公开(公告)号：CN106544327B

公开(公告)日：2020-01-17

申请号：CN201610967094.9

申请日：2016-10-28

Applicant: 北京大学深圳研究生院

Inventor： 梁园梅 ,  江东 ,  成家杨 ,  毛睿慈

IPC: C12N9/02 ,  C12N15/74 ,  C12N1/21 ,  C12R1/89

Abstract: 本发明公开了一种利用聚球藻PCC 7942制备漆酶的方法，包括步骤：将S7942 NSIIRA、S7942 NSIILA、aadA、rep‑origin、SLAC五个片段进行PCR扩增后重组，再扩增收获第一菌体，提取质粒作为重组质粒；聚球藻PCC 7942的自然转化：S1、将聚球藻PCC 7942菌落转移至Bg‑11液体培养基中活化培养7天后用作接种液；S2、将接种液添加至新鲜的Bg‑11液体培养基中培养，直至聚球藻PCC 7942菌落中的第二菌体的OD 730达到2.0～2.5，获得第一培养体系；S3、向第一培养体系中加入重组质粒并培养，直至第二菌体的OD 730稳定，获得第二培养体系；S4、将第二培养体系涂布于含有筛选抗性的Bg‑11固体培养基上并培养，直至出现转化子，获得漆酶。根据本发明的方法所获得的漆酶对染料具有良好的降解作用。

公开(公告)号：CN107353337A

公开(公告)日：2017-11-17

申请号：CN201710597354.2

申请日：2017-07-20

Applicant: 北京大学深圳研究生院

Inventor： 梁园梅 ,  江东 ,  毛睿慈

IPC: C07K14/795 ,  C07K1/14 ,  C12N1/20 ,  C12R1/01

CPC classification number: C07K14/795 ,  C12N1/20

Abstract: 本发明公开了一种嗜热C-藻蓝蛋白，其具有如序列1所示的氨基酸序列，并且该氨基酸序列的第21、28、33、37、42及145位中的不超过3个特征位置的氨基酸可调。本发明还提供了从聚球藻属蓝细菌中提取上述嗜热C-藻蓝蛋白的方法。根据本发明的从聚球藻属蓝细菌中提取嗜热C-藻蓝蛋白的方法，其获得的嗜热C-藻蓝蛋白具有良好的热稳定性以及酸碱耐受力；相比现有技术中通过螺旋藻等提取的藻蓝蛋白，其良好的热稳定性和酸碱耐受力能够使得其在工业应用中具有更广泛的应用范围，表现出更为显著的应用优势。

公开(公告)号：CN106544327A

公开(公告)日：2017-03-29

申请号：CN201610967094.9

申请日：2016-10-28

Applicant: 北京大学深圳研究生院

Inventor： 梁园梅 ,  江东 ,  成家杨 ,  毛睿慈

IPC: C12N9/02 ,  C12N15/74 ,  C12N1/21 ,  C12R1/89

Abstract: 本发明公开了一种利用聚球藻PCC 7942制备漆酶的方法，包括步骤：将S7942 NSIIRA、S7942 NSIILA、aadA、rep‑origin、SLAC五个片段进行PCR扩增后重组，再扩增收获第一菌体，提取质粒作为重组质粒；聚球藻PCC 7942的自然转化：S1、将聚球藻PCC 7942菌落转移至Bg‑11液体培养基中活化培养7天后用作接种液；S2、将接种液添加至新鲜的Bg‑11液体培养基中培养，直至聚球藻PCC 7942菌落中的第二菌体的OD 730达到2.0～2.5，获得第一培养体系；S3、向第一培养体系中加入重组质粒并培养，直至第二菌体的OD 730稳定，获得第二培养体系；S4、将第二培养体系涂布于含有筛选抗性的Bg‑11固体培养基上并培养，直至出现转化子，获得漆酶。根据本发明的方法所获得的漆酶对染料具有良好的降解作用。