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公开(公告)号:CN119082357A
公开(公告)日:2024-12-06
申请号:CN202411382974.0
申请日:2024-09-30
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开了一种快速检测梨黑斑病菌的MIRA‑LFD试剂盒及方法,属于植物病害快速检测技术领域;本发明通过靶向梨黑斑病菌的Alt a1基因,设计并筛选获得了用于快速检测梨黑斑病菌的引物探针组合,并将其进一步开发为可以稳定储存且具有良好复溶检测性能的冻干产品;本发明检测方案能够采用NaOH溶液(0.5M)常温粗提DNA,同时利用掌心温度即可完成MIRA反应,并能在胶体金试纸条上很好地显色,从而有效实现了梨黑斑病菌的田间现场检测;而且,本发明检测方案还具有操作简单、检测时间短、不依赖仪器设备、检出限低、准确可靠等优点,便于基层推广使用,对梨黑斑病的早期诊断和精准防治具有重要意义。
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公开(公告)号:CN108148794B
公开(公告)日:2020-12-22
申请号:CN201810202589.1
申请日:2018-03-13
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种广谱抑菌活性的枯草芽孢杆菌DYr3.3及制备方法和应用,拮抗细菌枯草芽孢杆菌菌株DYr3.3,CCTCC M 2018024,步骤是:(1)采集紫枝玫瑰根,将根切成大小的组织,经过70%酒精消毒,经无菌水冲洗后,放置于PDA培养基上暗培养,培养后,将长出来的细菌菌落转移至新的PDA培养基上划线分离纯化单菌落;(2)分离纯化后,获得一种拮抗细菌枯草芽孢杆菌菌株DYr3.3,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,该菌株DYr3.3在制备治疗或预防梨果实腐烂病药物中的应用。菌株DYr3.3经过液体发酵获得的DYr3.3菌液可以阻止因梨轮纹病和炭疽病危害造成的梨果实腐烂,对梨果实的腐烂具有良好的防病效果,显著抑制梨果实腐烂,防效率可达100%,广泛应用于梨果实腐烂病的防治。
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公开(公告)号:CN108148794A
公开(公告)日:2018-06-12
申请号:CN201810202589.1
申请日:2018-03-13
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种广谱抑菌活性的枯草芽孢杆菌DYr3.3及制备方法和应用,拮抗细菌枯草芽孢杆菌菌株DYr3.3,CCTCC M 2018024,步骤是:(1)采集紫枝玫瑰根,将根切成大小的组织,经过70%酒精消毒,经无菌水冲洗后,放置于PDA培养基上暗培养,培养后,将长出来的细菌菌落转移至新的PDA培养基上划线分离纯化单菌落;(2)分离纯化后,获得一种拮抗细菌枯草芽孢杆菌菌株DYr3.3,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,该菌株DYr3.3在制备治疗或预防梨果实腐烂病药物中的应用。菌株DYr3.3经过液体发酵获得的DYr3.3菌液可以阻止因梨轮纹病和炭疽病危害造成的梨果实腐烂,对梨果实的腐烂具有良好的防病效果,显著抑制梨果实腐烂,防效率可达100%,广泛应用于梨果实腐烂病的防治。
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公开(公告)号:CN102443580B
公开(公告)日:2013-11-13
申请号:CN201010509840.2
申请日:2010-10-15
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明属于分子生物学方法领域,涉及一种分离植物或微生物总RNA的试剂组合物及制备方法。以异硫氰酸胍、苯酚为主要成分,以NaCl、MgCl2等提供阳离子,以醋酸钠-醋酸缓冲系统稳定溶液pH,经氯仿简单抽提后,即可得高质量的RNA。由于本发明的RNA提取试剂中添加了糖原作为核酸沉淀剂,与同类试剂相比,核酸的沉降效率大为提高,对组织样品中含量很低的核酸成分亦能有效分离。使核酸沉降过程短时间内即可完成,免除了-20℃沉降数小时的过程,大大缩短了操作时间。该方法快捷、高效,适用样品广泛,比商业化TRIzol试剂更为廉价。克服了传统方法样品选择性强、操作繁琐、效率较低等缺点。且操作更为灵活,样品匀浆后可于-20℃保存3天再进行RNA的提取。
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公开(公告)号:CN118581140A
公开(公告)日:2024-09-03
申请号:CN202410838994.8
申请日:2024-06-26
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用梨果实愈伤组织进行基因功能验证的方法,具体为:切取三季梨果实并接种于诱导培养基中培养以获取愈伤组织,将愈伤组织置于增殖培养基中继代培养,用含有Kan抗性基因和目的基因的农杆菌侵染愈伤组织,再将愈伤组织转入添加有Kan和Tim的增殖培养基中暗培养,对鉴定阳性的愈伤组织进行传代,得到转基因纯合愈伤后进行基因功能验证。本发明首次利用“三季”果实成功建立了能够实现基因功能验证的愈伤组织转化系统,丰富了梨基因研究的工具和平台。
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公开(公告)号:CN116732031A
公开(公告)日:2023-09-12
申请号:CN202310522842.2
申请日:2023-05-05
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/84 , A01H5/00 , A01H6/74
Abstract: 本发明公开了梨miR482b‑4及其在调控寄主抗轮纹病中的应用,所述miR482b‑4的序列如SEQ ID NO.2所示;实施例数据表明,轮纹病菌响应下梨miR482b‑4下调表达,PcRGA3上调表达,且miR482b‑4负调控基因PcRGA3的抗病功能。本发明为梨抗病育种提供了有价值的候选材料,为有效防治轮纹病害提供了理论依据,对果树病害防控具有重要意义。
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公开(公告)号:CN116515837A
公开(公告)日:2023-08-01
申请号:CN202310522844.1
申请日:2023-05-05
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/113 , C12Q1/6895 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/74
Abstract: 本发明公开了IncRNA MSTRG.32189及其在调控植物抗病能力中的应用,所述MSTRG.32189的序列如SEQ ID NO.1所示,MSTRG.32189可抑制miR399b对靶基因的切割作用;将该IncRNA在烟草和拟南芥中过表达后,miR399b的表达量降低,miR399b靶基因的表达量增加,植物抗病性下降。本发明为培育抗病植物品种提供了一种新的策略和遗传资源。
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公开(公告)号:CN114793896B
公开(公告)日:2023-06-06
申请号:CN202210413414.1
申请日:2022-04-15
Applicant: 华中农业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明属于植物培育技术领域,公开了一种诱导西洋梨离体叶片获得再生完整植株的方法,包括:无菌材料的获取、组培苗继代培养、叶片再生培养、再生芽继代培养、再生苗生根培养及生根苗移栽。鉴于梨叶片再生不具备一套再生体系可以在不同品种中套用,本发明通过大量实验去摸索和明确再生参数,建立了西洋梨品种Tosca的高效再生体系,且移栽成活率高,为引种Tosca资源保存、扩繁及其遗传转化研究奠定了基础,且具有实践生产意义。
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公开(公告)号:CN114921421A
公开(公告)日:2022-08-19
申请号:CN202210492769.4
申请日:2022-05-07
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开一种从梨树腐烂病菌(Valsa pyri)中分离的新病毒,命名为Valsa pyri fusarivirus 1(VpFV1),其核苷酸序列如SEQ ID 1,具有抑制宿主致病力的作用。采用对峙培养及RNA介导原生质体转染的方法,VpFV1均能克服菌丝不亲和性及不依赖菌丝可在细胞外存在,证实其传染不同种类腐烂病菌,引起宿主腐烂病菌株弱毒特性。通过将含有病毒VpFV1的弱毒性YN‑3菌株与无毒菌株对峙培养接种,以及YN‑3菌株发酵液与其他种类腐烂病菌菌株共培养接种梨离体枝条,致病力测定均显示经过YN‑3菌株及其发酵液处理后其他腐烂病菌菌株的致病力均出现下降,证明YN‑3菌株具有良好的生防潜力,可用于梨腐烂病害的生物防治。
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公开(公告)号:CN108739385A
公开(公告)日:2018-11-06
申请号:CN201810563170.9
申请日:2018-06-04
Applicant: 华中农业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种砂梨叶片高效再生体系的建立方法及其应用,包括以下步骤:(1)取砂梨的带芽枝条进行消毒,将带叶芽的茎尖接种于继代培养基上生长,再将未感染苹果茎沟病毒(Apple stem grooving virus,ASGV)的离体植株叶片切成小块叶片;(2)将外植体叶片接种于再生培养基中暗处理后再转至光下培养,产生不定芽,所述的再生培养基以NN69营养液为基础,再添加3‑5mg/L 6‑BA+0.1‑0.2mg/L NAA +2.5g/L植物凝胶;(3)待不定芽长至0.5~1.2cm,将其侧芽切下,置于继代培养基上培养获得再生苗。上述方法获得的组培苗离体叶片为无菌叶片,可用于病菌致病性测定,不受季节限制,保障了试验结果成功率和准确性。
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