-
公开(公告)号:CN114807209B
公开(公告)日:2023-11-17
申请号:CN202210322772.1
申请日:2022-03-30
Applicant: 北京擎科生物科技股份有限公司 , 国家林业和草原局生物灾害防控中心
Abstract: 本发明属于合成生物学领域,具体涉及一种提高DNA片段在宿主中转化效率的方法,以达到工业化批量组装DNA大片段的目的。本发明提供的方法将目的片段经过甲基化修饰后,使得转化效率提高,同样的DNA使用量,将会显著提高转化涂板后平板上长出的转化子数量,筛选到阳性克隆的可能性大大提高,待组装的DNA的使用量更少,使得生产的物料成本、人工成本、时间成本降低,有利于大片段DNA合成的工业化生产。
-
公开(公告)号:CN114807209A
公开(公告)日:2022-07-29
申请号:CN202210322772.1
申请日:2022-03-30
Applicant: 北京擎科生物科技有限公司 , 国家林业和草原局生物灾害防控中心
Abstract: 本发明属于合成生物学领域,具体涉及一种提高DNA片段在宿主中转化效率的方法,以达到工业化批量组装DNA大片段的目的。本发明提供的方法将目的片段经过甲基化修饰后,使得转化效率提高,同样的DNA使用量,将会显著提高转化涂板后平板上长出的转化子数量,筛选到阳性克隆的可能性大大提高,待组装的DNA的使用量更少,使得生产的物料成本、人工成本、时间成本降低,有利于大片段DNA合成的工业化生产。
-
-
公开(公告)号:CN117106746B
公开(公告)日:2024-11-22
申请号:CN202310944992.2
申请日:2022-06-01
Applicant: 北京擎科生物科技股份有限公司
Abstract: 本发明属于生物技术领域,公开了一种MMLV逆转录突变体,其通过将野生型MMLV逆转录酶的RNaseH结构域替换为增强与RNA‑DNA杂交链结合的结构域来获得。本发明还对所述突变体进行了突变设计,其中优选的突变组合为P326K、P401K、H126Y和N131M。与野生型相比,本发明的MMLV逆转录突变体具有更高的扩增效率。本发明还提供了本发明的MMLV逆转录酶突变体的序列及其在逆转录反应中的应用。
-
公开(公告)号:CN117106746A
公开(公告)日:2023-11-24
申请号:CN202310944992.2
申请日:2022-06-01
Applicant: 北京擎科生物科技股份有限公司
Abstract: 本发明属于生物技术领域,公开了一种MMLV逆转录突变体,其通过将野生型MMLV逆转录酶的RNaseH结构域替换为增强与RNA‑DNA杂交链结合的结构域来获得。本发明还对所述突变体进行了突变设计,其中优选的突变组合为E69K、D200K、P326K、P401K、T330P和T306K。与野生型相比,本发明的MMLV逆转录突变体具有更高的扩增效率。本发明还提供了本发明的MMLV逆转录酶突变体的序列及其在逆转录反应中的应用。
-
公开(公告)号:CN115011588B
公开(公告)日:2024-04-05
申请号:CN202210610398.5
申请日:2022-05-31
Applicant: 北京擎科生物科技股份有限公司
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明属于生物技术领域,公开了一种细菌基因组DNA提取试剂盒和细菌基因组DNA提取方法,所述试剂盒包括悬浮液、结合液、去蛋白液、漂洗液和洗脱液。本发明的试剂盒采用独特的缓冲液系统配合特异性吸附DNA的离心柱,能够快速1h内高效提取各种革兰氏阴性/阳性菌的基因组DNA,并最大限度的去除杂质蛋白及细胞中其他代谢物质。
-
公开(公告)号:CN116144630B
公开(公告)日:2023-10-10
申请号:CN202211348149.X
申请日:2022-10-31
Applicant: 北京擎科生物科技股份有限公司
Abstract: 本申请涉及双链特异性核酸酶,特别涉及双链特异性核酸酶变体及其应用。本申请的双链特异性核酸酶突变体的氨基酸序列与SEQ ID NO:1所示序列相比,具有一个或多个氨基酸取代,取代位点包括第95位、第104位、第107位、第111位、第326位和第327位中至少一个。本申请的双链特异性核酸酶变体与现有的DSN相比,活性更高;极大的推动了低成本、高效获取高活性DSN的工业化进程。
-
公开(公告)号:CN119979498A
公开(公告)日:2025-05-13
申请号:CN202311488942.4
申请日:2023-11-09
Applicant: 北京擎科生物科技股份有限公司
Abstract: 本发明涉及一种末端脱氧核苷酸转移酶的突变体、生产方法及应用。其相对于如SEQ ID NO.1所示的末端脱氧核苷酸转移酶具有(1)至(8)所示突变中的一个或者多个:(1)第47位谷氨酸(E)突变为苏氨酸(T)、(2)第54位谷氨酸(E)突变为苏氨酸(T)或者丝氨酸(S)、(3)第73位赖氨酸(K)突变为精氨酸(R)、(4)第210位精氨酸(R)突变为亮氨酸(L)、(5)第212位赖氨酸(K)突变为甘氨酸(G)、(6)第268位天冬氨酸(D)突变为丝氨酸(S)、(7)第270位甲硫氨酸(M)突变为苯丙氨酸(F),以及,(8)第273位苯丙氨酸(F)突变为亮氨酸(L)或者酪氨酸(Y)。该突变体相对于对应其野生型能够提高对修饰底物的掺入效率,酶活性得到有效提升。
-
公开(公告)号:CN116286715B
公开(公告)日:2025-02-21
申请号:CN202211666064.6
申请日:2022-12-23
Applicant: 北京擎科生物科技股份有限公司
Abstract: 本发明公开Tth DNA聚合酶突变体,所述突变体在Tth野生型聚合酶基础上具有如下一组突变:S515K、I640F、S741G和L789F;D734G和M763T;或E617D、D734G和M763T。本发明的Tth DNA聚合酶突变体在不依赖锰离子的条件下,其逆转录活性接近M‑MLV RT野生型的活性。适于将本发明的Tth DNA聚合酶突变体制备成试剂盒,具有广泛的应用前景。
-
公开(公告)号:CN117821422B
公开(公告)日:2024-11-08
申请号:CN202311670481.2
申请日:2023-12-07
Applicant: 北京擎科生物科技股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种核酸内切酶IV突变体,其中,所述核酸内切酶IV突变体相比于如SEQ ID NO:1所示的野生型核酸内切酶包含在以下一个或者多个位置处的突变:Y58、K61、K82、E83、K116、E171、R135、D139、K161、N205、E226、R231、E236、K253和I281。本发明提供的核酸内切酶IV突变体在宿主细胞中的可溶表达量相对于野生型核酸内切酶IV得到进一步提高,而其活性并无下降,这使得可以降低批量制备的成本,满足寡核苷酸批量生产的需求。大量的实验表明,相比于野生型核酸内切酶IV,本发明提供的核酸内切酶IV突变体的表达量可提高至少将近1倍,甚至可提高3倍多。
-
-
-
-
-
-
-
-
-