公开(公告)号：CN110004078B

公开(公告)日：2022-05-17

申请号：CN201910214182.5

申请日：2019-03-20

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 邓诣群 ,  张巧巧 ,  邓凤如 ,  文继开

IPC: C12N1/20

Abstract: 本发明公开了一种制备高转化率革兰氏阴性临床菌感受态细胞的方法。该方法中所用培养基为：18～22g/L胰蛋白胨，4～6g/L酵母提取物，0.005～0.015mol/LNaCl，0.002～0.003mol/L KCL；菌体的清洗和重悬均使用8～12％甘油；感受态细胞分装后即刻用液氮速冻后再进行超低温保存。本发明对临床菌感受态细胞的制备工艺进行了优化，包括培养基和工艺条件的优化，培养基中不加入MgCl2/MgSO4，并筛选优化了合适配比的培养基配方，以及制备、保存条件，按照该方法制备的革兰氏阴性临床菌感受态细胞，其转化率得到大幅提升，解决了目前临床菌感受态制备的一个大问题，且该方法更简单高效，具有很好的应用价值和前景。

公开(公告)号：CN110004078A

公开(公告)日：2019-07-12

申请号：CN201910214182.5

申请日：2019-03-20

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 邓诣群 ,  张巧巧 ,  邓凤如 ,  文继开

IPC: C12N1/20

Abstract: 本发明公开了一种制备高转化率革兰氏阴性临床菌感受态细胞的方法。该方法中所用培养基为：18～22g/L胰蛋白胨，4～6g/L酵母提取物，0.005～0.015mol/LNaCl，0.002～0.003mol/L KCL；菌体的清洗和重悬均使用8～12％甘油；感受态细胞分装后即刻用液氮速冻后再进行超低温保存。本发明对临床菌感受态细胞的制备工艺进行了优化，包括培养基和工艺条件的优化，培养基中不加入MgCl2/MgSO4，并筛选优化了合适配比的培养基配方，以及制备、保存条件，按照该方法制备的革兰氏阴性临床菌感受态细胞，其转化率得到大幅提升，解决了目前临床菌感受态制备的一个大问题，且该方法更简单高效，具有很好的应用价值和前景。