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公开(公告)号：CN102839196A
公开(公告)日：2012-12-26
申请号：CN201210366956.4
申请日：2012-09-28
Applicant: 北京农业生物技术研究中心
Abstract: 本发明提供一种含有穿膜肽的提高玉米转基因效率的转化体系及方法；所述的转化体系中，含有外源DNA和穿膜肽；所述的外源DNA和穿膜肽的质量比为1:1-3。该转化方法的步骤为选取自交授粉后的玉米的果穗的苞叶和花丝，将所述的转化体系滴在切口凹陷处。本发明在线性DNA或质粒DNA溶液中添加的穿膜肽，利用穿膜肽的特性将提高外源DNA片段整合到受体玉米基因组中的效率；本发明操作简便，无需昂贵仪器，生产成本低廉。本发明不受玉米基因型（自交系品种）和转化基因种类的限制，所以适用范围广泛；本发明采用线性DNA方法直接将外源基因导入玉米基因组，可去除质粒DNA骨架系列、特别是抗生素基因进入植物基因组，培育的转基因植物更安全，具有更好的应用前景。
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公开(公告)号：CN101985661B
公开(公告)日：2012-12-26
申请号：CN201010578779.7
申请日：2010-12-08
Applicant: 北京农业生物技术研究中心
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明涉及转基因植物检测领域，特别涉及一种快速检测转基因玉米的方法，该方法利用环介导等温扩增反应(LAMP)检测转基因玉米中的抗草丁膦Bar基因。本发明不需要特殊仪器（如PCR仪），较实验室常规律方法更快捷，经济。本发明鉴定简便，有极高的特异性，只要用肉眼观察或浊度仪紫外成像系统检测沉淀浊度就能够判断目的片段扩增与否，从而判断出用于检测的样品玉米植株的基因组中是否含有抗草丁膦Bar基因，而不必用凝胶电泳的方法来观察。
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公开(公告)号：CN104745488B
公开(公告)日：2017-12-12
申请号：CN201510159431.7
申请日：2015-04-03
Applicant: 北京农业生物技术研究中心
Abstract: 本发明属于病原菌的分离鉴定领域，特别涉及一种通过回接分离获得万寿菊黑斑病病原菌单孢系的方法。该方法的步骤包括：病残植株采集、孢子悬液配制、回接、寄生菌分离、产孢、单孢系分离。本发明的寄生菌分离步骤采用的植株是人工回接步骤中得到的自然发病的植株，而不是采用田间病株，寄生菌分离步骤之后仅经过一次转皿即可用单孢进行超低温贮藏，获得具有良好的活力的单胞子系；本发明得到一批菌系(7～9个单孢系)所需要时间将从半年缩短到1个月，较前分离的速度得到显著提高；本发明有效地剔除了腐生菌的存在，能够准确获得万寿菊黑斑病病原菌。
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公开(公告)号：CN104745488A
公开(公告)日：2015-07-01
申请号：CN201510159431.7
申请日：2015-04-03
Applicant: 北京农业生物技术研究中心
CPC classification number: C12N1/14
Abstract: 本发明属于病原菌的分离鉴定领域，特别涉及一种通过回接分离获得万寿菊黑斑病病原菌单孢系的方法。该方法的步骤包括：病残植株采集、孢子悬液配制、回接、寄生菌分离、产孢、单孢系分离。本发明的寄生菌分离步骤采用的植株是人工回接步骤中得到的自然发病的植株，而不是采用田间病株，寄生菌分离步骤之后仅经过一次转皿即可用单孢进行超低温贮藏，获得具有良好的活力的单胞子系；本发明得到一批菌系(7～9个单孢系)所需要时间将从半年缩短到1个月，较前分离的速度得到显著提高；本发明有效地剔除了腐生菌的存在，能够准确获得万寿菊黑斑病病原菌。
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公开(公告)号：CN102524080B
公开(公告)日：2013-08-14
申请号：CN201210070183.5
申请日：2012-03-16
Applicant: 北京农业生物技术研究中心
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明属于组织培养技术领域，特别涉及一种提高菊花体细胞胚再生效率的培养方法，该方法将菊花的茎段外植体培养成为无菌苗后，再取叶盘外植体于诱导培养基，进行体细胞胚诱导培养，得到胚性愈伤组织和所述的菊花体细胞胚。本发明仅采用一种诱导培养基即可直接诱导叶盘外植体得到胚性愈伤组织和所述的菊花体细胞胚，菊花体细胞胚再生效率高，遗传稳定，操作简便；在体细胞胚诱导培养中先进行暗培养再进行光照培养，明显提高再生效率；避免使用激动素（KT）配制培养基，降低了培养成本。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102524080A
公开(公告)日：2012-07-04
申请号：CN201210070183.5
申请日：2012-03-16
Applicant: 北京农业生物技术研究中心
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明属于组织培养技术领域，特别涉及一种提高菊花体细胞胚再生效率的培养方法，该方法将菊花的茎段外植体培养成为无菌苗后，再取叶盘外植体于诱导培养基，进行体细胞胚诱导培养，得到胚性愈伤组织和所述的菊花体细胞胚。本发明仅采用一种诱导培养基即可直接诱导叶盘外植体得到胚性愈伤组织和所述的菊花体细胞胚，菊花体细胞胚再生效率高，遗传稳定，操作简便；在体细胞胚诱导培养中先进行暗培养再进行光照培养，明显提高再生效率；避免使用激动素（KT）配制培养基，降低了培养成本。
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公开(公告)号：CN101985661A
公开(公告)日：2011-03-16
申请号：CN201010578779.7
申请日：2010-12-08
Applicant: 北京农业生物技术研究中心
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明涉及转基因植物检测领域，特别涉及一种快速检测转基因玉米的方法，该方法利用环介导等温扩增反应(LAMP)检测转基因玉米中的抗草丁膦Bar基因。本发明不需要特殊仪器（如PCR仪），较实验室常规律方法更快捷，经济。本发明鉴定简便，有极高的特异性，只要用肉眼观察或浊度仪紫外成像系统检测沉淀浊度就能够判断目的片段扩增与否，从而判断出用于检测的样品玉米植株的基因组中是否含有抗草丁膦Bar基因，而不必用凝胶电泳的方法来观察。
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公开(公告)号：CN104374617A
公开(公告)日：2015-02-25
申请号：CN201410553962.X
申请日：2014-10-17
Applicant: 北京农业生物技术研究中心
IPC: G01N1/28
Abstract: 本发明属于流式细胞术检测领域，提供一种适用于菊花的流式细胞术样品的制备方法。该方法包括：裂解步骤：将菊花组织样品进行裂解处理、过滤处理、离心处理，得到待染色的细胞核；染色步骤：对所述待染色的细胞核进行染色处理，得到染色的细胞核。本发明针对菊花流式细胞术分析采用了适当的细胞裂解缓冲液，能够有效地去除菊花完整的细胞核中残留的胞质碎片，保持细胞核在悬浮液中的稳定并阻止凝集；并保护DNA不被降解；并提供适合的环境用来进行专一的核DNA化学染色，有效地降低胞质成分对染色的负面影响；本发明中，样品制备流程的优化有效的减少了上机测试中杂峰的出现，提高了检测结果的精确性、准确性和稳定性。
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公开(公告)号：CN102586318A
公开(公告)日：2012-07-18
申请号：CN201210019426.2
申请日：2012-01-21
Applicant: 北京农业生物技术研究中心
Abstract: 本发明属于植物基因工程领域，特别涉及一种提高玉米籽粒产量的培养方法，该方法是构建植物表达载体将Zmda1-1基因通过花粉管通道法转化玉米基因组中。所述的Zmda1-1基因是玉米基因组中的一个类似于拟南芥植物中的DA1基因中的ZmDA1基因的突变形式。本发明利用Zmda1-1基因潜在的改变植物器官的大小的特性、UBQI启动子驱动Zmda1-1基因的表达，构建植物表达载体将Zmda1-1基因转入玉米基因组中，能够将Zmda1-1基因提高玉米籽粒产量的潜力变为切实可行的成熟方案；该植物表达载体的出发载体是具有生物安全性的PGreen0229质粒载体，对环境友好，避免转基因植物对生态的影响；本发明直接将含有目的DNA的植物表达载体溶液直接转入玉米中，不依赖于玉米的组培再生体系，所以无需昂贵仪器，生产成本低廉。
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公开(公告)号：CN102031273A
公开(公告)日：2011-04-27
申请号：CN201010263566.5
申请日：2010-08-26
Applicant: 北京农业生物技术研究中心
Abstract: 一种提高玉米转基因效率的花粉管通道转化体系及方法，该转化体系中，含有质粒DNA溶液和SilwetL-77；所述的SilwetL-77和所述的质粒DNA溶液的体积比为0.01%～0.05%；该转化方法为选取自交授粉后的玉米的果穗的苞叶和花丝，将所述的转化体系滴在切口凹陷处。本发明在质粒DNA溶液中添加表面活性剂SilwetL-77，改善含质粒DNA溶液的表面活性，有利于DNA溶液在玉米花丝或柱头上的润湿、粘附与渗透，增加玉米花粉管对DNA的吸收率，从而提高外源DNA片段整合到受体玉米基因组中的效率；本发明因为是直接将含有目的DNA的质粒DNA溶液直接转入玉米中，不依赖于玉米的组培再生体系，所以操作简便，无需昂贵仪器，生产成本低廉；本发明不受玉米自交系品种和转化基因种类的限制，适用范围广泛。
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