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公开(公告)号：CN104450696A
公开(公告)日：2015-03-25
申请号：CN201410721269.9
申请日：2015-01-05
Abstract: 本发明的目的是提供一种双重组位点的双向启动植物表达载体系统，由一个双重组位点双向表达植物表达载体pRGFL和两个分别带有特异重组位点的克隆载体p-FRT、p-loxp组成。本发明所提供的双重组位点双向表达植物表达载体pRGFL是经改造的含有特定DNA分子的植物表达载体，本发明所提供的两个分别带有特异重组位点的克隆载体是在出发载体的多克隆位点分别插入特定DNA分子的重组载体。本发明的克隆载体p-FRT、克隆载体p-loxp经过XcmI酶或EcorV酶消化后形成带有T末端或平末端的载体，可以直接与目的基因的PCR产物连接达到克隆的目的。克隆载体p-FRT、克隆载体p-loxp上的目的基因在对应的重组酶的介导下，可以分别通过特异位点重组将双重组位点双向表达植物表达载体上的荧光蛋白报告基因替换，达到将目的基因转移至植物表达载体的目的，过程中只需要重组酶介导，不需其它操作，简便易行。
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公开(公告)号：CN105925625A
公开(公告)日：2016-09-07
申请号：CN201610413615.6
申请日：2016-06-14
CPC classification number: C12P7/22 , C12N11/10 , G01N30/02 , G01N2030/027
Abstract: 本发明涉及多菌株固定化细胞组合物连续生产4‑羟基肉桂醇的方法。该方法所用A菌株为重组菌株E.coli M15‑4Cl‑CCR，B菌株为重组菌株E.coli M15‑CAD；具体操作步骤如下：1、菌株培养；2、菌株的固定化，分别制得A菌株固定化细胞颗粒和B菌株固定化细胞颗粒；3、固定化细胞连续生产4‑羟基肉桂醇。本发明采用现代生物工程技术进行4‑羟基肉桂醇的生产，将多菌株固定化细胞组合物连续生产的方法运用于植物然代谢物的合成，具有重要的实践意义。同时建立了4‑羟基肉桂醇的高效液相色谱串联质谱检测方法，为这类芳香族聚合物提供更有效的分析手段。
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公开(公告)号：CN104450696B
公开(公告)日：2018-04-13
申请号：CN201410721269.9
申请日：2015-01-05
Abstract: 本发明的目的是提供一种双重组位点的双向启动植物表达载体系统，由一个双重组位点双向表达植物表达载体pRGFL和两个分别带有特异重组位点的克隆载体p‑FRT、p‑loxp组成。本发明所提供的双重组位点双向表达植物表达载体pRGFL是经改造的含有特定DNA分子的植物表达载体，本发明所提供的两个分别带有特异重组位点的克隆载体是在出发载体的多克隆位点分别插入特定DNA分子的重组载体。本发明的克隆载体p‑FRT、克隆载体p‑loxp经过XcmI酶或EcorV酶消化后形成带有T末端或平末端的载体，可以直接与目的基因的PCR产物连接达到克隆的目的。克隆载体p‑FRT、克隆载体p‑loxp上的目的基因在对应的重组酶的介导下，可以分别通过特异位点重组将双重组位点双向表达植物表达载体上的荧光蛋白报告基因替换，达到将目的基因转移至植物表达载体的目的，过程中只需要重组酶介导，不需其它操作，简便易行。
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公开(公告)号：CN104498540A
公开(公告)日：2015-04-08
申请号：CN201410721268.4
申请日：2014-12-03
CPC classification number: C12P7/24 , C12N9/0008 , C12N9/93 , C12Y102/01044 , C12Y602/01012
Abstract: 本发明公开了一种重组菌株及其全细胞催化生产4-羟基肉桂醛的方法，其特征是利用重组菌株全细胞作为生物催化剂催化4-羟基肉桂酸制备4-羟基肉桂醛，包括以下步骤：（1）构建重组菌株E.coli M15/pQE31-4CL1-CCR；（2）制备重组菌株全细胞；（3）利用上述重组菌株全细胞催化生产4-羟基肉桂醛，得到的产品经高效液相色谱串联质谱法检测。本发明首次提出了用生物转化的方法合成4-羟基肉桂醛的途径，具有反应条件温和，酶活性高，节约成本，操作简便等优点，提供了一种新的合成4-羟基肉桂醛的方法，同时也为植物次生代谢产物的生产提供了一种新思路。
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公开(公告)号：CN111280065A
公开(公告)日：2020-06-16
申请号：CN202010265138.X
申请日：2020-04-07
Applicant: 北京林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明提供了一种落叶松体细胞胚再生方法，所述方法的步骤包括：采集落叶松未成熟种子合子胚为外植体，诱导出落叶松胚性愈伤组织；在新继代培养基上培养7～10天，选择生长良好的胚性愈伤组织，接于锥形瓶中液体培养基中，于摇床50～125rpm，20～25℃，悬浮条件下暗培养4～7天；然后将培养物转入半固体培养基，于摇床50～125rpm，20～25℃，悬浮条件下暗培养4～7天；最后将培养物接于固体培养基表面，20～25℃，暗培养23～30天，形成后期子叶胚。所述方法能大量诱导产生优质体细胞胚，减少畸形胚，诱导体胚形成时间短，且能达到更好的同步化效果并且具有高诱导效率。
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公开(公告)号：CN101531557A
公开(公告)日：2009-09-16
申请号：CN200910082655.7
申请日：2009-04-23
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种多羟基化合物衍生化方法。该方法是将含糖样品置于1－甲基咪唑为催化剂，乙酸酐为衍生化试剂的反应体系中，进行乙酰化衍生化反应。本发明的方法可以在维持糖的天然构象的基础上进行乙酰化衍生化，衍生化后得到单一衍生化产物，更能够准确进行定性定量分析的各种单糖。
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公开(公告)号：CN1724675A
公开(公告)日：2006-01-25
申请号：CN200410070603.5
申请日：2004-07-22
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种调控植物木质素含量的方法。本发明所提供的调控植物木质素含量的方法，是将含有4CL1基因的表达载体转化植物，得到木质素含量升高的植物；将含有反义4CL1基因的表达载体转化植物，得到木质素含量降低的植物。本发明通过在植物细胞中用载体引入4CL1基因或反义4CL1基因，来生产木质素含量升高或降低的转基因植物特别是转基因树木，为培育木质素含量降低或升高的植物以及改良树木材性提供了一条重要的途径。
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公开(公告)号：CN101531687A
公开(公告)日：2009-09-16
申请号：CN200910082656.1
申请日：2009-04-23
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种多羟基化合物的衍生化试剂。该试剂，由DMSO、1－甲基咪唑和乙酸酐组成。本发明的试剂可以在维持单糖天然构象的基础上对其进行乙酰化衍生反应，衍生化反应后可以得到单一的衍生化产物，更能够准确进行定性定量分析各种多羟基化合物，避免了多种衍生化产物对分析的干扰。
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公开(公告)号：CN1733924A
公开(公告)日：2006-02-15
申请号：CN200410070592.0
申请日：2004-08-10
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明公开了调控植物木质素含量的一种方法。本发明所提供的调控植物木质素含量的方法，是将含有毛白杨4CL1启动子－4CL1融合基因的表达载体转化植物，得到木质素含量升高的植物；将含有毛白杨4CL1启动子－反义4CL1融合基因的表达载体转化植物，得到木质素含量降低的植物。本发明通过在植物细胞中引入毛白杨4CL1启动子－4CL1融合基因或毛白杨4CL1启动子－反义4CL1融合基因，来生产木质素含量升高或降低的转基因植物特别是转基因树木，为培育木质素含量降低或升高的植物以及改良树木材性提供了一条重要的途径。
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