公开(公告)号：CN110305835A

公开(公告)日：2019-10-08

申请号：CN201910558698.1

申请日：2019-06-26

Applicant: 中山大学附属第一医院

Inventor： 王长希 ,  刘龙山 ,  李希芮 ,  韦勇成 ,  苏晓均

IPC: C12N5/071 ,  C12N15/10 ,  C12Q1/6869

Abstract: 本发明涉及肾移植供体特异性尿源细胞及其DNA的制备方法以及其在肾移植供体基因组学背景分析中的应用。本发明尿源细胞的制备方法包括以下步骤：(1)取肾移植受体的中段尿，离心，弃上清；(2)向离心所得下层沉淀中加入含有青链霉素混合液或原代细胞抗生素的磷酸盐缓冲液进行重悬，然后再次离心，弃上清；(3)向离心所得下层沉淀中加入尿源细胞培养基，重悬，得到细胞悬液；(4)将所得细胞悬液接种于培养容器中，进行细胞体外扩增，得到肾移植供体特异性尿源细胞。本发明基于肾移植术后受体尿液获取的供体特异性尿源细胞，获得供体DNA，进行供体基因组学背景分析，其安全无创、成本低廉且分离效率高，易于获得足够数量的DNA。

公开(公告)号：CN117017979A

公开(公告)日：2023-11-10

申请号：CN202311027869.0

申请日：2023-08-15

Applicant: 中山大学附属第一医院

Inventor： 刘龙山 ,  韦勇成 ,  王长希 ,  李希芮 ,  叶倩雨

IPC: A61K31/40 ,  A61P37/06

Abstract: 本发明公开了富马酸氯马斯汀在制备治疗器官移植免疫排斥的药物中的新应用。本发明研究显示，富马酸氯马斯汀能够明显降低心脏移植免疫排斥反应的发生，具体表现为显著延长小鼠心脏移植物存活时间，显著减轻小鼠急性排斥反应移植物病变程度，抑制小鼠T细胞同种异体免疫反应，降低心脏移植物的排斥损伤程度及免疫浸润程度，抑制小鼠T细胞增殖，降低小鼠脾脏及引流淋巴结Th1细胞亚群比例，降低受体小鼠脾脏及引流淋巴结IFN‑γ和T‑bet基因表达水平和体内促炎IFN‑γ、TNF‑α和IL‑5细胞因子水平等，表明富马酸氯马斯汀可作为一种新型的免疫抑制剂用于治疗心脏等器官移植免疫排斥，尤其是心脏等器官移植术后急性排斥反应。

公开(公告)号：CN110051694B

公开(公告)日：2023-12-01

申请号：CN201910321475.3

申请日：2019-04-22

Applicant: 中山大学附属第一医院

Inventor： 王长希 ,  刘龙山 ,  李希芮 ,  毕梓荣 ,  韦勇成

IPC: A61K35/28 ,  A61P37/06 ,  C12N5/0775

Abstract: 本发明涉及一种尿源干细胞制剂及其制备方法，以及该制剂在制备抗器官移植后免疫排斥反应药物的应用。本发明选取健康志愿者清洁中段尿；使用培养基进行分离培养及体外扩增，检测其体外增殖能力；利用流式细胞术检测表面分子标志的表达水平，免疫印迹法检测肾脏相关蛋白的表达水平。取处于对数生长期的经过鉴定符合要求的且汇合度达到80％的第三‑六代尿源干细胞；经进一步消化离心及生理盐水重悬，制成尿源干细胞制剂。本发明具有来源广泛，获取成本低且分离效率高的优点。本发明可显著延长肾移植后大鼠生存期，降低尿素氮及肌酐水平，减少T细胞在肾组织的浸润；同时，可明显延长小鼠心脏移植中移植物搏动时间。

公开(公告)号：CN110051694A

公开(公告)日：2019-07-26

申请号：CN201910321475.3

申请日：2019-04-22

Applicant: 中山大学附属第一医院

Inventor： 王长希 ,  刘龙山 ,  李希芮 ,  毕梓荣 ,  韦勇成

IPC: A61K35/28 ,  A61P37/06 ,  C12N5/0775

Abstract: 本发明涉及一种尿源干细胞制剂及其制备方法，以及该制剂在制备抗器官移植后免疫排斥反应药物的应用。本发明选取健康志愿者清洁中段尿；使用培养基进行分离培养及体外扩增，检测其体外增殖能力；利用流式细胞术检测表面分子标志的表达水平，免疫印迹法检测肾脏相关蛋白的表达水平。取处于对数生长期的经过鉴定符合要求的且汇合度达到80％的第三-六代尿源干细胞；经进一步消化离心及生理盐水重悬，制成尿源干细胞制剂。本发明具有来源广泛，获取成本低且分离效率高的优点。本发明可显著延长肾移植后大鼠生存期，降低尿素氮及肌酐水平，减少T细胞在肾组织的浸润；同时，可明显延长小鼠心脏移植中移植物搏动时间。