公开(公告)号：CN111549053A

公开(公告)日：2020-08-18

申请号：CN202010439718.6

申请日：2020-05-22

Applicant: 北京市农林科学院

Inventor： 王桂香 ,  宗梅 ,  刘凡 ,  田守卫 ,  刘迪 ,  武娅歌 ,  韩硕 ,  郭宁 ,  段蒙蒙

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/54 ,  C12N15/29 ,  A01H4/00 ,  A01H5/00 ,  A01H6/20

Abstract: 本发明公开了一种花椰菜单核苷酸突变的方法。本发明公开的花椰菜单核苷酸突变的方法包括：以下胚轴为外植体，利用BE3系统对花椰菜进行基因编辑，得到发生单核苷酸突变的花椰菜，花椰菜为花椰菜Korso，该方法采用PHSE901-Basta进行，PHSE901-Basta的序列为序列表中序列3，侵染外植体的菌液浓度满足OD600值为0.1。利用本发明的方法对花椰菜Korso的ALS基因和CENH3基因进行单核苷酸突变，ALS基因和CENH3基因的编辑效率分别为24.7％和80.0％。本发明在花椰菜乃至芸薹属蔬菜的种质改良、基于突变体库进行的基因分离和基因功能验证等方面都提供了一个有效的技术手段。

公开(公告)号：CN111549053B

公开(公告)日：2022-06-07

申请号：CN202010439718.6

申请日：2020-05-22

Applicant: 北京市农林科学院

Inventor： 王桂香 ,  宗梅 ,  刘凡 ,  田守卫 ,  刘迪 ,  武娅歌 ,  韩硕 ,  郭宁 ,  段蒙蒙

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/54 ,  C12N15/29 ,  A01H4/00 ,  A01H5/00 ,  A01H6/20

Abstract: 本发明公开了一种花椰菜单核苷酸突变的方法。本发明公开的花椰菜单核苷酸突变的方法包括：以下胚轴为外植体，利用BE3系统对花椰菜进行基因编辑，得到发生单核苷酸突变的花椰菜，花椰菜为花椰菜Korso，该方法采用PHSE901‑Basta进行，PHSE901‑Basta的序列为序列表中序列3，侵染外植体的菌液浓度满足OD600值为0.1。利用本发明的方法对花椰菜Korso的ALS基因和CENH3基因进行单核苷酸突变，ALS基因和CENH3基因的编辑效率分别为24.7％和80.0％。本发明在花椰菜乃至芸薹属蔬菜的种质改良、基于突变体库进行的基因分离和基因功能验证等方面都提供了一个有效的技术手段。