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公开(公告)号:CN107656066A
公开(公告)日:2018-02-02
申请号:CN201710798615.7
申请日:2017-09-07
Applicant: 华中农业大学
CPC classification number: C07K14/005 , C07K16/1081 , C12N2770/24122 , G01N33/56983 , G01N33/6893 , G01N2333/183
Abstract: 本发明属于动物病毒学与动物传染病学检测技术领域,具体公开了一种鸭坦布苏病毒E蛋白截短蛋白及应用。利用SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的蛋白作为包被抗原,保藏编号为CCTCC NO:C2017169的杂交瘤细胞株制备的鸭坦布苏病毒血清检测试剂盒,对被野毒感染过的鸭群血清及蛋黄抗体进行检测,具有很好的特异性;灵敏度高,鸭坦布苏病毒阳性血清在稀释到1:12800时仍能检测阳性,与传统的琼脂扩散试验相比,符合率高,操作简便,检测时间更短,适合大量样本同时检测。
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公开(公告)号:CN107656066B
公开(公告)日:2019-05-31
申请号:CN201710798615.7
申请日:2017-09-07
Applicant: 华中农业大学
CPC classification number: C07K14/005 , C07K16/1081 , C12N2770/24122 , G01N33/56983 , G01N33/6893 , G01N2333/183
Abstract: 本发明属于动物病毒学与动物传染病学检测技术领域,具体公开了一种鸭坦布苏病毒E蛋白截短蛋白及应用。利用SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的蛋白作为包被抗原,保藏编号为CCTCC NO:C2017169的杂交瘤细胞株制备的鸭坦布苏病毒血清检测试剂盒,对被野毒感染过的鸭群血清及蛋黄抗体进行检测,具有很好的特异性;灵敏度高,鸭坦布苏病毒阳性血清在稀释到1:12800时仍能检测阳性,与传统的琼脂扩散试验相比,符合率高,操作简便,检测时间更短,适合大量样本同时检测。
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公开(公告)号:CN103122353A
公开(公告)日:2013-05-29
申请号:CN201210364265.0
申请日:2012-09-27
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/42 , C12N15/866 , A61K48/00 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种猪O型口蹄疫病毒重组杆状病毒及制备方法和应用,参照FMDVO型流行株基因序列,人工合成VP0、VP1和VP3基因的序列,以pFBDPHmHNM1P10eGFP质粒为骨架载体,将VP0、VP1和VP3基因连入该质粒中,得到一种杆状病毒转移载体pFBDPHmVP013。取杆状病毒转移载体pFBDPHmVP013与DH10Bac大肠杆菌感受态细胞混合,筛选阳性菌落,得到重组穿梭载体Bacmid,将该穿梭载体Bacmid转染sf9细胞,收集细胞上清即获得重组杆状病毒QP-Ac-FVLP。重组杆状病毒高效地表达FMDVVP0、VP1和VP3蛋白并形成病毒样颗粒。以该病毒样颗粒制备亚单位疫苗,免疫小鼠后可诱导机体产生特异性免疫反应。
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公开(公告)号:CN106834351A
公开(公告)日:2017-06-13
申请号:CN201710010184.3
申请日:2017-01-06
Applicant: 华中农业大学
CPC classification number: C12N15/86 , A61K39/12 , A61K2039/5256 , A61K2039/5258 , A61K2039/552 , C07K14/005 , C12N7/00 , C12N15/66 , C12N2710/14021 , C12N2710/14043 , C12N2710/14051 , C12N2770/24122 , C12N2770/24134
Abstract: 本发明公开了一种基于杆状病毒表达系统的鸭坦布苏病毒亚单位疫苗制备及应用。本发明采用杆状病毒表达系统表达坦布苏prME蛋白,WB表明prME蛋白在sf9细胞和上清中成功表达,并且加工成熟后部分被切割为M蛋白和E蛋白,通过电镜观察到在sf9细胞内和分泌上清中均有直径大小约为30‑50nm的坦布苏病毒样颗粒存在,表明该蛋白在sf9细胞中自组装形成了类病毒粒子,这种类病毒粒子具有较强的免疫原性。通过两种不同方式纯化蛋白或病毒样颗粒,将蛋白或病毒样颗粒与佐剂按比例混合,可制备成安全、稳定、高效的抗鸭坦布苏病毒亚单位疫苗。将该疫苗免疫樱桃谷鸭和产蛋麻鸭后可诱导机体产生特异性免疫反应,并能保护60%的产蛋麻鸭免受鸭坦布苏病毒的攻击。
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公开(公告)号:CN103122353B
公开(公告)日:2014-11-12
申请号:CN201210364265.0
申请日:2012-09-27
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/42 , C12N15/866 , A61K48/00 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种猪O型口蹄疫病毒重组杆状病毒及制备方法和应用,参照FMDVO型流行株基因序列,人工合成VP0、VP1和VP3基因的序列,以pFBDPHmHNM1P10eGFP质粒为骨架载体,将VP0、VP1和VP3基因连入该质粒中,得到一种杆状病毒转移载体pFBDPHmVP013。取杆状病毒转移载体pFBDPHmVP013与DH10Bac大肠杆菌感受态细胞混合,筛选阳性菌落,得到重组穿梭载体Bacmid,将该穿梭载体Bacmid转染sf9细胞,收集细胞上清即获得重组杆状病毒QP-Ac-FVLP。重组杆状病毒高效地表达FMDVVP0、VP1和VP3蛋白并形成病毒样颗粒。以该病毒样颗粒制备亚单位疫苗,免疫小鼠后可诱导机体产生特异性免疫反应。
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