公开(公告)号：CN117821422B

公开(公告)日：2024-11-08

申请号：CN202311670481.2

申请日：2023-12-07

Applicant: 北京擎科生物科技股份有限公司

Inventor： 马石金 ,  王文朋 ,  李妍 ,  裴文悦 ,  李云仙 ,  严文培 ,  张雅茜

IPC: C12N9/22 ,  C12N15/55 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/34 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明提供了一种核酸内切酶IV突变体，其中，所述核酸内切酶IV突变体相比于如SEQ ID NO：1所示的野生型核酸内切酶包含在以下一个或者多个位置处的突变：Y58、K61、K82、E83、K116、E171、R135、D139、K161、N205、E226、R231、E236、K253和I281。本发明提供的核酸内切酶IV突变体在宿主细胞中的可溶表达量相对于野生型核酸内切酶IV得到进一步提高，而其活性并无下降，这使得可以降低批量制备的成本，满足寡核苷酸批量生产的需求。大量的实验表明，相比于野生型核酸内切酶IV，本发明提供的核酸内切酶IV突变体的表达量可提高至少将近1倍，甚至可提高3倍多。

公开(公告)号：CN117821422A

公开(公告)日：2024-04-05

申请号：CN202311670481.2

申请日：2023-12-07

Applicant: 北京擎科生物科技股份有限公司

Inventor： 马石金 ,  王文朋 ,  李妍 ,  裴文悦 ,  李云仙 ,  严文培 ,  张雅茜

IPC: C12N9/22 ,  C12N15/55 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/34 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明提供了一种核酸内切酶IV突变体，其中，所述核酸内切酶IV突变体相比于如SEQ ID NO：1所示的野生型核酸内切酶包含在以下一个或者多个位置处的突变：Y58、K61、K82、E83、K116、E171、R135、D139、K161、N205、E226、R231、E236、K253和I281。本发明提供的核酸内切酶IV突变体在宿主细胞中的可溶表达量相对于野生型核酸内切酶IV得到进一步提高，而其活性并无下降，这使得可以降低批量制备的成本，满足寡核苷酸批量生产的需求。大量的实验表明，相比于野生型核酸内切酶IV，本发明提供的核酸内切酶IV突变体的表达量可提高至少将近1倍，甚至可提高3倍多。

公开(公告)号：CN120060189A

公开(公告)日：2025-05-30

申请号：CN202311620316.6

申请日：2023-11-30

Applicant: 北京擎科生物科技股份有限公司

Inventor： 杜军 ,  李妍 ,  王文朋 ,  张雅茜 ,  李云仙 ,  严文培 ,  裴文悦

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/34 ,  C12R1/19

Abstract: 本申请属于基因工程和酶工程技术领域，具体涉及一种末端脱氧核苷酸转移酶突变体及其应用。本申请通过对野生型鸟类TdT结构进行分析，对影响该酶活性的氨基酸位点第47位谷氨酸(E)、第54位谷氨酸(E)、第158位赖氨酸(K)、第210位精氨酸(R)、第212位赖氨酸(K)、第213位天冬酰胺(N)、第214位异亮氨酸(I)、第273位苯丙氨酸(F)、第332位精氨酸(R)进行特定的设计，通过本申请设计得到的末端脱氧核苷酸转移酶突变体能够有效提升酶的活性。

公开(公告)号：CN119876080A

公开(公告)日：2025-04-25

申请号：CN202510065607.6

申请日：2025-01-15

Applicant: 北京擎科生物科技股份有限公司 ,  湖北擎科生物科技有限公司

Inventor： 马石金 ,  何树彻 ,  王文朋 ,  严文培 ,  李云仙 ,  裴文悦 ,  宋辉 ,  张雅茜

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12Q1/686 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明提供了一种KOD DNA聚合酶突变体及其生产方法和应用，所述KOD DNA聚合酶突变体具有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。所述生产方法包括如下步骤：培养能分泌所述KOD DNA聚合酶突变体的重组宿主细胞或者重组菌株，并从所得培养产物中分离KOD DNA聚合酶突变体。本发明的KOD DNA聚合酶突变体具有扩增活性好的特点，尤其是针对大片段的核酸具有良好的扩增活性；且采用本发明的生产方法生产KOD DNA聚合酶突变体，KOD DNA聚合酶突变体具有良好可溶表达性能；本发明的KOD DNA聚合酶突变体在制备用于PCR扩增的试剂和/或试剂盒方面具有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN118530964A

公开(公告)日：2024-08-23

申请号：CN202410789576.4

申请日：2024-06-18

Applicant: 北京擎科生物科技股份有限公司

Inventor： 杜军 ,  王文朋 ,  张雅茜 ,  李云仙 ,  严文培 ,  裴文悦

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/34 ,  C12N15/10 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种末端脱氧核苷酰转移酶及其应用，属于生物技术领域。本发明提供了一种末端脱氧核苷酰转移酶TdT‑368，所述末端脱氧核苷酰转移酶TdT‑368的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。dATP修饰底物的掺入活性较低，是dATP、dTTP、dCTP和dGTP这四种碱基中最难掺入的一种，而研究表明，所述末端脱氧核苷酰转移酶TdT‑368对TT末端起始链掺入修饰底物3’‑ONH2‑dATP的掺入效率为40％。因此，所述末端脱氧核苷酰转移酶TdT‑368在DNA的合成中极具应用前景。