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公开(公告)号：CN103374545A
公开(公告)日：2013-10-30
申请号：CN201210120875.6
申请日：2012-04-23
Applicant: 中国农业大学 , 北京农业生物技术研究中心
IPC: C12N5/04
Abstract: 本发明公开了一种游离果肉原生质体的方法及其专用试剂盒。本发明提供一种用于果肉原生质体游离的试剂盒，包括酶溶液；所述酶溶液由溶质A和溶剂组成，所溶质A由纤维素酶、离析酶、甘露醇、2-N-吗啡啉乙磺酸、抗坏血酸、CaCl2和BSA组成，所述纤维素酶、所述离析酶R、所述甘露醇、所述2-N-吗啡啉乙磺酸、所述抗坏血酸、所述CaCl2和所述BSA的配比为(0.3-0.7)g∶(0.3-0.7)g∶(200-600)mmol∶10mmol∶5.7mmol∶5mmol∶0.1g。本发明的实验证明，本发明的方法可以游离出数量多、质量较好的原生质体。
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公开(公告)号：CN102839196A
公开(公告)日：2012-12-26
申请号：CN201210366956.4
申请日：2012-09-28
Applicant: 北京农业生物技术研究中心
Abstract: 本发明提供一种含有穿膜肽的提高玉米转基因效率的转化体系及方法；所述的转化体系中，含有外源DNA和穿膜肽；所述的外源DNA和穿膜肽的质量比为1:1-3。该转化方法的步骤为选取自交授粉后的玉米的果穗的苞叶和花丝，将所述的转化体系滴在切口凹陷处。本发明在线性DNA或质粒DNA溶液中添加的穿膜肽，利用穿膜肽的特性将提高外源DNA片段整合到受体玉米基因组中的效率；本发明操作简便，无需昂贵仪器，生产成本低廉。本发明不受玉米基因型（自交系品种）和转化基因种类的限制，所以适用范围广泛；本发明采用线性DNA方法直接将外源基因导入玉米基因组，可去除质粒DNA骨架系列、特别是抗生素基因进入植物基因组，培育的转基因植物更安全，具有更好的应用前景。
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公开(公告)号：CN101985661B
公开(公告)日：2012-12-26
申请号：CN201010578779.7
申请日：2010-12-08
Applicant: 北京农业生物技术研究中心
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明涉及转基因植物检测领域，特别涉及一种快速检测转基因玉米的方法，该方法利用环介导等温扩增反应(LAMP)检测转基因玉米中的抗草丁膦Bar基因。本发明不需要特殊仪器（如PCR仪），较实验室常规律方法更快捷，经济。本发明鉴定简便，有极高的特异性，只要用肉眼观察或浊度仪紫外成像系统检测沉淀浊度就能够判断目的片段扩增与否，从而判断出用于检测的样品玉米植株的基因组中是否含有抗草丁膦Bar基因，而不必用凝胶电泳的方法来观察。
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公开(公告)号：CN103374590B
公开(公告)日：2015-10-28
申请号：CN201210120840.2
申请日：2012-04-23
Applicant: 中国农业大学 , 北京农业生物技术研究中心
IPC: C12N15/82
Abstract: 本发明公开了一种PEG介导的原生质体瞬时转化方法及其专用试剂。本发明提供的专用试剂，由溶质和溶剂组成；所述溶质由甘露醇、Ca(NO3)2和PEG4000组成，所述甘露醇、所述Ca(NO3)2和所述PEG4000的配比为200mmol∶0.125mmol∶0.2g-0.8g。本发明的实验证明，本发明选择了适于原生质体瞬时转化的载体pEZS-NL，改良了苹果果实果肉原生质体瞬时转化体系，大大提高了原生质体瞬时转化的效率，为进一步研究苹果果实发育、成熟过程中的分子机制奠定了良好基础。
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公开(公告)号：CN102417904B
公开(公告)日：2013-04-24
申请号：CN201110359401.2
申请日：2011-11-11
Applicant: 北京农业生物技术研究中心
IPC: C12N15/10 , C12N15/113
Abstract: 本发明涉及植物基因工程领域，特别涉及一种拟南芥根特异性表达基因ARSK1启动子的克隆方法，该方法包括以下步骤：获取拟南芥根特异性基因ARSK1、获取拟南芥根特异性表达基因ARSK1启动子。因为本发明克隆到拟南芥根特异性表达基因ARSK1启动子，该启动子为植物根系特异性表达的启动子，可以驱动相关功能基因的表达，所以该启动子具有特定地改变植物的根部形态、获得相应的抗旱植株潜力：转入该启动子的植株，在同等干旱条件下，存活率比相比对照组的野生型植株高60-70％。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110331167A
公开(公告)日：2019-10-15
申请号：CN201910623296.5
申请日：2019-07-11
Applicant: 北京农业生物技术研究中心
IPC: C12N15/87
Abstract: 本发明公开了一种不依赖于玉米基因型的DNA导入方法，采用带正电荷的磁性纳米颗粒作为基因载体与带负电荷的DNA结合，在磁场作用下，结合了DNA的磁性纳米颗粒通过花粉孔将DNA转运至玉米花粉中，并通过授粉和结实的自然生殖过程，实现目的基因的导入。本发明可实现目的基因在所有玉米中的高效导入和瞬时及稳定表达，突破了当前基于组织培养的主流玉米基因导入方法受限于极少数受体材料、导入效率低、操作繁琐等瓶颈问题。
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公开(公告)号：CN105052723B
公开(公告)日：2017-03-29
申请号：CN201510416431.0
申请日：2015-07-15
Applicant: 北京农业生物技术研究中心
IPC: A01H1/02
Abstract: 本发明属于农作物育种领域，提供一种提高玉米授粉效率的授粉方法。该方法先对玉米雌穗的苞叶进行水平剪，剪去所述苞叶的顶端；再对剪去顶端的苞叶进行斜剪和侧剪，去除花丝周围的苞叶，使花丝露出；再立即将花粉洒于所述花丝的外部。本发明的修剪完成后，露出苞叶的花丝的长度为1-2cm，正好可以达到授粉的标准，然后直接授粉便可；这种方法简单快速，仅需剪5次苞叶，便可让花丝满足授粉的要求，实现了既缩短授粉时间，又提高育种效率的效果。
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公开(公告)号：CN106480072A
公开(公告)日：2017-03-08
申请号：CN201610899248.5
申请日：2016-10-14
Applicant: 北京农业生物技术研究中心
CPC classification number: C12N9/00 , C12N15/8227 , C12N15/8273
Abstract: 本发明为一种iaaM基因表达载体及根系特异表达iaaM基因培育抗旱玉米的方法，所述载体包括启动子EXP18-D和iaaM基因；该方法包括：构建iaaM基因表达载体、酶切反应验证目的基因iaaM、采用PCR从质粒上扩增的方法制备线性DNA、将线性DNA通过花粉管通道法转化入玉米自交系C92的基因组中的步骤；本发明通过根系特异启动子EXP18-D，驱动生长素合成关键酶基因iaaM在玉米根系中特异性表达，促进根系生长发育，提高玉米的抗旱性。
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公开(公告)号：CN103374590A
公开(公告)日：2013-10-30
申请号：CN201210120840.2
申请日：2012-04-23
Applicant: 中国农业大学 , 北京农业生物技术研究中心
IPC: C12N15/82
Abstract: 本发明公开了一种PEG介导的原生质体瞬时转化方法及其专用试剂。本发明提供的专用试剂，由溶质和溶剂组成；所述溶质由甘露醇、Ca(NO3)2和PEG4000组成，所述甘露醇、所述Ca(NO3)2和所述PEG4000的配比为200mmol∶0.125mmol∶0.2g-0.8g。本发明的实验证明，本发明选择了适于原生质体瞬时转化的载体pEZS-NL，改良了苹果果实果肉原生质体瞬时转化体系，大大提高了原生质体瞬时转化的效率，为进一步研究苹果果实发育、成熟过程中的分子机制奠定了良好基础。
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公开(公告)号：CN102586318A
公开(公告)日：2012-07-18
申请号：CN201210019426.2
申请日：2012-01-21
Applicant: 北京农业生物技术研究中心
Abstract: 本发明属于植物基因工程领域，特别涉及一种提高玉米籽粒产量的培养方法，该方法是构建植物表达载体将Zmda1-1基因通过花粉管通道法转化玉米基因组中。所述的Zmda1-1基因是玉米基因组中的一个类似于拟南芥植物中的DA1基因中的ZmDA1基因的突变形式。本发明利用Zmda1-1基因潜在的改变植物器官的大小的特性、UBQI启动子驱动Zmda1-1基因的表达，构建植物表达载体将Zmda1-1基因转入玉米基因组中，能够将Zmda1-1基因提高玉米籽粒产量的潜力变为切实可行的成熟方案；该植物表达载体的出发载体是具有生物安全性的PGreen0229质粒载体，对环境友好，避免转基因植物对生态的影响；本发明直接将含有目的DNA的植物表达载体溶液直接转入玉米中，不依赖于玉米的组培再生体系，所以无需昂贵仪器，生产成本低廉。
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