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公开(公告)号：CN100392070C
公开(公告)日：2008-06-04
申请号：CN200410054397.9
申请日：2004-09-08
Applicant: 华东师范大学
Abstract: 一种高效表达人胰高血糖素样肽-1的基因工程菌及其构建方法和应用，属于生物工程技术领域。该基因工程菌是携带含人胰高血糖素样肽-1基因，即GLP-1基因的重组质粒的大肠杆菌DH5α、BL21(DE3)或BLR(DE3)。该基因工程菌的构建方法是在DNA水平上，将含有人胰高血糖素样肽-1基因的DNA序列串联为多聚体，构建成表达载体，转化大肠杆菌，获得高效表达人胰高血糖素样肽-1的基因工程菌。用该基因工程菌，通过液体培养、纯化制得的人胰高血糖素样肽-1融合蛋白和制备人胰高血糖素样肽-1三步可生产人胰高血糖素样肽-1。本发明有以下优点：1、构建基因工程菌的人胰高血糖素样肽-1的表达量高；2、用该基因工程菌生产人胰高血糖素样肽-1时，纯化步骤简便，得率高，生产成本低。
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公开(公告)号：CN100344323C
公开(公告)日：2007-10-24
申请号：CN200410066897.4
申请日：2004-09-30
Applicant: 华东师范大学
Abstract: 一种人胰高血糖素样肽-1的复合物及其制备方法，属肽或蛋白质的修饰复合物及其制备的技术领域。该复合物中的人胰高血糖素样肽-1指人胰高血糖素样肽-1(7-37)或人胰高血糖素样肽-1(7-36)NH2，该复合物由人胰高血糖素样肽-1和含经琥珀酰亚胺活化的活性基团的单甲氧基聚乙二醇组成，两者通过前者的氨基酸游离氨基和后者的琥珀酰亚胺酯键形成的酰胺键连接在一起。将人胰高血糖素样肽-1与含经琥珀酰亚胺活化的活性基团的单甲氧基聚乙二醇进行mPEG修饰反应，两者连结成人胰高血糖素样肽-1的复合物，即mPEG-GLP-1。本发明的方法操作简便，原料易得。本发明的方法制备的产物，人胰高血糖素样肽-1生物稳定性高，体内半衰期长，生物利用度高。
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公开(公告)号：CN100523172C
公开(公告)日：2009-08-05
申请号：CN200410018543.2
申请日：2004-05-21
Applicant: 华东师范大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/12 , C12N15/16 , C12N15/63 , C12N15/70 , C12N15/72 , C12P21/02 , A61K38/17 , A61K38/32 , A61P37/02 , A61P35/00 , A61P31/18
Abstract: 一种高效表达人α1-胸腺肽的基因工程菌及其构建方法和应用，属于生物工程技术领域。该基因工程菌为大肠杆菌DH5α或BLR(DE3)，其携带的质粒中含有n个表达人α1-胸腺肽的基因，其中，n为1到16的整数，质粒的启动子为IPTG诱导启动子Lac，如质粒pET系列。在DNA水平上，将含有人α1-胸腺肽基因的DNA序列串联为多串体，构建成一系列表达载体，转化大肠杆菌，获得一系列高效表达人α1-胸腺肽的基因工程菌。用该基因工程菌可批量制备人α1-胸腺肽样品。本发明的优点在于，用本发明构建的基因工程菌生产人α1-胸腺肽样品，产量高，纯化工艺简单，生产成本低。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN1583793A
公开(公告)日：2005-02-23
申请号：CN200410018595.X
申请日：2004-05-24
Applicant: 华东师范大学
IPC: C07K17/02 , C07K14/435 , C07K14/47
Abstract: 一种人α1－胸腺肽的复合物及其制备方法，属肽或蛋白质的修饰复合物及其制备的技术领域。该复合物由人α1－胸腺肽和单甲氧基聚乙二醇组成，通过人α1－胸腺肽中赖氨酸的ε－NH2或N末端的α－NH2分别和单甲氧基聚乙二醇的琥珀酰亚胺酯键或醛基形成稳定的酰胺键或次级胺键连接在一起。将在人α1－胸腺肽蛋白质表面的游离氨基和带有经琥珀酰亚胺活化的活性基团的单甲氧基聚乙二醇或含醛基的单甲氧基聚乙二醇进行反应，两者连结成单甲氧基聚乙二醇—人α1－胸腺肽复合物，即mPEG－Tα1。本发明的制备方法操作简便，原料易得。本发明制备的复合物生物稳定性高，体内半衰期长，有助于提高人α1－胸腺肽的生物利用度。
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公开(公告)号：CN1314708C
公开(公告)日：2007-05-09
申请号：CN200410018595.X
申请日：2004-05-24
Applicant: 华东师范大学
IPC: C07K17/02 , C07K14/435 , C07K14/47
Abstract: 一种人α1-胸腺肽的复合物及其制备方法，属肽或蛋白质的修饰复合物及其制备的技术领域。该复合物由人α1-胸腺肽和单甲氧基聚乙二醇组成，通过人α1-胸腺肽中赖氨酸的ε-NH2或N末端的α-NH2分别和单甲氧基聚乙二醇的琥珀酰亚胺酯键或醛基形成稳定的酰胺键或次级胺键连接在一起。将在人α1-胸腺肽蛋白质表面的游离氨基和带有经琥珀酰亚胺活化的活性基团的单甲氧基聚乙二醇或含醛基的单甲氧基聚乙二醇进行反应，两者连结成单甲氧基聚乙二醇—人α1-胸腺肽复合物，即mPEG-Tα1。本发明的制备方法操作简便，原料易得。本发明制备的复合物生物稳定性高，体内半衰期长，有助于提高人α1-胸腺肽的生物利用度。
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公开(公告)号：CN1676163A
公开(公告)日：2005-10-05
申请号：CN200410066897.4
申请日：2004-09-30
Applicant: 华东师范大学
Abstract: 一种人胰高血糖素样肽－1的复合物及其制备方法，属肽或蛋白质的修饰复合物及其制备的技术领域。该复合物中的人胰高血糖素样肽－1指人胰高血糖素样肽－1(7－37)或人胰高血糖素样肽－1(7－36)NH2，该复合物由人胰高血糖素样肽－1和含经琥珀酰亚胺活化的活性基团的单甲氧基聚乙二醇组成，两者通过前者的氨基酸游离氨基和后者的琥珀酰亚胺酯键形成的酰胺键连接在一起。将人胰高血糖素样肽－1与含经琥珀酰亚胺活化的活性基团的单甲氧基聚乙二醇进行mPEG修饰反应，两者连结成人胰高血糖素样肽－1的复合物，即mPEG－GLP－1。本发明的方法操作简便，原料易得。本发明的方法制备的产物，人胰高血糖素样肽－1生物稳定性高，体内半衰期长，生物利用度高。
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公开(公告)号：CN1616652A
公开(公告)日：2005-05-18
申请号：CN200410018543.2
申请日：2004-05-21
Applicant: 华东师范大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/12 , C12N15/16 , C12N15/63 , C12N15/70 , C12N15/72 , C12P21/02 , A61K38/17 , A61K38/32
Abstract: 一种高效表达人α1－胸腺肽的基因工程菌及其构建方法和应用，属于生物工程技术领域。该基因工程菌为大肠杆菌DH5α、BL21(DE3)或BLR(DE3)，其携带的质粒中含有n个表达人α1－胸腺肽的基因，其中，n为1到16的整数，质粒的启动子为IPTG诱导启动子Lac、Tac或PT7，如质粒pET系列，pGEX系列，pQE系列等。在DNA水平上，将含有人α1－胸腺肽基因的DNA序列串联为多串体，构建成一系列表达载体，转化大肠杆菌，获得一系列高效表达人α1－胸腺肽的基因工程菌。用该基因工程菌可批量制备人α1－胸腺肽样品。本发明的优点在于，用本发明构建的基因工程菌生产人α1－胸腺肽样品，产量高，纯化工艺简单，生产成本低。
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公开(公告)号：CN1587385A
公开(公告)日：2005-03-02
申请号：CN200410054397.9
申请日：2004-09-08
Applicant: 华东师范大学
Abstract: 一种高效表达人胰高血糖素样肽－1的基因工程菌及其构建方法和应用，属于生物工程技术领域。该基因工程菌是携带含人胰高血糖素样肽－1基因，即GLP－1基因的重组质粒的大肠杆菌DH5α、BL21 (DE3)或BLR(DE3)。该基因工程菌的构建方法是在DNA水平上，将含有人胰高血糖素样肽－1基因的DNA序列串联为多聚体，构建成表达载体，转化大肠杆菌，获得高效表达人胰高血糖素样肽－1的基因工程菌。用该基因工程菌，通过液体培养、纯化制得的人胰高血糖素样肽－1融合蛋白和制备人胰高血糖素样肽－1三步可生产人胰高血糖素样肽－1。本发明有以下优点： 1.构建基因工程菌的人胰高血糖素样肽－1的表达量高；2.用该基因工程菌生产人胰高血糖素样肽－1时，纯化步骤简便，得率高，生产成本低。
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