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公开(公告)号:CN114646764B
公开(公告)日:2024-11-29
申请号:CN202210367234.4
申请日:2022-04-08
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室云浮分中心
IPC: G01N33/68 , G01N33/569 , C12N5/076
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种ARHGAP35蛋白在猪X和Y精子鉴定或分离中的应用。本发明利用DIA蛋白组学技术对猪X、Y精子膜蛋白进行蛋白质组学分析,然后鉴定筛选到在X精子膜蛋白中特异性表达的蛋白ARHGAP35,可以作为分离猪X、Y精子的性别特异性标识蛋白。
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公开(公告)号:CN117405883A
公开(公告)日:2024-01-16
申请号:CN202210795268.3
申请日:2022-07-07
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室云浮分中心
IPC: G01N33/569 , G01N33/68 , C12Q1/6888 , C12Q1/6879 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供了一种鉴别猪Y精子的试剂盒及其应用。具体地所述试剂盒通过以猪膜蛋白PPP4C或猪膜蛋白CSNK2A2为分子标记,通过蛋白质印迹法或免疫荧光法测试蛋白表达量,根据蛋白表达量的差异情况鉴定猪X和Y精子,具体鉴定标准为猪膜蛋白PPP4C或猪膜蛋白CSNK2A2在Y精子的表达高于X精子。本发明为通过免疫法实现猪X和Y精子的鉴定提供了一种有效的方案,实现了低成本、高效、简便的猪X和Y精子的鉴定,有助于畜牧业的可持续发展,提高经济效益,有助于缓解未来粮食紧缺问题,解决一系列动物福利问题,具有重要的应用价值。
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公开(公告)号:CN117405895A
公开(公告)日:2024-01-16
申请号:CN202210795281.9
申请日:2022-07-07
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室云浮分中心
IPC: G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/58
Abstract: 本发明提供了膜蛋白RALB在鉴定区分猪X精子方面的应用。应用方法为:利用膜蛋白RALB在猪的X精子细胞的表面差异性表达的特性,对X和Y精子进行鉴别与区分。本发明利用DIA蛋白组学技术对猪X、Y精子膜蛋白进行蛋白质组学分析,筛选出在X精子膜蛋白中差异性表达的蛋白RALB,该蛋白在X精子上的表达显著高于Y精子,因此可以作为分子标记鉴定猪X和Y精子。本发明通过猪X精子膜蛋白RALB的差异性表达进行精子性别分选,具有成本低、损伤小、高效简便的优点,应用前景好。
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公开(公告)号:CN114646764A
公开(公告)日:2022-06-21
申请号:CN202210367234.4
申请日:2022-04-08
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室云浮分中心
IPC: G01N33/68 , G01N33/569 , C12N5/076
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种ARHGAP35蛋白在猪X和Y精子鉴定或分离中的应用。本发明利用DIA蛋白组学技术对猪X、Y精子膜蛋白进行蛋白质组学分析,然后鉴定筛选到在X精子膜蛋白中特异性表达的蛋白ARHGAP35,可以作为分离猪X、Y精子的性别特异性标识蛋白。
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公开(公告)号:CN119877112A
公开(公告)日:2025-04-25
申请号:CN202510016235.8
申请日:2025-01-06
Applicant: 温氏食品集团股份有限公司 , 广东中芯种业科技有限公司 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室云浮分中心
Abstract: 本发明公开了一种猪全精子膜蛋白抗原特异性纳米抗体文库构建方法,包括:S1:将猪全精子免疫羊驼,免疫后分离外周血细胞;S2:提取外周血细胞中的RNA,反转录得到cDNA,并扩增抗体的VHH编码序列;S3:将扩增的VHH编码序列克隆到噬菌体质粒载体上制备重组噬菌体载体;S4:将重组噬菌体载体转化大肠杆菌并扩大培养,获得噬菌体展示文库;S5:利用猪X/Y精子对噬菌体展示文库进行若干次淘选,构建猪单个性别精子特异性纳米抗体文库。该方法首次采用猪全精子作为免疫原来免疫羊驼,其构建的抗体文库库容量达到3.4×108pfu,抗体库丰度更高,对全精子抗原覆盖度更高、种类更齐全,从而提高猪性控特异性抗体的捕获成功率,为猪精子特异性抗体的产业化应用奠定基础。
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公开(公告)号:CN119751670A
公开(公告)日:2025-04-04
申请号:CN202510016199.5
申请日:2025-01-06
Applicant: 温氏食品集团股份有限公司 , 广东中芯种业科技有限公司 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室云浮分中心
IPC: C07K16/18 , C12N15/13 , C07K19/00 , C12N15/10 , C07K16/00 , C40B50/06 , G01N33/543 , G01N33/532 , G01N33/569 , C12N5/076 , C12N5/071
Abstract: 本发明公开了一种猪精子特异性抗体,该抗体的编码序列如SEQ IDNo:1‑3中任一项所示。本发明通过猪全精子免疫羊驼制备纳米抗体文库,然后可以通过文库筛选出可与X或Y精子特异性结合的抗体,来实现X、Y精子的分选。而且筛选的抗体为纳米抗体,大小仅为传统抗体的10%,结构更加简单,具有稳定性高、特异性强、免疫原性低的优点,可实现抗体规模化表达,极大降低抗体生产成本,便于产业化应用。
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公开(公告)号:CN110846337B
公开(公告)日:2023-02-28
申请号:CN201911170226.5
申请日:2019-11-26
Applicant: 温氏食品集团股份有限公司 , 华南农业大学
IPC: C12N15/62 , C12N15/873 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开了一种多功能融合酶XABT基因及构建方法和应用,该多功能融合酶XABT基因,可以同时表达表达木聚糖酶、植酸酶、葡聚糖酶和纤维素酶,并具有高效的酶活,该多功能融合酶强化了葡聚糖酶活性,对含葡聚糖较高的大麦、燕麦、黑麦、小麦及其麸皮类日粮具有更强的消化能力。亦可以用于制备节粮环保转基因经济动物,消除饲料中主要抗营养因子,达到提高饲料消化率,减少污染排放的目的。
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公开(公告)号:CN110564774B
公开(公告)日:2021-10-15
申请号:CN201910782035.8
申请日:2019-08-23
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用修饰的ssODN提高细胞基因组定点修饰效率的方法。该方法通过CRISPR/Cas9系统与经修饰后的ssODN共同作用于细胞来实现。具体地为,CRISPR/Cas9系统包含目的基因gRNA片段,可以定点识别目的基因,并使目的基因发生双链断裂,而在断裂处ssODN与目的基因碱基互补配对,高效的完成基因组定点修饰,而经修饰后的ssODN可以显著提高定点修饰的效率。
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公开(公告)号:CN112852845A
公开(公告)日:2021-05-28
申请号:CN202110156059.X
申请日:2021-02-04
Applicant: 温氏食品集团股份有限公司 , 华南农业大学
IPC: C12N15/56 , C12N9/42 , C12N15/85 , A23K20/189 , A23K50/75 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开了一种新型多功能酶基因HG32及应用,该酶来源于中华竹鼠肠道微生物,能够兼容真核生物细胞表达系统,表达高生物活性的纤维素酶,其可在畜禽饲料酶制剂、转基因动物制备、食品和药品行业等领域应用,以解决植物纤维素难降解、饲料营养利用率低等问题,减轻动物排泄物中氮和、有机物等污染问题。本发明通过对竹鼠肠道微生物宏转录组测序,序列拼接,与NCBI上已有的糖苷水解酶家族进行同源性对比,筛选高表达的、同源性高于50%的疑似纤维素酶的基因,预测其信号肽,并用猪腮腺分泌蛋白信号肽替换原有的信号肽,按猪密码子偏好优化后克隆到真核表达载体上,通过脂质体转染到猪肾上皮细胞中表达,收集细胞培养上清液进行酶活分析比较后获得。
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公开(公告)号:CN111394393A
公开(公告)日:2020-07-10
申请号:CN202010116317.7
申请日:2020-02-25
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了通过筛选出可以提高基因组定点整合效率的抑制剂,包括组蛋白去乙酰化酶抑制剂或JAK抑制剂中的至少一种。组蛋白去乙酰化酶抑制剂可以在基因组定点整合时,抑制组蛋白的去乙酰化,而促进组蛋白的乙酰化,进而有利于DNA与组蛋白八聚体的解离,核小体结构松弛,从而使各种转录因子和协同转录因子能与DNA结合位点特异性结合,激活基因的转录及定点整合效率。JAK抑制剂通过抑制细胞JAK自发性磷酸化,影响其与STAT蛋白结合,使STAT转录因子磷酸化不能有效转移至细胞核内,影响非DNA连接因子的结合,有利于NHEJ/HDR因子的结合,进而有效增加基因整合至基因组的概率,提高基因组定点整合效率。
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