一种定向生物合成GAMG的方法

    公开(公告)号:CN101603067A

    公开(公告)日:2009-12-16

    申请号:CN200910089554.2

    申请日:2009-07-23

    Abstract: 本发明为一种定向生物合成GAMG的方法,属于生物合成与生物转化技术领域。本发明的方法是利用产紫青霉菌在发酵培养基中生产相应的β-D-葡萄糖醛酸苷酶,然后将所获的β-D-葡萄糖醛酸苷酶加入含有甘草酸底物的转化液中,在酶的作用下定向水解甘草酸,获得GAMG粗品,再经有机溶剂萃取、树脂吸附、纯化得到GAMG产品。本发明用微生物酶做催化剂,反应效率高,且无污染;步骤简单,成本低;产物单一,纯度高。

    一种人工设计糖基修饰提高酶热稳定性的方法

    公开(公告)号:CN104894091B

    公开(公告)日:2018-08-21

    申请号:CN201510346747.7

    申请日:2015-06-19

    Abstract: 本发明提供了一种人工设计糖基修饰提高酶热稳定性的方法,属于生物工程领域。本发明通过对酶蛋白一级序列及空间结构进行组合分析,在酶蛋白亚基结合面上设计N‑糖基化位点,或在其亚基内部模体结合面上设计N‑糖基化位点,利用定点突变引入N‑糖基化修饰特征识别增强序列子,使糖链在酶蛋白亚基之间形成特定的糖基发卡结构或在酶蛋白亚基内部模体之间形成特定的糖基垫片结构,最大限度的增加了酶蛋白三级结构的刚性,稳定其空间构象免受高温环境的胁迫。本发明的酶蛋白改造方法,大幅度提高了酶蛋白的热稳定性,该方法实现了人工可控的提高酶蛋白的热稳定性,并且在一定程度上提高了酶活,强化了其催化特性。

    一种人工设计糖基修饰提高酶热稳定性的方法

    公开(公告)号:CN104894091A

    公开(公告)日:2015-09-09

    申请号:CN201510346747.7

    申请日:2015-06-19

    CPC classification number: C12N9/96 C12N9/2402 C12Y302/01139

    Abstract: 本发明提供了一种人工设计糖基修饰提高酶热稳定性的方法,属于生物工程领域。本发明通过对酶蛋白一级序列及空间结构进行组合分析,在酶蛋白亚基结合面上设计N-糖基化位点,或在其亚基内部模体结合面上设计N-糖基化位点,利用定点突变引入N-糖基化修饰特征识别增强序列子,使糖链在酶蛋白亚基之间形成特定的糖基发卡结构或在酶蛋白亚基内部模体之间形成特定的糖基垫片结构,最大限度的增加了酶蛋白三级结构的刚性,稳定其空间构象免受高温环境的胁迫。本发明的酶蛋白改造方法,大幅度提高了酶蛋白的热稳定性,该方法实现了人工可控的提高酶蛋白的热稳定性,并且在一定程度上提高了酶活,强化了其催化特性。

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