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公开(公告)号：CN115612670B
公开(公告)日：2024-10-25
申请号：CN202211364814.4
申请日：2022-11-02
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院
Abstract: 本发明涉及一种微波制备肿瘤细胞微颗粒的方法，本发明的方法包括以下步骤：1、取肺腺癌细胞系LLC，并在培养皿中培养24h以上；2、对细胞进行微波加热处理；3、将微波处理后的细胞放入恒温培养箱培养24h；4、收集上一步培养后的培养皿中的细胞上清，采用密度梯度离心方法进行多次离心处理，最终得到的沉淀即为肿瘤细胞微颗粒TMPMW。本发明通过微波制备TMPMW，过程简单，且可同时提高细胞微颗粒的产量；微波照射肿瘤细胞后分泌提取得到的微颗粒保留部分肿瘤自身生物活性物质，具有改善肿瘤免疫环境及作为肿瘤治疗疫苗的潜能；TMPMW可作为一种新型纳米材料，成为装载药物的平台，靶向生物治疗癌症等疾病。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN115612670A
公开(公告)日：2023-01-17
申请号：CN202211364814.4
申请日：2022-11-02
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院
Abstract: 本发明涉及一种微波制备肿瘤细胞微颗粒的方法，本发明的方法包括以下步骤：1、取肺腺癌细胞系LLC，并在培养皿中培养24h以上；2、对细胞进行微波加热处理；3、将微波处理后的细胞放入恒温培养箱培养24h；4、收集上一步培养后的培养皿中的细胞上清，采用密度梯度离心方法进行多次离心处理，最终得到的沉淀即为肿瘤细胞微颗粒TMPMW。本发明通过微波制备TMPMW，过程简单，且可同时提高细胞微颗粒的产量；微波照射肿瘤细胞后分泌提取得到的微颗粒保留部分肿瘤自身生物活性物质，具有改善肿瘤免疫环境及作为肿瘤治疗疫苗的潜能；TMPMW可作为一种新型纳米材料，成为装载药物的平台，靶向生物治疗癌症等疾病。
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公开(公告)号：CN115068439A
公开(公告)日：2022-09-20
申请号：CN202210590641.1
申请日：2022-05-26
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院
IPC: A61K9/50 , A61K47/46 , A61K31/405 , A61P35/00 , A61P35/04
Abstract: 本发明涉及一种包载代谢抑制剂的肿瘤微颗粒制备方法和应用，所述制备方法包括以下步骤：1、培养肿瘤细胞,生长稳定后，向培养基中加入他汀类药物；2、紫外线照射肿瘤细胞，之后将肿瘤细胞放入细胞培养箱孵育22‑26小时；3、孵育完毕后，收集细胞上清，经梯度离心得到包载代谢抑制剂的肿瘤微颗粒。本发明将肿瘤来源的细胞外颗粒(TMPs)作为载药平台，制备过程简易，保留生物安全性、生物兼容性、靶向性、细胞间通讯等功能；本发明发现他汀类药物新用途，实现以极低剂量的药物抑制肿瘤生长，并调节肿瘤代谢及改善肿瘤微环境，具有增强化疗疗效，延缓化疗耐药的潜能。
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公开(公告)号：CN118240755A
公开(公告)日：2024-06-25
申请号：CN202410376278.2
申请日：2024-03-29
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院
Abstract: 本发明公开了一种负载代谢抑制剂的CAF来源的细胞外囊泡的制备方法及其应用，属于生物医药技术领域。上述制备方法包括以下步骤：(1)使用完全培养基培养CAF细胞，待其生长稳定并长到皿面积80‑90％，去除原有培养基，更换为含有80‑120nM BAY‑876的单纯DMEM培养基，紫外线照射25‑35分钟，将细胞置于二氧化碳培养箱中孵育24‑48h；(2)孵育完毕，收集细胞上清；(3)离心去除细胞，收获上清；(4)离心去除细胞碎片，收获上清；(5)离心去除上清液，用PBS重悬；(6)离心去除上清，沉淀再用PBS重悬；(7)离心去除上清，用PBS重悬，即获得负载代谢抑制剂的CAF来源的细胞外囊泡。
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公开(公告)号：CN117582415B
公开(公告)日：2024-07-12
申请号：CN202311487093.0
申请日：2023-11-09
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院
IPC: A61K9/50 , A61K31/4375 , A61K47/46 , A61P31/04 , A61P3/10 , A61P9/10 , A61P25/16 , A61P19/02 , A61P29/00 , A61P35/00 , C12N5/09
Abstract: 本发明涉及一种包载中药的肿瘤细胞外囊泡及其制备方法，本发明的方法包括以下步骤：1、培养贴壁肺癌细胞系；2、采用梯度离心法收取肿瘤细胞外囊泡；3、将肿瘤细胞外囊泡与黄连素按质量比1:2配制电穿孔体系，采用离心法收集包载黄连素的肿瘤细胞外囊泡。由于间接载药的直接孵育法并不适用溶解度极低的黄连素，因此，本发明选择电穿孔法包载黄连素到肿瘤细胞外囊泡。同时，确定囊泡/黄连素不同质量配比条件下的载药效率，证明新技术路线能合成合格的EV‑Ber，并且确定了载药效率最高的囊泡/黄连素质量配比。
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公开(公告)号：CN117582415A
公开(公告)日：2024-02-23
申请号：CN202311487093.0
申请日：2023-11-09
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院
IPC: A61K9/50 , A61K31/4375 , A61K47/46 , A61P31/04 , A61P3/10 , A61P9/10 , A61P25/16 , A61P19/02 , A61P29/00 , A61P35/00 , C12N5/09
Abstract: 本发明涉及一种包载中药的肿瘤细胞外囊泡及其制备方法，本发明的方法包括以下步骤：1、培养贴壁肺癌细胞系；2、采用梯度离心法收取肿瘤细胞外囊泡；3、将肿瘤细胞外囊泡与黄连素按质量比1:2配制电穿孔体系，采用离心法收集包载黄连素的肿瘤细胞外囊泡。由于间接载药的直接孵育法并不适用溶解度极低的黄连素，因此，本发明选择电穿孔法包载黄连素到肿瘤细胞外囊泡。同时，确定囊泡/黄连素不同质量配比条件下的载药效率，证明新技术路线能合成合格的EV‑Ber，并且确定了载药效率最高的囊泡/黄连素质量配比。
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