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公开(公告)号：CN114717360A
公开(公告)日：2022-07-08
申请号：CN202210312967.8
申请日：2022-03-28
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了百合病毒的多重RT‑PCR检测试剂盒及检测方法，检测试剂盒中包括序列如SEQ ID NO:1～18所示的能特异性检测九种百合病毒的引物对中的至少四对，所述九种百合病毒为CMV、LSV、PlAMV、LMoV、LCrV‑1、LAV‑1、LRoV‑1、LCaV‑1和LCaV‑2，配合优化后的检测条件，能实现9种病毒的同时检测，不仅准确率高、重复性好，而且耗时短、检测费用低廉。
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公开(公告)号：CN114717359A
公开(公告)日：2022-07-08
申请号：CN202210312962.5
申请日：2022-03-28
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种百合病毒LCrV1特异检测靶序列、试剂盒及检测方法，所述靶序列的碱基序列如SEQ ID NO:1所示，所述检测试剂盒包括碱基序列如SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示的引物对，所述检测方法为：将待测样品用改进的Trizol法对RNA进行提取，逆转录得到cDNA，使用引物对进行PCR扩增后采用凝胶电泳分析。本发明能够实现百合病毒LCrV1的快速、特异性检测，能够广泛用于田间采集的百合样品检测。
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公开(公告)号：CN108486063B
公开(公告)日：2021-05-28
申请号：CN201810132721.6
申请日：2018-02-09
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/12 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明提供了一种杂交瘤细胞株Anti‑CLas McAb2，其为小鼠杂交瘤细胞(Mus musculus Hybridoma)Anti‑CLas McAb2，其保藏编号为CCTCC NO：C2017123。本发明还提供了所述杂交瘤细胞株的制备方法以及由所述杂交瘤细胞株或其传代细胞株分泌产生的重组黄龙病菌CLas McAb2的单克隆抗体。本发明还提供了重组黄龙病菌CLas McAb2的单克隆抗体的应用，包括检测试剂盒以及免疫胶体金检测试纸条，均利用重组黄龙病菌CLas McAb2的单克隆抗体的特异性检测。具有特异性好、抗干扰性强、成本低、应用广泛的优点，能快速有效地检测柑橘材料中存在的黄龙病菌。
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公开(公告)号：CN108486064B
公开(公告)日：2021-02-26
申请号：CN201810132890.X
申请日：2018-02-09
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/12 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明提供了一种杂交瘤细胞株Anti‑CLas McAb1，其为小鼠杂交瘤细胞(Mus musculus Hybridoma)Anti‑CLas McAb1，其保藏编号为CCTCC NO：C2017219。本发明还提供了所述杂交瘤细胞株的制备方法及由所述杂交瘤细胞株或其传代细胞株分泌产生的重组黄龙病菌CLas McAb1的单克隆抗体。本发明还提供了重组黄龙病菌CLas McAb1的单克隆抗体的应用，包括检测试剂盒以及免疫胶体金检测试纸条，均利用重组黄龙病菌CLas McAb1的单克隆抗体的特异性。具有特异性好、抗干扰性强、成本低、应用广泛的优点，能快速有效地检测柑橘材料中存在的黄龙病菌。
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公开(公告)号：CN114717360B
公开(公告)日：2024-04-26
申请号：CN202210312967.8
申请日：2022-03-28
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了百合病毒的多重RT‑PCR检测试剂盒及检测方法，检测试剂盒中包括序列如SEQ ID NO:1～18所示的能特异性检测九种百合病毒的引物对中的至少四对，所述九种百合病毒为CMV、LSV、PlAMV、LMoV、LCrV‑1、LAV‑1、LRoV‑1、LCaV‑1和LCaV‑2，配合优化后的检测条件，能实现9种病毒的同时检测，不仅准确率高、重复性好，而且耗时短、检测费用低廉。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114703323A
公开(公告)日：2022-07-05
申请号：CN202210312978.6
申请日：2022-03-28
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种百合病毒LAV‑1特异检测靶序列、试剂盒及检测方法，所述靶序列的碱基序列如SEQ ID NO:1所示，所述检测试剂盒包括碱基序列如SEQID NO:2和SEQ ID NO:3所示的引物对，所述检测方法为：将待测样品用改进的Trizol法对RNA进行提取，逆转录得到cDNA，使用引物对进行PCR扩增进行凝胶电泳检测分析。本发明能够实现百合病毒LAV‑1的快速、特异性检测，为LAV‑1病毒的进一步研究提供了技术支持。
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公开(公告)号：CN102443580A
公开(公告)日：2012-05-09
申请号：CN201010509840.2
申请日：2010-10-15
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明属于分子生物学方法领域，涉及一种分离植物或微生物总RNA的试剂组合物及制备方法。以异硫氰酸胍、苯酚为主要成分，以NaCl、MgCl2等提供阳离子，以醋酸钠-醋酸缓冲系统稳定溶液pH，经氯仿简单抽提后，即可得高质量的RNA。由于本发明的RNA提取试剂中添加了糖原作为核酸沉淀剂，与同类试剂相比，核酸的沉降效率大为提高，对组织样品中含量很低的核酸成分亦能有效分离。使核酸沉降过程短时间内即可完成，免除了-20℃沉降数小时的过程，大大缩短了操作时间。该方法快捷、高效，适用样品广泛，比商业化TRIzol试剂更为廉价。克服了传统方法样品选择性强、操作繁琐、效率较低等缺点。且操作更为灵活，样品匀浆后可于-20℃保存3天再进行RNA的提取。
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公开(公告)号：CN117363761A
公开(公告)日：2024-01-09
申请号：CN202311342586.5
申请日：2023-10-13
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/01
Abstract: 本发明供了基于MIRA‑LFD快速鉴定柑橘黄龙病菌的引物探针组合及检测方法，所述引物探针组合包括一个引物对和一个探针，其中引物对序列如SEQ ID NO.1～2所示，探针序列如SEQ ID NO.3或4所示，该引物探针组合具有高灵敏性和特异性。采用该引物探针组合，本发明利用MIRA结合LFD技术提供了一种柑橘黄龙病菌的快速检测方法，实现了柑橘黄龙病的快速、灵敏、特异性、可视化诊断；而且该方法操作简便、省时高效、结果可靠，解决了传统检测技术耗时长、步骤繁琐等问题，检测过程不需要特殊的仪器设备，检测成本低，可应用于野外现场等特殊环境，对黄龙病菌田间早期检测与诊断具有重大意义。
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公开(公告)号：CN117363759A
公开(公告)日：2024-01-09
申请号：CN202311335823.5
申请日：2023-10-13
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/01
Abstract: 本发明公开了基于MIRA‑CRISPR/Cas12a快速检测柑橘黄龙病菌的检测方法和试剂盒，所述试剂盒包括MIRA引物对、2个crRNA分子和1个ssDNA荧光探针，所述检测方法为：先通过MIRA引物对待测样品进行扩增，CRISPR/Cas12a在crRNA的引导下识别MIRA扩增产物中特异性靶标，CRISPR/Cas12a、crRNA和靶标序列分子结合成复合物并切割检测体系内的ssDNA荧光探针，产生大量可被检测到的荧光信号。本发明采用特异性引物和探针，利用MIRA结合CRISPR/Cas12a实现对黄龙病菌的可视化检测，该方法具有操作简便，所需设备简单、便携，抗干扰能力强，耗时短等优点。而且本发明方法可突破实验室局限，能在1h内完成大量样品的现场检测，检测效率高，检测门槛低，具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN113324942A
公开(公告)日：2021-08-31
申请号：CN202110503826.X
申请日：2021-05-10
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N21/3577 , G06K9/62
Abstract: 本发明属于奶品分析技术领域，具体涉及一种原料牛奶、高温灭菌奶和掺加高温灭菌奶的原料牛奶的快速鉴定模型。发明步骤为：1)取原料牛奶、高温灭菌奶和原料牛奶中掺加不同比例高温灭菌奶作为检测样本；2)在中红光谱范围内对样本进行扫描，获得中红外光谱数据；3)对原始中红外光谱进行预处理，去除异常值；4)将预处理后的数据集按照分层抽样的原则划分为训练集和测试集；5)筛选合适建模光谱波段；6)在训练集上使用最近邻算法，通过10折交叉验证建立原料牛奶中掺加高温灭菌奶、原料牛奶和高温灭菌奶的鉴别模型。以准确性、kappa系数对模型进行评估和筛选；7)最优模型的验证与应用。
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