一种利用酿酒酵母合成3-O-葡萄糖基齐墩果酸和纤维二糖齐墩果酸的方法

    公开(公告)号:CN106318966B

    公开(公告)日:2019-08-09

    申请号:CN201610851950.4

    申请日:2016-09-26

    Abstract: 本发明提供了一种利用酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)工程菌生产3‑O‑葡萄糖基齐墩果酸和纤维二糖齐墩果酸的方法,属于生物工程领域。本发明通过化学法合成经密码子优化的P450细胞色素单加氧酶基因、细胞色素还原酶基因以及UDP‑葡萄糖转移酶基因,结合酿酒酵母启动子和终止子组建相应的基因表达盒,通过DNA大片段组装方法构建基因表达载体,并将表达载体导入能够生产β‑香树脂醇的酿酒酵母中。首次实现了在酿酒酵母中直接合成植物次生代谢产物3‑O‑葡萄糖基齐墩果酸和纤维二糖齐墩果酸,且合成的这两种化合物能够跨过酿酒酵母工程菌的细胞膜,简化下游分离萃取工艺,这为利用酿酒酵母生产低水溶性难跨膜的五环三萜类化合物提供了新思路。该方法工艺简单可用于发酵生产3‑O‑葡萄糖基齐墩果酸和纤维二糖齐墩果酸。

    一种利用酿酒酵母合成3-O-葡萄糖基齐墩果酸和纤维二糖齐墩果酸的方法

    公开(公告)号:CN106318966A

    公开(公告)日:2017-01-11

    申请号:CN201610851950.4

    申请日:2016-09-26

    Abstract: 本发明提供了一种利用酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)工程菌生产3-O-葡萄糖基齐墩果酸和纤维二糖齐墩果酸的方法,属于生物工程领域。本发明通过化学法合成经密码子优化的P450细胞色素单加氧酶基因、细胞色素还原酶基因以及UDP-葡萄糖转移酶基因,结合酿酒酵母启动子和终止子组建相应的基因表达盒,通过DNA大片段组装方法构建基因表达载体,并将表达载体导入能够生产β-香树脂醇的酿酒酵母中。首次实现了在酿酒酵母中直接合成植物次生代谢产物3-O-葡萄糖基齐墩果酸和纤维二糖齐墩果酸,且合成的这两种化合物能够跨过酿酒酵母工程菌的细胞膜,简化下游分离萃取工艺,这为利用酿酒酵母生产低水溶性难跨膜的五环三萜类化合物提供了新思路。该方法工艺简单可用于发酵生产3-O-葡萄糖基齐墩果酸和纤维二糖齐墩果酸。

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