一种降解T-2毒素和HT-2毒素的对硝基苄基酯酶及其突变体的制备及应用

    公开(公告)号:CN118360269A

    公开(公告)日:2024-07-19

    申请号:CN202410453955.6

    申请日:2024-04-12

    Abstract: 本发明公开了一种具有降解T‑2毒素、HT‑2毒素、T‑2三醇和新茄病镰刀菌烯醇(NEO)活性的对硝基苄基酯酶(pnb CE)及其突变体pnb CEF314A的制备方法和应用。对硝基苄基酯酶核苷酸序列和氨基酸序列分别为SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2;突变体pnb CEF314A核苷酸序列和氨基酸序列为SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4。野生型pnb CE与突变体pnb CEF314A均可代谢T‑2毒素、HT‑2毒素、T‑2三醇和NEO,生成对应的水解产物。37℃,1h条件下,pnb CE野生型和突变体pnb CEF314A对T‑2毒素的降解率分别为23.47%和40.70%,并且突变体pnb CE F314A代谢T‑2主要形成无毒的产物。本发明属于农业生物技术领域,可应用于T‑2毒素和HT‑2毒素脱毒制剂的制备,在T‑2毒素的脱毒领域具广阔的应用前景。

    一种制备高转化率革兰氏阴性临床菌感受态细胞的方法

    公开(公告)号:CN110004078B

    公开(公告)日:2022-05-17

    申请号:CN201910214182.5

    申请日:2019-03-20

    Abstract: 本发明公开了一种制备高转化率革兰氏阴性临床菌感受态细胞的方法。该方法中所用培养基为:18~22g/L胰蛋白胨,4~6g/L酵母提取物,0.005~0.015mol/LNaCl,0.002~0.003mol/L KCL;菌体的清洗和重悬均使用8~12%甘油;感受态细胞分装后即刻用液氮速冻后再进行超低温保存。本发明对临床菌感受态细胞的制备工艺进行了优化,包括培养基和工艺条件的优化,培养基中不加入MgCl2/MgSO4,并筛选优化了合适配比的培养基配方,以及制备、保存条件,按照该方法制备的革兰氏阴性临床菌感受态细胞,其转化率得到大幅提升,解决了目前临床菌感受态制备的一个大问题,且该方法更简单高效,具有很好的应用价值和前景。

    一种制备高转化率革兰氏阴性临床菌感受态细胞的方法

    公开(公告)号:CN110004078A

    公开(公告)日:2019-07-12

    申请号:CN201910214182.5

    申请日:2019-03-20

    Abstract: 本发明公开了一种制备高转化率革兰氏阴性临床菌感受态细胞的方法。该方法中所用培养基为:18~22g/L胰蛋白胨,4~6g/L酵母提取物,0.005~0.015mol/LNaCl,0.002~0.003mol/L KCL;菌体的清洗和重悬均使用8~12%甘油;感受态细胞分装后即刻用液氮速冻后再进行超低温保存。本发明对临床菌感受态细胞的制备工艺进行了优化,包括培养基和工艺条件的优化,培养基中不加入MgCl2/MgSO4,并筛选优化了合适配比的培养基配方,以及制备、保存条件,按照该方法制备的革兰氏阴性临床菌感受态细胞,其转化率得到大幅提升,解决了目前临床菌感受态制备的一个大问题,且该方法更简单高效,具有很好的应用价值和前景。

    一种缓解脱氧雪腐镰刀菌烯醇的细胞毒性的方法

    公开(公告)号:CN118512447A

    公开(公告)日:2024-08-20

    申请号:CN202410546686.8

    申请日:2024-04-29

    Abstract: 本发明公开了烟酰胺在缓解脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)引起的细胞毒性中的应用,属于毒理领域。本发明提供了一种物质烟酰胺可有效缓解DON的细胞毒性。烟酰胺对HEK293T细胞的最佳浓度范围为≤20mM,无细胞毒害作用。在HEK293T细胞中,10mM和15mM烟酰胺可显著缓解200ng/mL DON引起的细胞毒性。本发明所述烟酰胺可应用于生物制剂和饲料添加剂的开发,具有良好的应用前景。

    一种基于人铁蛋白的纳米酶及其制备方法

    公开(公告)号:CN108707618B

    公开(公告)日:2022-04-08

    申请号:CN201810470199.2

    申请日:2018-05-16

    Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,具体公开了一种基于人铁蛋白的纳米酶及其制备方法。所述制备方法以人铁蛋白为融合伴侣,将目标酶置于其N端进行融合表达,在目标酶与人铁蛋白之间插入连接肽。本发明所述制备方法能够显著提高目标酶对底物的催化活性,且使酶对温度及pH有更强的耐受性。该制备方法不仅限于人铁蛋白与甲基对硫磷水解酶和大肠杆菌碱性磷酸酶的融合表达,还适用于人铁蛋白与多种酶的融合表达,用来改良目标酶的特性,在科学研究和应用基础研究中具有较高的研究价值和科学意义。

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