公开(公告)号：CN119120554A

公开(公告)日：2024-12-13

申请号：CN202411457597.2

申请日：2024-10-18

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 刘超 ,  张椿雨 ,  王芳 ,  陈鹏 ,  孙雪雨 ,  刘钰莲

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/29 ,  A01H5/10 ,  A01H6/20

Abstract: 本发明提供了一种利用基因编辑技术提高油菜种子大小和粒重的方法及其应用，涉及农作物分子育种技术领域。具体包括以下步骤：(1)在甘蓝型油菜BnaRSL核苷酸序列相似程度高的位置筛选靶点序列，并设计相对应的靶点引物；所述BnaRSL包括BnaA9RSL、BnaC5RSL、BnaA10RSL三个拷贝基因，其核苷酸序列分别如SEQ ID No.1、SEQ ID No.2、SEQ ID No.3所示；(2)利用所述靶点引物，构建用于所述甘蓝型油菜定向编辑的CRISPR/Cas9重组载体pBnaRSL；(3)将所述pBnaRSL载体转化甘蓝型油菜，进而获得油菜种子大小和粒重提高的株系。本发明提供的方法可以显著增加油菜种子的大小与重量，为油菜高产育种提供新的种质和方法，具备良好的应用前景。

公开(公告)号：CN112391408B

公开(公告)日：2022-12-23

申请号：CN202011331971.6

申请日：2020-11-24

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 刘超 ,  王芳 ,  范楚川 ,  张椿雨 ,  李安安 ,  张鸿远

IPC: C12N15/84 ,  A01H5/10 ,  A01H6/20

Abstract: 本发明属于农作物分子育种技术领域，具体涉及一种利用基因编辑技术选育高类胡萝卜素油菜种子的方法，获得的高类胡萝卜素油菜种质资源可用于油菜的品质育种。本发明所述利用基因编辑技术获得高类胡萝卜素油菜种子的方法，利用基因编辑技术突变甘蓝型油菜的BnaCCD4的三个拷贝BnaA1CCD4、BnaC1CCD4和BnaA8CCD4，构建用于甘蓝型油菜三个拷贝定向编辑的重组载体pBnaCCD4，并利用农杆菌介导的遗传转化方法转化甘蓝型油菜，获得种子中类胡萝卜素含量显著提高的株系。本发明所述方法可以显著提高油菜种子中类胡萝卜素的含量，尤其是β‑胡萝卜素的含量，为油菜品质改良提供新的种质资源，并拓宽了甘蓝型油菜品质育种的方向，具备良好的应用前景。

公开(公告)号：CN112391408A

公开(公告)日：2021-02-23

申请号：CN202011331971.6

申请日：2020-11-24

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 刘超 ,  王芳 ,  范楚川 ,  张椿雨 ,  李安安 ,  张鸿远

IPC: C12N15/84 ,  A01H5/10 ,  A01H6/20

Abstract: 本发明属于农作物分子育种技术领域，具体涉及一种利用基因编辑技术选育高类胡萝卜素油菜种子的方法，获得的高类胡萝卜素油菜种质资源可用于油菜的品质育种。本发明所述利用基因编辑技术获得高类胡萝卜素油菜种子的方法，利用基因编辑技术突变甘蓝型油菜的BnaCCD4的三个拷贝BnaA1CCD4、BnaC1CCD4和BnaA8CCD4，构建用于甘蓝型油菜三个拷贝定向编辑的重组载体pBnaCCD4，并利用农杆菌介导的遗传转化方法转化甘蓝型油菜，获得种子中类胡萝卜素含量显著提高的株系。本发明所述方法可以显著提高油菜种子中类胡萝卜素的含量，尤其是β‑胡萝卜素的含量，为油菜品质改良提供新的种质资源，并拓宽了甘蓝型油菜品质育种的方向，具备良好的应用前景。

公开(公告)号：CN111189938B

公开(公告)日：2021-02-19

申请号：CN202010026944.1

申请日：2020-01-10

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 郝海红 ,  袁宗辉 ,  黄啸 ,  黄玲利 ,  陶燕飞 ,  陈冬梅 ,  王玉莲 ,  谢书宇 ,  潘源虎 ,  王旭 ,  彭大鹏 ,  程古月 ,  瞿玮 ,  刘振利 ,  谢长清 ,  王芳 ,  刘春贝 ,  房诗薇 ,  郭金丽 ,  于耕涛 ,  王俊豪

IPC: G01N30/02 ,  G01N30/14 ,  G01N30/34

Abstract: 本发明公开了猪血浆及肺泡液内艾地普林和磺胺甲噁唑的定量检测方法，包括准备艾地普林和磺胺甲噁唑标准品溶液和待检测的样品提取液；线性回归分析，绘制标准曲线；分别用回收率和变异系数表示准确度和精密度；绘制工作曲线并计算出艾地普林和磺胺甲噁唑在猪血液和肺泡灌洗液中的回归方程和相关系数；实际样品测定和结果计算；本发明方法准确度高，精确度和灵敏度好，杂质较少，针对以往的HPLC法进行了改进，将梯度的时间以及条件进行了优化，增加了各峰之间的分离度，使得目标药物峰的灵敏度增高，提高了回收率。

公开(公告)号：CN111189938A

公开(公告)日：2020-05-22

申请号：CN202010026944.1

申请日：2020-01-10

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 郝海红 ,  袁宗辉 ,  黄啸 ,  黄玲利 ,  陶燕飞 ,  陈冬梅 ,  王玉莲 ,  谢书宇 ,  潘源虎 ,  王旭 ,  彭大鹏 ,  程古月 ,  瞿玮 ,  刘振利 ,  谢长清 ,  王芳 ,  刘春贝 ,  房诗薇 ,  郭金丽 ,  于耕涛 ,  王俊豪

IPC: G01N30/02 ,  G01N30/14 ,  G01N30/34

Abstract: 本发明公开了猪血浆及肺泡液内艾地普林和磺胺甲噁唑的定量检测方法，包括准备艾地普林和磺胺甲噁唑标准品溶液和待检测的样品提取液；线性回归分析，绘制标准曲线；分别用回收率和变异系数表示准确度和精密度；绘制工作曲线并计算出艾地普林和磺胺甲噁唑在猪血液和肺泡灌洗液中的回归方程和相关系数；实际样品测定和结果计算；本发明方法准确度高，精确度和灵敏度好，杂质较少，针对以往的HPLC法进行了改进，将梯度的时间以及条件进行了优化，增加了各峰之间的分离度，使得目标药物峰的灵敏度增高，提高了回收率。