公开(公告)号：CN111979174A

公开(公告)日：2020-11-24

申请号：CN202010872471.7

申请日：2020-08-26

Applicant: 中国计量大学

Inventor： 鲍亮 ,  罗媛媛 ,  邢月婷 ,  张世雄 ,  管峰 ,  王为民

IPC: C12N5/07 ,  C07K14/815

Abstract: 本发明公开一种分离日本医蛭唾液腺细胞的方法，涉及细胞分离技术领域，包括以下步骤：S1：将提取的唾液腺组织置于预冷的缓冲液中；S2：使用缓冲液，洗去唾液腺组织血污；S3：将S2处理后的唾液腺组织转移至培养皿中；S4：加入消毒液进行消毒；S5：使用缓冲液再次进行清洗，洗去残余消毒液；S6：将S5处理后的唾液腺组织转移至离心管中，加入适量酶溶液，进行水浴酶解；S7：取经S6处理后的上清液，同时加入培养液；S8：将S7处理后的唾液腺组织进行离心处理，弃上清液，加入适量培养液重悬后，接种至培养板。本发明提供一种分离日本医蛭唾液腺细胞的方法，进一步培养唾液腺细胞，提取水蛭素等活性物质，并且可用于唾液腺细胞分泌机制的研究。

公开(公告)号：CN114657120A

公开(公告)日：2022-06-24

申请号：CN202210415819.9

申请日：2022-04-20

Applicant: 中国计量大学

Inventor： 瞿如钰 ,  罗媛媛 ,  鲍亮 ,  管峰 ,  王为民

IPC: C12N5/071 ,  C07K14/815 ,  C07K1/14

Abstract: 本发明公开了一种酶解获取日本医蛭唾液腺干细胞团的方法及应用，涉及细胞分离技术领域，其技术方案要点是：通过对日本医蛭唾液腺组织块进行多次酶解，最终得到具有分裂分化为新的唾液腺细胞能力的干细胞团，实现日本医蛭唾液腺细胞在体外长期培养，比直接分离得到日本医蛭唾液腺细胞进行原代培养进行传代的效率更高，通过分离唾液腺细胞代谢产物的方式提取天然水蛭素，相比于通过基因工程手段得到的重组水蛭素，该方法得到的水蛭素活性更高、效率更高。

公开(公告)号：CN107129962B

公开(公告)日：2019-03-05

申请号：CN201710354224.6

申请日：2017-05-18

Applicant: 中国计量大学

Inventor： 邢月婷 ,  罗媛媛 ,  管峰 ,  王为民

IPC: C12N5/07 ,  A01K67/033

Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，公开了一种日本医蛭唾液腺细胞的原代培养方法，将剪碎后的组织块接种于25cm2的细胞封闭培养瓶中，加入5mL SFX‑INSCET昆虫细胞培养液，置于生化培养箱中29℃静止培养。本发明将大大提高天然水蛭素的产量；极少量的野生日本医蛭唾液腺细胞进行体外细胞培养后就能得到大量的唾液腺细胞，分离提取出大量天然水蛭素，有利于野生日本医蛭种群的保护，达到既深度开发利用又大力保护动物种质资源的目标。本发明快速、有效、重复性强，是对蛭类细胞培养的完善，为蛭类细胞原代培养的研究提供可靠的试验数据与基础。

公开(公告)号：CN107129962A

公开(公告)日：2017-09-05

申请号：CN201710354224.6

申请日：2017-05-18

Applicant: 中国计量大学

Inventor： 邢月婷 ,  罗媛媛 ,  管峰 ,  王为民

IPC: C12N5/07 ,  A01K67/033

CPC classification number: C12N5/0601 ,  A01K67/033

Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，公开了一种日本医蛭唾液腺细胞的原代培养方法，将剪碎后的组织块接种于25cm2的细胞封闭培养瓶中，加入5mL SFX‑INSCET昆虫细胞培养液，置于生化培养箱中29℃静止培养。本发明将大大提高天然水蛭素的产量；极少量的野生日本医蛭唾液腺细胞进行体外细胞培养后就能得到大量的唾液腺细胞，分离提取出大量天然水蛭素，有利于野生日本医蛭种群的保护，达到既深度开发利用又大力保护动物种质资源的目标。本发明快速、有效、重复性强，是对蛭类细胞培养的完善，为蛭类细胞原代培养的研究提供可靠的试验数据与基础。