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公开(公告)号：CN101580872B
公开(公告)日：2012-02-22
申请号：CN200810233641.6
申请日：2008-11-25
Applicant: 云南农业大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明涉及一种稻瘟病菌侵染后期高度表达的基因及其编码产物的体外功能检测的方法，属于植物保护和生物技术领域。本发明的技术方案是保持目前基因克隆与表达的方法，如引物设计、PCR扩增、real-time PCR、连接、转化、蛋白表达均与常规相同，不同的是该基因为稻瘟病菌侵染水稻后期高度表达的基因，与前人研究的稻瘟病菌基因多为稻瘟病菌侵染早期高度表达的基因有区别，其编码产物是小蛋白，由88个氨基酸组成，相对分子量为8.8kDa，其体外表达产物按照0.5mg/ml～2.5mg/ml的浓度直接接种到致伤的丽江新团黑谷水稻叶片后能引起水稻叶片产生病斑。本发明比传统稻瘟病菌致病性测定方法简便、快速。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101580872A
公开(公告)日：2009-11-18
申请号：CN200810233641.6
申请日：2008-11-25
Applicant: 云南农业大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明涉及一种稻瘟病菌侵染后期高度表达的基因及其编码产物的体外功能检测的方法，属于植物保护和生物技术领域。本发明的技术方案是保持目前基因克隆与表达的方法，如引物设计、PCR扩增、real－time PCR、连接、转化、蛋白表达均与常规相同，不同的是该基因为稻瘟病菌侵染水稻后期高度表达的基因，与前人研究的稻瘟病菌基因多为稻瘟病菌侵染早期高度表达的基因有区别，其编码产物是小蛋白，由88个氨基酸组成，相对分子量为8.8kDa，其体外表达产物按照0.5mg/ml～2.5mg/ml的浓度直接接种到致伤的丽江新团黑谷水稻叶片后能引起水稻叶片产生病斑。本发明比传统稻瘟病菌致病性测定方法简便、快速。
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公开(公告)号：CN101418346A
公开(公告)日：2009-04-29
申请号：CN200810233642.0
申请日：2008-11-25
Applicant: 云南农业大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明涉及一种检测稻瘟病菌致病相关基因在侵染的水稻叶片组织中表达量的方法。本发明提供了一种检测稻瘟病菌侵染水稻后不同时间点致病相关基因表达量的方法，该方法的技术方案是：将稻瘟病菌孢子喷雾接种到水稻叶片上，取样并提取总RNA，应用SYBR Green I嵌合荧光法对稻瘟病菌致病相关基因片段进行实时荧光定量PCR检测，记录待测样品的C(t)值，根据公式计算其致病相关基因片段的表达量。采用本方法可快速准确地检测水稻接种稻瘟病菌早期不同时间段稻瘟病菌致病相关基因的表达量；分析不同致病相关基因在不同水稻品种中的表达量及其在接种后不同时间段的变化情况；分析稻瘟病菌致病相关基因的时空表达模式等。其检测结果准确、重复性好，有助于说明这些基因的功能。
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公开(公告)号：CN101418332A
公开(公告)日：2009-04-29
申请号：CN200810233643.5
申请日：2008-11-25
Applicant: 云南农业大学
IPC: C12Q1/02
Abstract: 本发明提供一种检测稻瘟病菌致病蛋白的方法。水稻感病品种丽江新团黑谷生长至第4片叶完全展开时接种。选择在接种水稻叶片的中部最宽处，用致伤设备形成直径1mm的压伤斑1个，将稻瘟病菌氮饥饿培养后或致病基因重组表达后得到的蛋白在致伤处接种，蛋白的接种浓度为1μg/μl，接种体积为3μl。接种后72小时在水稻叶片上形成的病斑为椭圆形，测量向叶尖和叶基方向延伸的最长值作为病斑的长度值，该值是比较不同蛋白致病力大小的依据。其分类标准为：病斑长度为1.5mm至2mm之间为弱致病性；病斑长度在2.1mm至3mm之间为中等致病性；病斑长度大于3.1mm为强致病性。该方法对于研究稻瘟病菌致病相关基因和蛋白的功能具有重要意义。
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公开(公告)号：CN101418332B
公开(公告)日：2011-04-20
申请号：CN200810233643.5
申请日：2008-11-25
Applicant: 云南农业大学
IPC: C12Q1/02
Abstract: 本发明提供一种检测稻瘟病菌致病蛋白的方法。水稻感病品种丽江新团黑谷生长至第4片叶完全展开时接种。选择在接种水稻叶片的中部最宽处，用致伤设备形成直径1mm的压伤斑1个，将稻瘟病菌氮饥饿培养后或致病基因重组表达后得到的蛋白在致伤处接种，蛋白的接种浓度为1μg/μl，接种体积为3μl。接种后72小时在水稻叶片上形成的病斑为椭圆形，测量向叶尖和叶基方向延伸的最长值作为病斑的长度值，该值是比较不同蛋白致病力大小的依据。其分类标准为：病斑长度为1.5mm至2mm之间为弱致病性；病斑长度在2.1mm至3mm之间为中等致病性；病斑长度大于3.1mm为强致病性。该方法对于研究稻瘟病菌致病相关基因和蛋白的功能具有重要意义。
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公开(公告)号：CN111194807A
公开(公告)日：2020-05-26
申请号：CN202010121187.6
申请日：2020-02-26
Applicant: 云南农业大学
IPC: A23F3/34 , A61K36/78 , A61K9/14 , A61P31/12 , A61P31/04 , A61P31/10 , A61P29/00 , A61P9/00 , A61P39/06 , A61P7/10 , A61P37/04 , A61P11/00 , A61P31/14 , A61P11/04 , A61P15/14 , A61P17/02 , A61P27/02 , A61P13/02 , A61P15/00
Abstract: 八种纯天然中草药速溶粉茶及其制备、使用方法，八种纯天然中草药速溶粉茶成分分别为干燥的蒲公英粉、鱼腥草粉、车前草粉、松针粉、薄荷叶粉、刺五加叶粉、三七叶粉、人参叶粉，按如下四项步骤制备：一是选料，二是烘干，三是粉碎，四是包装。用本方法制成的八种纯天然速溶中草药粉茶，由于干燥温度低，保留了八种中草药原有有益成分活性，由于使用细粉碎技术，有益物质冲泡时溶解充分且迅速。本方法制成的粉茶使用棉过滤袋小包分装外加塑料小糖果袋密封包装，可以防吸潮防变质，使用方便。其作为茶饮用，富含维生素等多种营养成分及药用活性成分，具有抗病毒、抗菌消炎、防治心脑血管疾病、抗衰老、增强机体免疫力等健康保健功能。
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