公开(公告)号：CN1307310C

公开(公告)日：2007-03-28

申请号：CN200510033296.8

申请日：2005-02-28

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 王振中 ,  王琪

IPC: C12N15/56 ,  C12N9/36 ,  C12N15/10

Abstract: 本发明公开了一种香蕉枯萎病菌致病性多聚半乳糖醛酸酶基因，本发明还公开了一种香蕉枯萎病菌致病性多聚半乳糖醛酸酶基因克隆，根据已测的PGC1蛋白N末端编码序列设计引物，以香蕉枯萎病菌4号生理小种菌株总RNA为模板，采用RT-PCR方法，合成cDNA的第一条链，5’RACE和3’RACE的方法克隆PGC1cDNA的全长序列，推测出PGC1的氨基酸序列。本发明获得的PGC1基因cDNA序列，可以作为区分FOC1号和4号小种的依据；将PGC1基因转化到真核微生物中，所表达的PGC1可以作为免疫蛋白抗原制作动物血清，作病原菌检测使用；真核微生物表达产物可以代替病原菌作耙标物，广泛筛选对PGC1有效的抗病基因，供香蕉抗枯萎病转基因育种使用。

公开(公告)号：CN1673366A

公开(公告)日：2005-09-28

申请号：CN200510033297.2

申请日：2005-02-28

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 王振中 ,  王琪

IPC: C12N9/24

Abstract: 本发明公开了一种香蕉枯萎病菌多聚半乳糖醛酸酶的提取纯化方法，将粗酶液上样于Sephacry S－10016/10凝胶层析柱，用柱平衡缓冲液洗脱，收集混合酶活性大于粗酶活性25％的洗脱液，浓缩脱盐，浓缩液上样于Sepharose SP XL16/10强阳离子交换层析柱，进行线性梯度洗脱，收集梯度洗脱部分，将酶活性大于上样液酶活性25％的洗脱液混合，浓缩脱盐，浓缩液上样于Sepharose FF CM弱阳离子交换层析柱，进行线性梯度洗脱，收集梯度洗脱峰，浓缩脱盐。本发明提取纯化方法从香蕉枯萎病菌中提取致病性内切半乳糖醛酸酶，可以作为该病菌的检疫检测的新的指标，并能应用致病性内切半乳糖醛酸酶，制备香蕉枯萎病菌抗血清及在筛选和培育新的香蕉抗病品种。

公开(公告)号：CN1693464A

公开(公告)日：2005-11-09

申请号：CN200510033296.8

申请日：2005-02-28

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 王振中 ,  王琪

IPC: C12N15/56 ,  C12N9/36 ,  C12N15/10

Abstract: 本发明公开了一种香蕉枯萎病菌致病性多聚半乳糖醛酸酶基因，本发明还公开了一种香蕉枯萎病菌致病性多聚半乳糖醛酸酶基因克隆，根据已测的PGC1蛋白N末端编码序列设计引物，以香蕉枯萎病菌4号生理小种菌株总RNA为模板，采用RT－PCR方法，合成cDNA的第一条链，5’RACE和3’RACE的方法克隆PGC1 cDNA的全长序列，推测出PGC1的氨基酸序列。本发明获得的PGC1基因cDNA序列，可以作为区分FOC1号和4号小种的依据；将PGC1基因转化到真核微生物中，所表达的PGC1可以作为免疫蛋白抗原制作动物血清，作病原菌检测使用；真核微生物表达产物可以代替病原菌作靶标物，广泛筛选对PGC1有效的抗病基因，供香蕉抗枯萎病转基因育种使用。