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公开(公告)号：CN114182024A
公开(公告)日：2022-03-15
申请号：CN202111504370.5
申请日：2021-12-09
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12Q1/6888
Abstract: 本发明公开了一种利用5S rRNA进行鱼类卵巢发育数量化的分子生物学方法，包括如下方法：获取特定鱼类雌鱼不同发育时期的卵巢样品，测定各发育时期的卵巢样品中5S rRNA占总RNA的比值以及初级卵母细胞体积占所有卵母细胞总体积的比值，构建5S rRNA占比与初级卵母细胞体积占比相关关系的公式，通过5S rRNA占比即可计算出初级卵母细胞体积占比，根据初级卵母细胞体积占比判断雌鱼卵巢发育的阶段。该方法解决了现阶段鱼类卵巢发育未建立有效数量化方法、卵巢发育判断标准不明确、主观性强、判断步骤繁琐、耗时长、取样致死等问题，可以通过非致死方式采取微量卵巢组织进行鱼类卵巢发育阶段的准确判断。
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公开(公告)号：CN113661948A
公开(公告)日：2021-11-19
申请号：CN202111037320.0
申请日：2021-09-06
Applicant: 华中农业大学
IPC: A01K61/10 , A23K50/80 , A23K20/116 , A23K20/184
Abstract: 本发明公开了一种自体受精获得全雌纯合黄颡鱼克隆系的方法，目的是通过黄颡鱼XX遗传型个体自身繁殖，即单个个体自身精卵结合，获得全雌性的纯合体黄颡鱼克隆系，为优良性状的保存和选育提供材料，步骤是：（1）将XX全雌黄颡鱼仔鱼养殖在27~34℃条件下，驯食人工配合饲料后，在饲料中同时添加来曲唑和甲基睾丸酮，投喂至精巢分化完成；（2）将XX个体养殖至性成熟，挑出腹部圆润并具有生殖突的个体；（3）将挑出的XX个体进行催产剂注射，达到效应时间后剖开鱼体腹部，挑出精巢与卵巢同时成熟的XX个体，取出精巢部分进行碾磨，将成熟卵从卵巢腔挤出，将精巢结合，从而获得单个个体自体受精的全雌纯合体黄颡鱼克隆群体。
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公开(公告)号：CN114182024B
公开(公告)日：2023-08-04
申请号：CN202111504370.5
申请日：2021-12-09
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12Q1/6888
Abstract: 本发明公开了一种利用5S rRNA进行鱼类卵巢发育数量化的分子生物学方法，包括如下方法：获取特定鱼类雌鱼不同发育时期的卵巢样品，测定各发育时期的卵巢样品中5S rRNA占总RNA的比值以及初级卵母细胞体积占所有卵母细胞总体积的比值，构建5S rRNA占比与初级卵母细胞体积占比相关关系的公式，通过5S rRNA占比即可计算出初级卵母细胞体积占比，根据初级卵母细胞体积占比判断雌鱼卵巢发育的阶段。该方法解决了现阶段鱼类卵巢发育未建立有效数量化方法、卵巢发育判断标准不明确、主观性强、判断步骤繁琐、耗时长、取样致死等问题，可以通过非致死方式采取微量卵巢组织进行鱼类卵巢发育阶段的准确判断。
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公开(公告)号：CN113528676A
公开(公告)日：2021-10-22
申请号：CN202110844483.3
申请日：2021-07-26
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6879
Abstract: 本发明公开了一种利用5S rRNA鉴定鱼类早期发育阶段生理性别的方法，步骤是：(1)利用总RNA提取试剂盒或TRIzol试剂常规提取动物细胞总RNA的方法，提取鱼类性腺组织总RNA，利用核酸分析仪测定OD260/280值，判断RNA纯度；利用琼脂糖凝胶电泳法分离总RNA，观察5S rRNA,18S rRNA和28S rRNA的亮度和分布；(2)将提取的性腺总RNA进行微毛细管电泳，根据核酸分析软件所得出的RNA类型覆盖区域面积大小，计算其中5S rRNA占总RNA的比例；(3)根据5S rRNA占总RNA比例判断鱼类早期发育阶段的生理型雌雄，其中5S rRNA比例小于或等于9.0％时判断为精巢组织，5S rRNA比例大于或等于12％时判断为卵巢组织。方法易行，操作简便，在12小时以内实现了100尾以上鱼类个体的生理型性别鉴定，确定了鱼类生理性别。
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