公开(公告)号：CN107586817A

公开(公告)日：2018-01-16

申请号：CN201610537881.X

申请日：2016-07-08

Applicant: 中国科学院过程工程研究所

Inventor： 王玉霞 ,  马光辉 ,  赖恩平 ,  周炜清 ,  韦祎

IPC: C12P21/06 ,  C12N11/08

Abstract: 本发明涉及一种基于固定化酶的蛋白质酶解方法，其是以温敏性微球为固定化酶载体，通过温度调节温敏固定化酶微球的亲疏水性质，进而控制蛋白质酶解过程，即在酶解温度高于温敏固定化酶微球的临界相转变温度时，微球呈疏水性，能够富集待测蛋白质样品的同时对其进行酶解，在酶解温度低于温敏固定化酶微球的临界相转变温度时，停止酶解并释放肽段，从而提高酶解效率和样品肽段的检出率。本发明所提供的蛋白质酶解方法具有步骤简单、操作方便等特点，有助于蛋白质组学等相关领域的研究。

公开(公告)号：CN107586816A

公开(公告)日：2018-01-16

申请号：CN201610537865.0

申请日：2016-07-08

Applicant: 中国科学院过程工程研究所

Inventor： 王玉霞 ,  马光辉 ,  赖恩平 ,  周炜清 ,  韦祎

IPC: C12P21/06 ,  C12N11/08

Abstract: 本发明涉及一种红外线-固定化酶协同酶解蛋白质的方法，其是将红外线技术与温敏固定化酶相结合对蛋白质进行协同酶解处理，且在酶解过程中不需要任何外源加热和降温设备。本发明步骤简单、操作方便，利用红外线对反应体系进行升温并促进蛋白酶切位点的暴露，可有效增加酶切位点与酶的作用频率，从而显著提高酶解效率；同时，在体系升温过程中，温敏固定化酶微球吸收体系热量并发生相转变，表现出疏水性质。疏水的微球能有效保持酶活性，并通过疏水相互作用富集待测蛋白质样品，增加酶与蛋白质的接触几率。这种红外线与固定化酶协同酶解作用，可以更好地实现蛋白质的高效酶解，有助于批量蛋白质的高通量酶解和鉴定。