一种基于过表达tfox基因的自然感受态的基因编辑方法及其应用

    公开(公告)号:CN110129351A

    公开(公告)日:2019-08-16

    申请号:CN201811060129.6

    申请日:2018-09-12

    Inventor: 刘智 胡俊

    Abstract: 本发明公开了一种基于过表达tfox基因的自然感受态的基因编辑方法及其应用,所述基因编辑方法将带有tfox基因的质粒转化至弧菌内,诱导弧菌自然感受态后进行基因编辑,其中基因编辑采用重叠延伸PCR的方法插入抗性基因对弧菌的待编辑基因进行编辑。本发明采用过表达诱导自然感受态的关键基因tfox,引起弧菌自然感受态的产生,进而仅通过直接外源添加同源遗传片段达到特定基因编辑的目的。本方法操作简单、原理通用,编辑过程用时短,可以快速将弧菌诱导至自然感受态,并进行需要的基因编辑,具有良好的推广价值。通过本发明的方法诱导的河流弧菌和霍乱弧菌,均处于自然感受态,是良好的外源DNA受体。

    一种快速提取基因组DNA的方法

    公开(公告)号:CN108866044A

    公开(公告)日:2018-11-23

    申请号:CN201810811700.7

    申请日:2018-07-23

    Inventor: 刘智 陈国忠

    Abstract: 本发明提供了一种快速提取基因组DNA的方法,其包括制备用于结合DNA的纤维素滤纸条;分别配制好裂解液,清洗液,以及洗脱液和/或扩增液;将含目标DNA的菌液浸入到含有所述裂解液中,裂解后得到粗提液;将所述用于结合DNA的纤维素滤纸条浸入到所述裂解后的粗提液中结合核酸;将所述用于结合DNA的纤维素滤纸条浸入到装有所述清洗液中,去除杂质;将所述用于结合DNA的纤维素滤纸条浸入到洗脱液/扩增液中,将核酸洗脱下来,得到目标DNA的粗提液;该方法利用纤维素纸在30s内即可纯化来源于动物,植物,微生物材料的DNA,不需要复杂的过滤,特定的装备,如移液枪,离心机;时间、材料成本低、样品适用性广。

    一种基因组DNA快速提取试剂盒及其制备方法

    公开(公告)号:CN109055354A

    公开(公告)日:2018-12-21

    申请号:CN201810811693.0

    申请日:2018-07-23

    Inventor: 刘智 陈国忠

    CPC classification number: C12N15/1003

    Abstract: 本发明提供了一种基因组DNA快速提取试剂盒,其包括用于裂解细胞的裂解液,用于结合DNA的纤维素滤纸条,以及用于洗脱DNA的溶液;其中,所述纤维素滤纸条包括核酸结合区和手柄区,所述手柄区设有石蜡;所述用于洗脱DNA的溶液包括洗脱液和扩增液中的至少一种;所述纤维素滤纸条包括核酸结合区和手柄区,所述手柄区设有石蜡。本发明还提供了所述试剂盒的制备方法。该试剂盒利用纤维素纸在30s内即可纯化来源于动物,植物,微生物材料的DNA,不需要复杂的过滤,特定的装备,如移液枪,离心机;时间成本和材料成本更低、样品适用性更广,可适用于粪便中细菌的基因组,由于细菌感染的叶片等含有细菌的样品以及实验室纯培养的细菌。

    一种用于厌氧微生物的培养基配置和分装装置

    公开(公告)号:CN208667722U

    公开(公告)日:2019-03-29

    申请号:CN201820820987.5

    申请日:2018-05-30

    Inventor: 刘智

    Abstract: 本实用新型公开了一种用于厌氧微生物的培养基配置和分装装置,主要包括铜柱除氧装置、培养基配置装置和培养基无氧分装装置;所述铜柱除氧装置包括高纯氮气钢瓶、电加热装置以及两个以上可拆卸玻璃管;每个所述玻璃管中设有一个铜柱,多个所述玻璃管的一端通过多通阀和高纯氮气钢瓶连接,多个所述玻璃管的另一端通过多通阀和出气管口连接。本实用新型的除氧装置具有多个可切换和拆卸的铜柱,可以排除氢气还原的步骤,可长时间除氧,除氧效率高;培养基配置装置杜绝培养基脱氧过程中由于水分蒸发带来的体积变化;无氧分装装置排除培养基分装过程的氧气侵入。

    一种厌氧手套箱
    5.
    实用新型

    公开(公告)号:CN208667707U

    公开(公告)日:2019-03-29

    申请号:CN201820826108.X

    申请日:2018-05-30

    Inventor: 刘智 石长萍

    Abstract: 本实用新型公开了一种厌氧手套箱,包括箱体、除氧单元、循环风机;所述除氧单元包括气体预除氧单元和净化除氧单元;所述循环风机连接气体预除氧单元;所述气体预除氧单元连接所述净化除氧单元;所述净化除氧单元内填充钯催化剂。本实用新型中的气体预除氧单元和净化除氧单元可以用于处理氧气含量较高的厌氧气体,其中含有5~10%的氢气,可以将其中的氧气除尽,满足对厌氧环境要求较高的厌氧培养技术。

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