公开(公告)号：CN113736900A

公开(公告)日：2021-12-03

申请号：CN202111007800.2

申请日：2021-08-30

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 胡宇飞 ,  陈晓静 ,  黄吉雷 ,  庄楚雄

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6851

Abstract: 本发明公开了一种筛选单拷贝T‑DNA转基因植株的方法，通过植物基因组中一对参考扩增片段(R1，R2)和T‑DNA(T)扩增的Ct值在双拷贝转基因植株中构成夹心关系(R1‑T‑R2)；双拷贝T‑DNA转基因植株的Ct值介于R1和R2间，形成三明治式的R1‑T‑R2的夹心Ct关系。单拷贝相对双拷贝植株，其T‑DNA扩增Ct值增大约1，其Ct值移出夹心关系，而产生R1‑R2‑T的Ct模式；通过比较不同Ct值关系找出单拷贝T‑DNA转基因植株。本发明不需要计算ΔCt，ΔΔCt以及2‑ΔΔCt，通过直接展示两对参考序列(R1，R2)和T‑DNA的扩增Ct值的关系，判断转基因拷贝数的变化，方法直接、简单且可靠。

公开(公告)号：CN113736900B

公开(公告)日：2023-07-25

申请号：CN202111007800.2

申请日：2021-08-30

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 胡宇飞 ,  陈晓静 ,  黄吉雷 ,  庄楚雄

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6851

Abstract: 本发明公开了一种筛选单拷贝T‑DNA转基因植株的方法，通过植物基因组中一对参考扩增片段(R1，R2)和T‑DNA(T)扩增的Ct值在双拷贝转基因植株中构成夹心关系(R1‑T‑R2)；双拷贝T‑DNA转基因植株的Ct值介于R1和R2间，形成三明治式的R1‑T‑R2的夹心Ct关系。单拷贝相对双拷贝植株，其T‑DNA扩增Ct值增大约1，其Ct值移出夹心关系，而产生R1‑R2‑T的Ct模式；通过比较不同Ct值关系找出单拷贝T‑DNA转基因植株。本发明不需要计算ΔCt，ΔΔCt以及2‑ΔΔCt，通过直接展示两对参考序列(R1，R2)和T‑DNA的扩增Ct值的关系，判断转基因拷贝数的变化，方法直接、简单且可靠。