1.2~5.2L/min。接种前流加适量消泡剂,接种后,待细菌OD600nm达到4.0~6.0时,以流速10~25mL/h/L流加45~55(w/v)%葡萄糖溶液,流加葡萄糖的量为每升高密度发酵培养基流加葡萄糖50~100g。本发明所述的鸭大肠杆菌高密度发酵方法,基于高密度发酵培养基,其营养丰富,通过流加葡萄糖,可实现鸭大肠杆菌高密度发酵,可用于大规模发酵生产鸭大肠杆菌疫苗。

    一种鸭坦布苏病毒的半灌流式培养方法

    公开(公告)号:CN105861452A

    公开(公告)日:2016-08-17

    申请号:CN201610395175.6

    申请日:2016-06-03

    CPC classification number: C12N7/00 C12N2770/24051

    Abstract: 本发明公开一种鸭坦布苏病毒的半灌流式培养方法;包括步骤:1)采用细胞培养装置进行病毒增殖:将装有载体的细胞培养装置进行高压灭菌,加入培养液;无菌接入非洲绿猴肾细胞;2)更换培养液:每天测定培养液中葡萄糖含量以及pH值,进行培养液更换;3)病毒接种:接入含鸭坦布苏病毒的尿囊液,进行病毒扩增培养;4)补充培养液:收集粗制病毒液,然后补入等量的新鲜培养液继续培养;5)保存:将步骤4)收获的粗制病毒液于?100~?20℃,反复冻融1~5次,冻融后离心取细胞碎片、过滤,得到病毒液,?20℃保存;本发明提高病毒生产效率,每培养一批细胞可以连续收获多次粗制病毒液。

    一种鸭大肠杆菌的高密度发酵方法

    公开(公告)号:CN108865941B

    公开(公告)日:2021-08-03

    申请号:CN201810782440.5

    申请日:2018-07-17

    Abstract: 本发明公开了一种鸭大肠杆菌的高密度发酵方法,以高密度发酵培养基为基础,使用发酵罐进行鸭大肠杆菌高密度发酵。发酵过程中,设定pH7.0~7.5、温度36.5~37.5℃、转速90~420rpm、空气通气量1.2~5.2L/min。接种前流加适量消泡剂,接种后,待细菌OD600nm达到4.0~6.0时,以流速10~25mL/h/L流加45~55(w/v)%葡萄糖溶液,流加葡萄糖的量为每升高密度发酵培养基流加葡萄糖50~100g。本发明所述的鸭大肠杆菌高密度发酵方法,基于高密度发酵培养基,其营养丰富,通过流加葡萄糖,可实现鸭大肠杆菌高密度发酵,可用于大规模发酵生产鸭大肠杆菌疫苗。

    鸭大肠杆菌高密度发酵培养基及其制备方法

    公开(公告)号:CN109082388A

    公开(公告)日:2018-12-25

    申请号:CN201810782235.9

    申请日:2018-07-17

    Abstract: 本发明公开了一种鸭大肠杆菌高密度发酵培养基及其制备方法,该培养基配方为每升水中含有酵母浸出物30.0~40.0g,胰蛋白胨5.0~15.0g,大豆蛋白胨5.0~15.0g,水解乳蛋白5.0~10.0g,酪蛋白胨5.0~10.0g,胃蛋白胨4.0~7.0g,麦芽浸粉1.0~3.0g,磷酸氢二钾2.0~5.0g,甘油1.0~3.0mL,铁盐2.0~10.0mg,锰盐2.0~10.0mg,铝盐2.0~10.0mg。本发明所述培养基价格低廉,配制方法简单,可实现鸭大肠杆菌高密度发酵,可用于大规模发酵生产鸭大肠杆菌疫苗。

    一种鸭坦布苏病毒、由该病毒制备的疫苗及其制备方法

    公开(公告)号:CN106085965B

    公开(公告)日:2018-05-18

    申请号:CN201610395224.6

    申请日:2016-06-03

    Abstract: 本发明公开一种鸭坦布苏病毒、由该病毒制备的疫苗及其制备方法,该病毒命名为鸭坦布苏病毒GDHD2014‑3;所述病毒于2016年4月11日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏号为CCTCC No:V201621;所述治疗鸭坦布苏病毒的疫苗的制备方法,包括以下步骤:1)病毒培养:将鸭坦布苏病毒GDHD2014‑3接种至病毒培养用细胞中,然后收获病毒液并过滤;2)病毒灭活:将病毒液中加入甲醛溶液灭活24~48h;3)乳化:将疫苗原液,与白油佐剂混合进行乳化,获得疫苗;疫苗中的抗原免疫原性好,采用较低浓度病毒制成疫苗即可起到保护作用,保护率达90%以上。

    一种鸭坦布苏病毒的半灌流式培养方法

    公开(公告)号:CN105861452B

    公开(公告)日:2018-05-18

    申请号:CN201610395175.6

    申请日:2016-06-03

    Abstract: 本发明公开一种鸭坦布苏病毒的半灌流式培养方法;包括步骤:1)采用细胞培养装置进行病毒增殖:将装有载体的细胞培养装置进行高压灭菌,加入培养液;无菌接入非洲绿猴肾细胞;2)更换培养液:每天测定培养液中葡萄糖含量以及pH值,进行培养液更换;3)病毒接种:接入含鸭坦布苏病毒的尿囊液,进行病毒扩增培养;4)补充培养液:收集粗制病毒液,然后补入等量的新鲜培养液继续培养;5)保存:将步骤4)收获的粗制病毒液于‑100~‑20℃,反复冻融1~5次,冻融后离心取细胞碎片、过滤,得到病毒液,‑20℃保存;本发明提高病毒生产效率,每培养一批细胞可以连续收获多次粗制病毒液。

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