公开(公告)号：CN107805634A

公开(公告)日：2018-03-16

申请号：CN201610808052.0

申请日：2016-09-07

Applicant: 北京大学

Inventor： 席建忠 ,  叶延桢 ,  王博伦 ,  骆宇峰

IPC: C12N9/22 ,  C12N15/11 ,  C12N15/63 ,  G01N33/573 ,  C12Q1/6876 ,  A61K38/16 ,  A61K31/713

CPC classification number: C12N9/22 ,  A61K31/713 ,  A61K38/00 ,  C12N15/111 ,  C12N2310/11 ,  C12Q1/6876 ,  G01N33/573 ,  G01N2333/916 ,  C12N2320/30

Abstract: 本发明涉及用于序列操纵的Argonaute-核酸序列组分系统、方法以及组合物。具体而言，本发明涉及能在核酸链帮助下切割靶核苷酸序列的Argonaute、Argonaute-核酸序列组分组合物、Argonaute-核酸序列组分序列操纵系统，及利用所述Argonaute、Argonaute-核酸序列组分组合物和Argonaute-核酸序列组分序列操纵系统操纵序列的方法。本发明的Argonaute可以在常温下在核酸链帮助下切割靶核苷酸序列，切割效率不低于20％，最佳盐浓度在100-200毫摩尔/升。

公开(公告)号：CN104805078A

公开(公告)日：2015-07-29

申请号：CN201410043605.9

申请日：2014-01-28

Applicant: 北京大学

Inventor： 席建忠 ,  叶延桢 ,  孙常宏

IPC: C12N15/11 ,  C12N15/10

Abstract: 在原核生物中，CRISPR/Cas(Clustered regularly interspaced short palindromic repeals and CRISPR associated)系统中的cas9蛋白被证实与两种小RNA(crRNA、tracrRNA)结合对外源核酸进行识别直接剪切已达到保护自身的目的。科学家们充分利用这一特性，用cas9和gRNA(将crRNA和tracrRNA融合成一条相对较长的RNA，gRNA)对目的DNA序列进行剪切，从而实现基因定点修饰。然而现有的Cas9/gRNA对靶基因的切割效率较低，一般在5％～30％之间，应用会受到一定的限制。本发明中利用高效筛选体系，筛选出一系列可以提高Cas9活性的gRNA。