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公开(公告)号:CN104805078A
公开(公告)日:2015-07-29
申请号:CN201410043605.9
申请日:2014-01-28
Applicant: 北京大学
Abstract: 在原核生物中,CRISPR/Cas(Clustered regularly interspaced short palindromic repeals and CRISPR associated)系统中的cas9蛋白被证实与两种小RNA(crRNA、tracrRNA)结合对外源核酸进行识别直接剪切已达到保护自身的目的。科学家们充分利用这一特性,用cas9和gRNA(将crRNA和tracrRNA融合成一条相对较长的RNA,gRNA)对目的DNA序列进行剪切,从而实现基因定点修饰。然而现有的Cas9/gRNA对靶基因的切割效率较低,一般在5%~30%之间,应用会受到一定的限制。本发明中利用高效筛选体系,筛选出一系列可以提高Cas9活性的gRNA。
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公开(公告)号:CN104569396A
公开(公告)日:2015-04-29
申请号:CN201510040880.X
申请日:2015-01-27
Applicant: 北京唯尚立德生物科技有限公司 , 北京大学
IPC: G01N33/574
CPC classification number: G01N33/57438
Abstract: 本发明涉及肝癌诊断试剂及其用途。具体而言,本发明涉及TGFβ1或TGFβ1与甲胎蛋白或TGFβ1与其它常规肝癌检测指标之一或多种的组合或TGFβ1与甲胎蛋白以及其它常规肝癌检测指标之一或多种的组合在制备诊断肝癌的试剂中的用途。本发明的TGFβ1肝癌诊断标志物单指标使用即可分区肝癌组和正常组,基本区分肝癌组和其它癌症组以及肝癌组和肝炎组,与其它常规肝癌检测指标联合使用则效果更佳。
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公开(公告)号:CN107880132B
公开(公告)日:2022-06-17
申请号:CN201610873788.6
申请日:2016-09-30
Applicant: 北京大学 , 北京唯尚立德生物科技有限公司
Abstract: 本发明涉及一种融合蛋白、使用其进行同源重组的方法以及其在将外源DNA分子同源重组到靶标序列中的应用。本发明的融合蛋白包括CRISPR蛋白、TALEN或者ZFN蛋白,生物素结合蛋白以及连接子;其通过将外源单链DNA分子招募到CRISPR、TALEN或者ZFN蛋白切割的双链DNA断裂处,实现外源DNA序列的高效、精确插入;与传统的CRISPR基因编辑技术相比,本发明的融合蛋白及使用其的同源重组方法大幅度地提高了同源重组效率。
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公开(公告)号:CN104844696A
公开(公告)日:2015-08-19
申请号:CN201410056380.0
申请日:2014-02-19
Applicant: 北京大学
Abstract: 一种“转录激活子样效应因子(Transcription Activator Like Effectors,TALE)”功能蛋白,所述“转录激活子样效应因子”功能蛋白的重复可变的双氨基酸残基RVD(repeat variable di-residues)分别为精氨酸R和缬氨酸V、或者分别为缬氨酸V和异亮氨酸I、或者分别为甘氨酸G和天冬氨酸D、或者分别为精氨酸R和色氨酸W、或者分别为苏氨酸T和甘氨酸G、或者分别为半胱氨酸C和甘氨酸G、或者分别为谷氨酸E和半胱氨酸C。
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公开(公告)号:CN107880132A
公开(公告)日:2018-04-06
申请号:CN201610873788.6
申请日:2016-09-30
Applicant: 北京大学 , 北京唯尚立德生物科技有限公司
CPC classification number: C07K14/00 , C12N15/85 , C12N2800/107 , C12N2800/80 , C12N2810/10
Abstract: 本发明涉及一种融合蛋白、使用其进行同源重组的方法以及其在将外源DNA分子同源重组到靶标序列中的应用。本发明的融合蛋白包括CRISPR蛋白、TALEN或者ZFN蛋白,生物素结合蛋白以及连接子;其通过将外源单链DNA分子招募到CRISPR、TALEN或者ZFN蛋白切割的双链DNA断裂处,实现外源DNA序列的高效、精确插入;与传统的CRISPR基因编辑技术相比,本发明的融合蛋白及使用其的同源重组方法大幅度地提高了同源重组效率。
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公开(公告)号:CN104569396B
公开(公告)日:2018-02-23
申请号:CN201510040880.X
申请日:2015-01-27
Applicant: 北京唯尚立德生物科技有限公司 , 北京大学
IPC: G01N33/574
Abstract: 本发明涉及肝癌诊断试剂及其用途。具体而言,本发明涉及TGFβ1或TGFβ1与甲胎蛋白或TGFβ1与其它常规肝癌检测指标之一或多种的组合或TGFβ1与甲胎蛋白以及其它常规肝癌检测指标之一或多种的组合在制备诊断肝癌的试剂中的用途。本发明的TGFβ1肝癌诊断标志物单指标使用即可分区肝癌组和正常组,基本区分肝癌组和其它癌症组以及肝癌组和肝炎组,与其它常规肝癌检测指标联合使用则效果更佳。
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公开(公告)号:CN105624195A
公开(公告)日:2016-06-01
申请号:CN201410593647.X
申请日:2014-10-30
Applicant: 北京大学
IPC: C12N15/873 , A01K67/027 , A61K49/00
Abstract: 构建灵长类动物肝癌模型的方法,包括以下步骤:a)将特异性靶向miR122的gRNA序列插入到适宜的载体中,构建出体外转录miR122的模板载体;b)将cas9基因的序列插入到适宜的载体中,构建出体外转录cas9基因的模板载体;c)以步骤a)中的载体为模板进行PCR扩增,得到体外转录miR122的gRNA的模板;d)用限制性内切酶将步骤b)中的模板载体线性化,得到体外转录cas9基因的模板;e)以步骤c)和d)中的产物为模板进行体外转录,得到特异性靶向miR122的gRNA和cas9基因的mRNA;f)将步骤e)中的gRNA和mRNA注射到所述动物的受精卵细胞中,或者注射到卵母细胞中,再与所述动物的精子进行体外受精得到受精卵细胞;g)将步骤f)中的受精卵细胞移植入所述动物的子宫中,由此产生稳定的敲除miR122的动物子代。
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