一种基于过表达tfox基因的自然感受态的基因编辑方法及其应用

    公开(公告)号:CN110129351A

    公开(公告)日:2019-08-16

    申请号:CN201811060129.6

    申请日:2018-09-12

    Inventor: 刘智 胡俊

    Abstract: 本发明公开了一种基于过表达tfox基因的自然感受态的基因编辑方法及其应用,所述基因编辑方法将带有tfox基因的质粒转化至弧菌内,诱导弧菌自然感受态后进行基因编辑,其中基因编辑采用重叠延伸PCR的方法插入抗性基因对弧菌的待编辑基因进行编辑。本发明采用过表达诱导自然感受态的关键基因tfox,引起弧菌自然感受态的产生,进而仅通过直接外源添加同源遗传片段达到特定基因编辑的目的。本方法操作简单、原理通用,编辑过程用时短,可以快速将弧菌诱导至自然感受态,并进行需要的基因编辑,具有良好的推广价值。通过本发明的方法诱导的河流弧菌和霍乱弧菌,均处于自然感受态,是良好的外源DNA受体。

    一种微生物外膜囊泡及其制备、保存方法及应用

    公开(公告)号:CN115029258B

    公开(公告)日:2024-05-17

    申请号:CN202210314553.9

    申请日:2022-03-29

    Abstract: 本发明公开了一种微生物外膜囊泡,包括:所述外膜囊泡为从皮肤上的表皮葡萄球菌的细胞膜上分泌的双层膜结构的囊泡状小体,由细菌外膜和周质构成。本发明的微生物外膜囊泡利用其纳米尺寸进入到角质层中刺激角质形成细胞增强抗菌肽表达,降低特应性皮炎感染的风险;还可用于治疗特应性皮炎,对抗皮肤炎症、感染和伤口等。还可以作为一种营养成分,被表皮葡萄球菌吸收利用,促进有益菌增殖,具有纳米材料的本身属性,内部可以装载小分子药物,其可作为纳米载体应用到药物递送体系;在保存、运输和使用中也更方便。可通过发酵大规模生产,相较于直接应用活菌,外膜囊泡具有更好的生物安全型。能靶向到特定部位,也可作为疫苗使用。

    一种微生物外膜囊泡及其制备、保存方法及应用

    公开(公告)号:CN115029258A

    公开(公告)日:2022-09-09

    申请号:CN202210314553.9

    申请日:2022-03-29

    Abstract: 本发明公开了一种微生物外膜囊泡,包括:所述外膜囊泡为从皮肤上的表皮葡萄球菌的细胞膜上分泌的双层膜结构的囊泡状小体,由细菌外膜和周质构成。本发明的微生物外膜囊泡利用其纳米尺寸进入到角质层中刺激角质形成细胞增强抗菌肽表达,降低特应性皮炎感染的风险;还可用于治疗特应性皮炎,对抗皮肤炎症、感染和伤口等。还可以作为一种营养成分,被表皮葡萄球菌吸收利用,促进有益菌增殖,具有纳米材料的本身属性,内部可以装载小分子药物,其可作为纳米载体应用到药物递送体系;在保存、运输和使用中也更方便。可通过发酵大规模生产,相较于直接应用活菌,外膜囊泡具有更好的生物安全型。能靶向到特定部位,也可作为疫苗使用。

    一种快速提取基因组DNA的方法

    公开(公告)号:CN108866044A

    公开(公告)日:2018-11-23

    申请号:CN201810811700.7

    申请日:2018-07-23

    Inventor: 刘智 陈国忠

    Abstract: 本发明提供了一种快速提取基因组DNA的方法,其包括制备用于结合DNA的纤维素滤纸条;分别配制好裂解液,清洗液,以及洗脱液和/或扩增液;将含目标DNA的菌液浸入到含有所述裂解液中,裂解后得到粗提液;将所述用于结合DNA的纤维素滤纸条浸入到所述裂解后的粗提液中结合核酸;将所述用于结合DNA的纤维素滤纸条浸入到装有所述清洗液中,去除杂质;将所述用于结合DNA的纤维素滤纸条浸入到洗脱液/扩增液中,将核酸洗脱下来,得到目标DNA的粗提液;该方法利用纤维素纸在30s内即可纯化来源于动物,植物,微生物材料的DNA,不需要复杂的过滤,特定的装备,如移液枪,离心机;时间、材料成本低、样品适用性广。

    一种嗜黏液阿克曼氏菌口服递送系统及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN115487166B

    公开(公告)日:2024-04-26

    申请号:CN202211053948.4

    申请日:2022-08-30

    Inventor: 刘智 王雨阳

    Abstract: 本发明公开了一种嗜黏液阿克曼氏菌口服递送系统及其制备方法和应用,该口服递送系统为球形微胶囊,其芯材包括嗜黏液阿克曼氏菌,壁材为双层结构,外层为海藻酸钙层,内层为碳酸钙层,其中碳酸钙附着在AKK菌上,海藻酸钙包裹在碳酸钙层表面形成球形结构;在胃部海藻酸钙减缓碳酸钙的溶解,避免其全部溶解,在十二指肠和小肠,碳酸钙能够中和海藻酸钙侧链的负电荷,减缓海藻酸钙因静电作用溶胀的速度,避免崩解,在结肠,碳酸钙表面带负电荷,其与海藻酸钙侧链以及海藻酸钙侧链之间的静电作用,能够加快口服递送系统崩解释放内部益生菌,且碳酸钙溶解产生的CO2能够促进AKK菌的生长,利于益生菌定植,可应用于预防和改善肥胖和抑郁。

    一种酒精性抑郁动物模型的建立方法及其应用

    公开(公告)号:CN115104575A

    公开(公告)日:2022-09-27

    申请号:CN202210805716.3

    申请日:2022-07-08

    Abstract: 本发明公开了一种酒精性抑郁动物模型的建立方法,包括以下步骤:选取符合实验要求的实验动物,将预设灌胃量的急性酒精,多次灌胃实验动物进行预处理;急性酒精预处理后再采用LPS诱导实验动物直至出现抑郁样行为,并验证构建的酒精性抑郁模型;所述预设灌胃量,按照实验动物体重,以每只实验动物灌胃5‑10g/kg计,优选采用灌胃LPS的方式进行诱导,更佳符合酒精性抑郁发生的实际情况,按照实验动物的体重,以每只实验动物灌胃10‑15mg/kg计;采用本方法,在2‑4天内可以诱导出抑郁行为,相比慢性酒精诱导周期,该方法极大地缩短了实验造模时间,而且小鼠抑郁行为显著,构建的酒精性抑郁模型效果佳。

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