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公开(公告)号：CN102190734A
公开(公告)日：2011-09-21
申请号：CN201110068829.1
申请日：2011-03-22
Applicant: 兰州大学
Abstract: 本发明公开了一种结核杆菌融合蛋白Mtb8.4-HspX，是序列表中序列2的蛋白质。本发明的有益效果是：发明选用的结核分枝杆菌Mtb8.4是从结核杆菌培养滤液中纯化分离的一种低分子治疗蛋白抗原，具有较强的细胞免疫活性，能诱导CD4+Th1型细胞免疫反应和特异性CTL的产生，分泌高水平的IFN-γ。HspX是一种相对分子质量为16000的热休克蛋白，HspX足结核分枝杆菌在静止生长期或低氧状态下产生的主要蛋白。结核病患者及潜伏期感染者体内存在的针对HspX的特异性体液免疫和细胞免疫应答，均表明HspX是结核分枝杆菌潜伏感染期机体免疫反应的重要靶抗原。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102212138A
公开(公告)日：2011-10-12
申请号：CN201110068845.0
申请日：2011-03-22
Applicant: 兰州大学
Abstract: 本发明公开了一种结核杆菌融合蛋白HspX-Mtb8.4，是序列表中序列2的蛋白质。本发明的有益效果是：发明选用的结核分枝杆菌Mtb8.4是从结核杆菌培养滤液中纯化分离的一种低分子治疗蛋白抗原，具有较强的细胞免疫活性，能诱导CD4+Th1型细胞免疫反应和特异性CTL的产生，分泌高水平的IFN-γ。HspX是一种相对分子质量为16000的热休克蛋白，HspX是结核分枝杆菌在静止生长期或低氧状态下产生的主要蛋白。结核病患者及潜伏期感染者体内存在的针对HspX的特异性体液免疫和细胞免疫应答，均表明HspX是结核分枝杆菌潜伏感染期机体免疫反应的重要靶抗原。
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公开(公告)号：CN112972673B
公开(公告)日：2023-04-11
申请号：CN202110142607.3
申请日：2021-02-02
Applicant: 兰州大学
Abstract: 本发明公开了PLGA‑PEG‑PolyI：C纳米颗粒的制备方法，先用化学合成的方法使PLGA和NH2‑PEG形成PLGA‑PEG共聚物，然后用复乳溶剂挥发法(W/O/W)将本实验构建的两个结核分枝杆菌融合蛋白ESAT6‑Rv2626c和Mtb10.4‑HspX(简称为M4)包裹在纳米颗粒中，进而应用聚多巴胺和PolyI:C进行修饰，形成包裹结核分枝杆菌融合蛋白M4的PLGA‑PEG‑PolyI：C(简称为NP)纳米颗粒结核亚单位疫苗NP/M4。采用本发明所提供的纳米颗粒结核亚单位疫苗免疫小鼠后，NP/M4组在HspX蛋白、Rv2626c蛋白刺激后，脾脏淋巴细胞分泌IFN‑γ和IL‑2的水平明显高于PBS组和BCG组，表明NP/M4组可产生较高水平的IFN‑γ和IL‑2；此外，NP/M4组HpsX和Rv2626c特异性IgG和sIgA抗体水平明显高于PBS、BCG和融合蛋白M4组。PLGA‑PEG‑PolyI：C纳米颗粒可辅助抗原诱导细胞免疫和体液免疫，是结核亚单位疫苗理想的佐剂。
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公开(公告)号：CN112250738B
公开(公告)日：2023-05-12
申请号：CN202010912170.2
申请日：2020-09-02
Applicant: 兰州大学
IPC: C07K14/165 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12R1/19
Abstract: 本发明提供严重急性呼吸综合征冠状病毒2病毒样颗粒的制备方法，包括以下步骤：将pFastBacDual双表达载体改造为三表达载体，将SARS‑CoV‑2的M、S、E基因进行密码子优化，然后将密码子优化的M、S基因依次分别构建至多角体蛋白pPH启动子后，将E基因构建至pP10启动子后，获得表达EMS重组质粒；将EMS重组质粒转化至DH10 BacTM大肠杆菌中，经蓝白筛选挑取白色阳性克隆，提取杆粒转染ExpiSf9TM细胞，胞内共表达E、M、S结构蛋白，自组装形成病毒样颗粒。本发明成功构建了EMS三表达载体，并利用杆状昆虫系统在ExpiSf9TM细胞内成功表达了SARS‑CoV‑2VLPs。
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公开(公告)号：CN112972673A
公开(公告)日：2021-06-18
申请号：CN202110142607.3
申请日：2021-02-02
Applicant: 兰州大学
Abstract: 本发明公开了PLGA‑PEG‑PolyI：C纳米颗粒的制备方法，先用化学合成的方法使PLGA和NH2‑PEG形成PLGA‑PEG共聚物，然后用复乳溶剂挥发法(W/O/W)将本实验构建的两个结核分枝杆菌融合蛋白ESAT6‑Rv2626c和Mtb10.4‑HspX(简称为M4)包裹在纳米颗粒中，进而应用聚多巴胺和PolyI:C进行修饰，形成包裹结核分枝杆菌融合蛋白M4的PLGA‑PEG‑PolyI：C(简称为NP)纳米颗粒结核亚单位疫苗NP/M4。采用本发明所提供的纳米颗粒结核亚单位疫苗免疫小鼠后，NP/M4组在HspX蛋白、Rv2626c蛋白刺激后，脾脏淋巴细胞分泌IFN‑γ和IL‑2的水平明显高于PBS组和BCG组，表明NP/M4组可产生较高水平的IFN‑γ和IL‑2；此外，NP/M4组HpsX和Rv2626c特异性IgG和sIgA抗体水平明显高于PBS、BCG和融合蛋白M4组。PLGA‑PEG‑PolyI：C纳米颗粒可辅助抗原诱导细胞免疫和体液免疫，是结核亚单位疫苗理想的佐剂。
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公开(公告)号：CN112250738A
公开(公告)日：2021-01-22
申请号：CN202010912170.2
申请日：2020-09-02
Applicant: 兰州大学
IPC: C07K14/165 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12R1/19
Abstract: 本发明提供严重急性呼吸综合征冠状病毒2病毒样颗粒的制备方法，包括以下步骤：将pFastBacDual双表达载体改造为三表达载体，将SARS‑CoV‑2的M、S、E基因进行密码子优化，然后将密码子优化的M、S基因依次分别构建至多角体蛋白pPH启动子后，将E基因构建至pP10启动子后，获得表达EMS重组质粒；将EMS重组质粒转化至DH10 BacTM大肠杆菌中，经蓝白筛选挑取白色阳性克隆，提取杆粒转染ExpiSf9TM细胞，胞内共表达E、M、S结构蛋白，自组装形成病毒样颗粒。本发明成功构建了EMS三表达载体，并利用杆状昆虫系统在ExpiSf9TM细胞内成功表达了SARS‑CoV‑2VLPs。
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