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公开(公告)号：CN115927477A
公开(公告)日：2023-04-07
申请号：CN202211270320.X
申请日：2022-10-18
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院
IPC: C12N15/867 , C12N5/10 , C07K16/28 , G01N33/68 , G01N33/533 , G01N15/14
Abstract: 本发明公开了一种用于检测人源化CAR‑T抗CAR抗体的方法，其具体步骤如下：S1、将CHO细胞用慢病毒转染进人源化CAR，成为表达CAR的CHO细胞，作为靶细胞；S2、收集待检测样品；S3、使用CAR对应靶点的人源蛋白配制不同浓度标准品，建立标准曲线；S4、将不同浓度标准品和待测样品与靶细胞孵育，捕获所述抗CAR抗体；S5、将PE偶联的抗人IgGFc段抗体与CHO细胞孵育进行标记；S6、使用流式细胞术检测标准品、空白品、待测样品平均荧光强度，计算所述抗CAR抗体，能够及时了解CAR‑T细胞效能，作出改进提升；有助于在实际临床工作中及时了解患者回输后CAR‑T疗效和持续效果的变化、通过对抗CAR抗体表达量的分析及时监测复发可能性，有益于快速、有效地做出后续临床决策。
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公开(公告)号：CN114717317A
公开(公告)日：2022-07-08
申请号：CN202210391049.9
申请日：2022-04-14
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院
IPC: C12Q1/6886 , C12N15/11 , C12Q1/6851 , G01N33/574 , G01N33/532 , C12Q1/02
Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了通用的CAR拷贝数检测剂及其应用和应用方法。具体的，CAR拷贝数检测剂为探针和引物对及其混合物或试剂盒中任一；检测探针，其具有如SED ID NO：1所示序列；检测引物对，其分别具有如SED ID NO：3和SED ID NO：4所示序列。针对HIV前病毒保守序列的检测剂在制备CAR修饰免疫细胞治疗中CAR拷贝数检测产品中的应用，其中，CAR基于HIV改造的慢病毒载体转染至效应细胞。应用方法包括用前叙探针、引物对配成PCR反应体系及后续定量PCR的检测步骤。本发明的探针和引物对针对HIV保守的前病毒序列5’LTR，可以精确检测所有以HIV改造慢病毒载体转导CAR的拷贝数，具有通用性和普适性；检测的灵敏度高；不需要标准品。
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公开(公告)号：CN119307459A
公开(公告)日：2025-01-14
申请号：CN202411462614.1
申请日：2024-10-19
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院
IPC: C12N5/20 , C12N15/867 , C07K16/28 , C12N15/12
Abstract: 本发明属于医学和生物学技术领域，具体公开过表达特定蛋白的成纤维细胞BALB/c‑3T3在杂交瘤制备中的用途。一方面提供成纤维细胞BALB/c‑3T3在制备杂交瘤细胞株中的应用；另一方面提供过表达特定蛋白的成纤维细胞BALB/c‑3T3在杂交瘤细胞株中的应用；再就提供基于成纤维细胞BALB/c‑3T3的杂交瘤的制备方法。本公开中，利用过表达特定蛋白的成纤维细胞BALB/c‑3T3免疫可直接获得目标杂交瘤，具有较高的阳性率，并且单独使用就能实现制备杂交瘤细胞株而无需“蛋白+佐剂”免疫模式，更可以根据研究需求改变过表达的目标蛋白种类以制备不同的目标杂交瘤，另外也可以实现将综合成本降低为原来的一半。
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公开(公告)号：CN116679059A
公开(公告)日：2023-09-01
申请号：CN202310662465.2
申请日：2023-06-06
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院
IPC: G01N33/569 , G01N33/574 , G01N33/58 , G01N21/64
Abstract: 本发明属于生物检测技术领域，具体公开单个细胞表面抗原表达数量定量方法，S0、绘制标准曲线并构建标准方程；S1、目标细胞处理：对目标细胞进行预处理，并将目标细胞和与荧光定量试剂盒类别相同的荧光素偶联抗体共孵育，所述目标细胞可被相应荧光素偶联抗体检测；S2、获取细胞表面目的抗原分子的数量：利用荧光定量试剂盒，并通过流式仪上机检测目标细胞表面的目的抗原分子的相应荧光通道平均荧光强度MFI，并根据式II：目的抗原分子绝对数目m＝10^(b+a*Log10MFI)计算单个目标细胞表面目的抗原分子绝对数目m。本发明使检测单个细胞表面目的抗原分子表达数目更加简单易行，为体内外密切监测肿瘤细胞表面靶抗原表达、免疫细胞表面CAR表达以及其余目标细胞表面目标抗原表达提供可行性方案。
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公开(公告)号：CN116516007B
公开(公告)日：2024-01-19
申请号：CN202310413024.9
申请日：2023-04-18
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院
IPC: C12Q1/6886 , C12Q1/6851 , C12Q1/6869 , C12N15/11
Abstract: 本发明属于分子生物学技术领域，具体公开了CAR‑T细胞治疗疗效监测技术领域。引物的组合在制备检测肿瘤抗CD19的CAR‑T治疗预后效果的产品中的应用，其中，所述引物的组合包括表1所示的引物。引物的组合在制备检测肿瘤患者的肿瘤细胞表面CD19表达情况的产品中的应用，其中，所述引物的组合包括表1所示的引物。检测肿瘤抗CD19的CAR‑T治疗预后效果的产品，其有效检测组分引物如表1所示。本发明实现了利用分子生物学技术鉴别抗CD19CAR‑T治疗患者的肿瘤CD19表达情况以及监测治疗过程中可变剪接异构体的比例，并将疾病复发机制中可变剪接在临床队列中进行验证，完善了CAR‑T细胞治疗疗效的监测手段。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN117844759A
公开(公告)日：2024-04-09
申请号：CN202310628112.0
申请日：2023-05-31
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院
IPC: C12N5/10
Abstract: 本发明公开了一种蛋白磁珠偶联模拟肿瘤细胞刺激CAR‑T细胞的方法，S1、使用PBS与牛血清白蛋白、RPMI1640与胎牛血清分别配置Buffer与完全培养液；S2、震荡混匀链霉亲和素磁珠；S3、对S2中混匀的链霉亲和素磁珠分别与无菌双蒸水、生物素化肿瘤相关靶蛋白混合；S4、取靶向生物素化TAACAR‑T细胞至完全培养液中重悬；S5、设置空白组、对照组以及实验组，加入相同数目的CAR‑T细胞；S6、空白组添加完全培养液、对照组与链霉亲和素磁珠共培养、实验组与链霉素亲和素和生物素化TAA共培养；S7、检测空白组、对照组以及实验组培养上清细胞因子释放；此方法可在CAR‑T细胞体外培养中适时添加、去除“肿瘤细胞”，为探索CAR‑T细胞在接受肿瘤细胞刺激中表型、功能的变化及潜在机制提供便利。
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公开(公告)号：CN117825700A
公开(公告)日：2024-04-05
申请号：CN202311621814.2
申请日：2023-11-28
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院
IPC: G01N33/569 , G01N15/14 , G01N21/64 , G01N33/577
Abstract: 本发明涉及CAR‑T细胞检测分析技术领域，具体涉及一种适用于流式细胞术监测CAR‑T细胞数量及功能的检测试剂及方法。该适用于流式细胞术监测CAR‑T细胞数量及功能的检测试剂，包括第一组抗体混合物、第二组抗体混合物和第三组抗体，第一组抗体混合物包括CD3抗体、BCMA‑CAR抗体、CTLA4抗体、KLRG1抗体、CD8抗体、CD4抗体和CD45抗体；第二组抗体混合物包括BCMA‑CAR抗体、CD3抗体、CD28抗体、CD45RA抗体、CD8抗体、CD62L抗体、CD45抗体、PD‑1抗体；第三组抗体包括cCD 107a抗体；其中，第二组抗体混合物和第三组抗体用于同一管中的样本。上述适用于流式细胞术监测CAR‑T细胞数量及功能的检测试剂能够准确可靠的对CAR‑T细胞数量及质量进行监测，为新的治疗方案的确定和调整提供技术指导。
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公开(公告)号：CN116516007A
公开(公告)日：2023-08-01
申请号：CN202310413024.9
申请日：2023-04-18
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院
IPC: C12Q1/6886 , C12Q1/6851 , C12Q1/6869 , C12N15/11
Abstract: 本发明属于分子生物学技术领域，具体公开了CAR‑T细胞治疗疗效监测技术领域。引物的组合在制备检测肿瘤抗CD19的CAR‑T治疗预后效果的产品中的应用，其中，所述引物的组合包括表1所示的引物。引物的组合在制备检测肿瘤患者的肿瘤细胞表面CD19表达情况的产品中的应用，其中，所述引物的组合包括表1所示的引物。检测肿瘤抗CD19的CAR‑T治疗预后效果的产品，其有效检测组分引物如表1所示。本发明实现了利用分子生物学技术鉴别抗CD19CAR‑T治疗患者的肿瘤CD19表达情况以及监测治疗过程中可变剪接异构体的比例，并将疾病复发机制中可变剪接在临床队列中进行验证，完善了CAR‑T细胞治疗疗效的监测手段。
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公开(公告)号：CN114717317B
公开(公告)日：2023-05-02
申请号：CN202210391049.9
申请日：2022-04-14
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院
IPC: C12Q1/6886 , C12N15/11 , C12Q1/6851 , G01N33/574 , G01N33/532 , C12Q1/02
Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了通用的CAR拷贝数检测剂及其应用和应用方法。具体的，CAR拷贝数检测剂为探针和引物对及其混合物或试剂盒中任一；检测探针，其具有如SED ID NO：1所示序列；检测引物对，其分别具有如SED ID NO：3和SED ID NO：4所示序列。针对HIV前病毒保守序列的检测剂在制备CAR修饰免疫细胞治疗中CAR拷贝数检测产品中的应用，其中，CAR基于HIV改造的慢病毒载体转染至效应细胞。应用方法包括用前叙探针、引物对配成PCR反应体系及后续定量PCR的检测步骤。本发明的探针和引物对针对HIV保守的前病毒序列5’LTR，可以精确检测所有以HIV改造慢病毒载体转导CAR的拷贝数，具有通用性和普适性；检测的灵敏度高；不需要标准品。
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公开(公告)号：CN214284992U
公开(公告)日：2021-09-28
申请号：CN202022563033.0
申请日：2020-11-09
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院
IPC: A61B10/02
Abstract: 本实用新型公开了一种新型骨髓活检针，包括针体，所述针体的内部为空腔，所述针体的底侧中部开设有开孔，所述针体的顶端固定安装有握把，所述握把的顶侧中端活动贯穿连接有采样管，所述采样管的底端活动贯穿针体的顶端至针体内部的底侧；所述握把的内部开设有安装腔，所述安装腔内部底侧的左右两侧均固定安装有推杆电机，两个所述推杆电机的电机轴轴头均活动贯穿握把的底侧，两个所述推杆电机的电机轴轴头固定安装有推板。本实用新型通过设置的推杆马达和切片，在将针体插入骨髓后，可以通过推杆马达和切片快速对组织进行切断，以便于快速将针体拔出，有效提高了标本的质量，并降低了医生的操作难度。
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