CAR-T治疗白血病并发细胞因子释放综合征的动物模型及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN116762762A

    公开(公告)日:2023-09-19

    申请号:CN202310751294.0

    申请日:2023-06-25

    Abstract: 本发明涉及白血病的研究领域,具体公开CAR‑T治疗白血病并发细胞因子释放综合征的动物模型及其制备方法和应用。CAR‑T治疗白血病并发细胞因子释放综合征的动物模型的制备方法,包括制取CD19CAR‑T细胞:外周血单个核细胞分离,T细胞磁珠分选,T细胞激活,慢病毒感染,CAR‑T细胞扩增;构建高低剂量CAR‑T回输后的CRS动物模型:将Nalm‑6细胞系植入动物活体内,进行白血病瘤负荷,获得白血病瘤负荷的活体动物,将CD19CAR‑T细胞系注射入白血病瘤负荷的活体动物中。CAR‑T治疗白血病并发细胞因子释放综合征的动物模型的新用途。本发明通过使用重度联合免疫缺陷小鼠和接种高低负荷肿瘤细胞、回输不同剂量CAR‑T细胞,构建出能模拟临床CRS的体内模型,为临床发掘更有效的干预措施提供科研指导。

    PECAM-1靶向性诊疗一体化纳米探针及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN116370660A

    公开(公告)日:2023-07-04

    申请号:CN202310295680.3

    申请日:2023-03-24

    Abstract: 本发明属于纳米探针技术领域,具体公开PECAM‑1靶向性诊疗一体化纳米探针及其制备方法和应用。包括获取PECAM‑1_4G6mAb:将肼基烟酰胺与PECAM‑1_4G6在酸性环境下反应,将反应所得产物过滤后在还原剂条件下与放射性核素洗液反应,获得PECAM‑1_4G6mAb;获取αPECAM‑1_AT@HCNPs:向HCNPs纳米粒的水溶液中加入足量N,N'‑碳酸二琥珀酰亚胺基,加入PECAM‑1_4G6mAb,室温反应,得到αPECAM‑1‑HCNPs纳米粒水溶液,然后将αPECAM‑1_HCNPs纳米粒子与抗凝血酶等比例共同溶解,使抗凝血酶通过静电作用吸附负载至PECAM‑1_HCNPs纳米粒子上,纯化获得αPECAM‑1_AT@HCNPs。本发明:利用具有适合CAR‑T治疗时间窗半衰期(6~8天)的核素标记单链抗体4G6早期捕捉CRS靶器官微血管显影。

    N-叠氮四酰化甘露糖在增强T细胞荧光标记中的应用和应用方法

    公开(公告)号:CN117517275A

    公开(公告)日:2024-02-06

    申请号:CN202311480995.1

    申请日:2023-11-08

    Inventor: 梅恒 陈钊钊 胡豫

    Abstract: 本发明属于生物正交反应和点击化学技术领域,具体公开N‑叠氮四酰化甘露糖在增强T细胞荧光标记中的应用和应用方法。一方面涉及N‑叠氮四酰化甘露糖在制备增强T细胞荧光标记产品中的应用及该增强T细胞荧光标记产品;另一方面涉及N‑叠氮四酰化甘露糖在制备肿瘤过继性T细胞治疗预后检测试剂中的应用。本发明实现经糖代谢手段无创修饰T细胞,不影响T细胞的正常生理代谢和基因组功能,而且能够根据研究需求,匹配相应荧光素,达到过继性T细胞可视化的目的,为过继性T细胞疗法科学研究的临床前细胞水平和动物水平的功能验证和检测提供了新的实施方案。

    高分子化合物、制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN113651965A

    公开(公告)日:2021-11-16

    申请号:CN202110830340.7

    申请日:2021-07-22

    Abstract: 本发明涉及生物医药技术领域,具体公开了高分子化合物、制备方法及其应用。该共聚体具有图4所示的通式。载药系统,包括所述共聚体和载于共聚体的药效增强制剂。共聚体的制备方法,包括如下步骤:活化聚己内酯的羧基,将羧基活化的聚己内酯与羟乙基淀粉溶液进行酯化反应,纯化得羟乙基淀粉‑聚己内酯共聚体。共聚体在制备防治肿瘤药物中的应用,载药系统在制备抗肿瘤药物中应用。本发明共聚体能够更好的用于载药,利于CAR‑T治疗肿瘤,LY/ICG@HES‑PCL在raji细胞淋巴瘤模型上,具有良好的肿瘤蓄积效果,实现通过ICG的光热效应,可以显著改善肿瘤外基质密度,提高CAR‑T对淋巴瘤组织的浸润,提升CAR‑T的增殖与活性。

    CD19-CAR-mRNA-LNP粒子及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN116970652A

    公开(公告)日:2023-10-31

    申请号:CN202310970999.1

    申请日:2023-08-03

    Inventor: 梅恒 胡豫 陈钊钊

    Abstract: 本发明涉及CAR转染技术领域,具体公开CD19‑CAR‑mRNA‑LNP粒子及其制备方法和应用。具体公开CAR‑mRNA‑LNP的制备方法,包括获取反应原料:获取脂质‑乙醇溶液,所述脂质‑乙醇溶液中的脂质纳米颗粒至少包括ALC‑0315、MC3、SM102中之一,获取mRNA‑柠檬酸缓冲液,所述mRNA‑柠檬酸缓冲液由柠檬酸缓冲液与mRNA混合形成,所述mRNA的序列如SEQ ID NO:1所示;微流控混合:将脂质‑乙醇溶液、mRNA‑柠檬酸缓冲液通过微米滤膜过滤,通过微流控技术混合制备得CAR‑mRNA‑LNP。还公开CAR‑mRNA‑LNP在制备CAR‑T转染试剂中的应用。本发明技术立足于临床需求,构建了一种基于CD19CAR‑mRNA脂质纳米颗粒(LNP)的转染载体,通过体外转染人原代T细胞生成CD19CAR‑T细胞,降低了成本并简化了CAR‑T制备流程,以期用于临床细胞治疗。

    荧光标记慢病毒载体及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN116355965A

    公开(公告)日:2023-06-30

    申请号:CN202310295684.1

    申请日:2023-03-24

    Inventor: 梅恒 胡豫 陈钊钊

    Abstract: 本发明属于慢病毒标记技术,尤其涉及荧光标记慢病毒载体及其制备方法和应用。荧光标记慢病毒载体的制备方法,包括获取N3‑LVs:将293T细胞与叠氮糖共孵育,通过糖代谢使细胞膜系统叠氮化,制得包膜表面可表达叠氮基团的N3‑293T细胞,将N3‑293T细胞与质粒包装系统共转染形成慢病毒载体N3‑LVs;制备Cy5‑LVs:将N3‑LVs与足量的二环并苯辛炔‑花菁素5(DBCO‑Cy5)混合,共孵育,去除多余二环并苯辛炔‑花菁素5,收集病毒浓缩液,获得荧光标记慢病毒载体Cy5‑LVs。本发明基于生物正交点击化学技术,通过在慢病毒包膜表面共价修饰荧光素,提供了一种简便易行的慢病毒荧光标记技术,成本较低。

    嵌合抗原受体T细胞标记及其在体示踪中的用途

    公开(公告)号:CN117965452A

    公开(公告)日:2024-05-03

    申请号:CN202410076082.1

    申请日:2024-01-18

    Inventor: 梅恒 陈钊钊 胡豫

    Abstract: 本发明属于CAR‑T疗法技术领域,具体公开嵌合抗原受体T细胞标记及其在体示踪中的用途。一方面涉及原位示踪嵌合抗原受体T细胞的制备方法及该方法制得的原位示踪嵌合抗原受体T细胞;另一方面涉及涉及前述原位示踪嵌合抗原受体T细胞在制备治疗肿瘤疾病的产品中的应用;还涉及可对CAR‑T细胞进行原位示踪的动物模型的制备方法。本发明提供了对CAR‑T细胞在体内生物分布的高度敏感和特异性的监测方法,为研究CAR‑T细胞治疗的生物学机制、优化治疗方案以及实现个体化治疗提供了强大的工具。

    DBCO-四乙基甘露糖胺在增强T细胞荧光标记中的应用和应用方法

    公开(公告)号:CN117517276A

    公开(公告)日:2024-02-06

    申请号:CN202311480996.6

    申请日:2023-11-08

    Inventor: 梅恒 陈钊钊 胡豫

    Abstract: 本发明属于生物正交反应和点击化学技术领域,具体公开DBCO‑四乙基甘露糖胺在增强T细胞荧光标记中的应用和应用方法。一方面为DBCO‑四乙基甘露糖胺在制备增强T细胞荧光标记产品中的应用;另一方面为荧光素非侵入性标记T细胞的方法,包括下述步骤:S1、将1.0~2.5μM的DBCO‑四乙基甘露糖胺与Jurkat细胞、T细胞中任一共孵育,S2、PBS润洗后加入荧光素进行荧光标记。本发明能够经糖代谢手段无创修饰T细胞,不影响T细胞的正常生理代谢和基因组功能,而且能够根据研究需求,匹配相应荧光素,达到过继性T细胞可视化的目的,为过继性T细胞疗法科学研究的临床前细胞水平和动物水平的功能验证和检测提供了新的方案。

    高分子化合物、制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN113651965B

    公开(公告)日:2022-12-30

    申请号:CN202110830340.7

    申请日:2021-07-22

    Abstract: 本发明涉及生物医药技术领域,具体公开了高分子化合物、制备方法及其应用。该共聚体具有图4所示的通式。载药系统,包括所述共聚体和载于共聚体的药效增强制剂。共聚体的制备方法,包括如下步骤:活化聚己内酯的羧基,将羧基活化的聚己内酯与羟乙基淀粉溶液进行酯化反应,纯化得羟乙基淀粉‑聚己内酯共聚体。共聚体在制备防治肿瘤药物中的应用,载药系统在制备抗肿瘤药物中应用。本发明共聚体能够更好的用于载药,利于CAR‑T治疗肿瘤,LY/ICG@HES‑PCL在raji细胞淋巴瘤模型上,具有良好的肿瘤蓄积效果,实现通过ICG的光热效应,可以显著改善肿瘤外基质密度,提高CAR‑T对淋巴瘤组织的浸润,提升CAR‑T的增殖与活性。

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