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公开(公告)号:CN107586766B
公开(公告)日:2020-05-26
申请号:CN201711013149.3
申请日:2017-10-26
Applicant: 中国科学院过程工程研究所
Abstract: 本发明公开了一种解淀粉芽孢杆菌壳聚糖酶及其制备方法和应用。本发明根据毕赤酵母密码子偏爱性,利用全基因合成方法获得了解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)中的壳聚糖酶编码基因序列,优化后的核酸序列如SEQ ID NO.2所示。进一步利用毕赤酵母表达系统对该所述优化的壳聚糖酶编码基因进行高效分泌表达,获得解淀粉芽孢杆菌壳聚糖酶,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明获得的壳聚糖酶对壳聚糖底物有较高的水解活性,摇瓶发酵产生的粗酶液即具有1mL(蛋白质含量约0.23mg)降解5g壳聚糖的水解能力,而降解相同量的壳聚糖约需要α‑淀粉酶150mg,理论上效率提高600倍以上;具有良好的工业应用前景。
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公开(公告)号:CN111154788B
公开(公告)日:2022-03-08
申请号:CN202010111392.4
申请日:2020-02-24
Applicant: 中国科学院过程工程研究所
Abstract: 本发明提供了一种海洋雪白链霉菌(Streptomyces niveus)壳聚糖酶基因及其应用。本发明根据大肠杆菌密码子的偏好性,对海洋雪白链霉菌(Streptomyces niveus)的壳聚糖酶编码基因(GenBank accession number:AQU65829.1)进行了优化,优化后的核酸序列与原始核酸序列的同源性为73.39%,该壳聚糖酶SnCSN在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达,获得的壳聚糖酶SnCSN能高效降解壳聚糖,获得壳二糖为主要产物的壳寡糖;并且对不同脱乙酰度的壳聚糖底物有较高的水解活性,获得不同脱乙酰度的复杂壳寡糖。本发明提供的壳聚糖酶可用于壳寡糖及几丁寡糖等的规模制备,具有良好的工业应用前景。
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公开(公告)号:CN107586769B
公开(公告)日:2020-05-26
申请号:CN201711018461.1
申请日:2017-10-26
Applicant: 中国科学院过程工程研究所
Abstract: 本发明公开了一种热紫链霉菌几丁质酶(GH18家族)及其制备方法和应用。本发明根据毕赤酵母密码子偏爱性,利用全基因合成方法获得了热紫链霉菌(Streptomyces thermoviolaceus)中的几丁质酶编码基因序列,优化后的核酸序列如SEQ ID NO.2所示。进一步利用毕赤酵母表达系统对该所述优化的几丁质酶编码基因进行高效分泌表达,获得热紫链霉菌几丁质酶(GH18家族),其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明获得的热紫链霉菌几丁质酶(GH18家族)对低脱乙酰度的壳聚糖底物有较高的水解活性,摇瓶发酵产生的粗酶液即具有1mL(蛋白质含量约0.20mg)降解0.5g壳聚糖的水解能力,而降解相同量的壳聚糖约需要商品纤维素酶100mg,理论上效率提高约500倍;具有良好的工业应用前景。
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公开(公告)号:CN111154788A
公开(公告)日:2020-05-15
申请号:CN202010111392.4
申请日:2020-02-24
Applicant: 中国科学院过程工程研究所
Abstract: 本发明提供了一种海洋雪白链霉菌(Streptomyces niveus)壳聚糖酶基因及其应用。本发明根据大肠杆菌密码子的偏好性,对海洋雪白链霉菌(Streptomyces niveus)的壳聚糖酶编码基因(GenBank accession number:AQU65829.1)进行了优化,优化后的核酸序列与原始核酸序列的同源性为73.39%,该壳聚糖酶SnCSN在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达,获得的壳聚糖酶SnCSN能高效降解壳聚糖,获得壳二糖为主要产物的壳寡糖;并且对不同脱乙酰度的壳聚糖底物有较高的水解活性,获得不同脱乙酰度的复杂壳寡糖。本发明提供的壳聚糖酶可用于壳寡糖及几丁寡糖等的规模制备,具有良好的工业应用前景。
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公开(公告)号:CN108531470B
公开(公告)日:2020-04-14
申请号:CN201810219712.0
申请日:2018-03-16
Applicant: 中国科学院过程工程研究所
Abstract: 本发明涉及基因工程领域,主要涉及一种硫酸岩藻多糖裂解酶TFLFM及其制备方法和应用。本发明通过截短硫酸岩藻多糖裂解酶的氨基酸序列使其高效表达。本发明所用菌株为大肠杆菌BL21(DE3),导入编码截短硫酸岩藻多糖裂解酶的基因,从而得到能够高效表达硫酸岩藻多糖裂解酶的重组大肠杆菌,并通过体外实验证实了酶活。
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公开(公告)号:CN108504666A
公开(公告)日:2018-09-07
申请号:CN201810213915.9
申请日:2018-03-15
Applicant: 中国科学院过程工程研究所
CPC classification number: C12N9/2437 , C12Y302/01004
Abstract: 本发明涉及一种编码能够水解浒苔多糖的纤维素酶pJL15的核苷酸序列及其应用,所述核苷酸序列为SEQ ID NO.1,通过对编码纤维素酶的基因(GQ397861)进行密码子优化,优化后共有1290bp个碱基,载入克隆载体为pET28a中,其编码的蛋白含有429个氨基酸,氨基酸序列为SEQ ID NO.2,预测蛋白分子量为47.8kDa。使优化的纤维素酶的基因可以在大肠杆菌BL21中表达,获得了一种能够高效的水解浒苔多糖的糖苷水解酶,为浒苔多糖水解提供了一种生物降解酶。
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公开(公告)号:CN118995863A
公开(公告)日:2024-11-22
申请号:CN202410123203.3
申请日:2024-01-29
Applicant: 中国科学院过程工程研究所
Abstract: 本发明公开了一种以甲壳纲动物的壳体为原料进行物质提取的方法,所述方法包括步骤:S1.利用酸液处理壳体得到处理液,所述酸液具有数值≤3的pH值;S2.利用碱调节所述处理液,得到提取物,所述提取物包括蛋白质;S3.利用胰蛋白酶对所得提取物进行酶解、干燥得到酶解产物,所述酶解产物包括多肽。本发明提供的提取方法可以实现诸如甲壳纲动物壳体中蛋白质的利用,避免了资源的浪费。
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公开(公告)号:CN114807190B
公开(公告)日:2024-06-04
申请号:CN202110110583.3
申请日:2021-01-27
Applicant: 中国科学院过程工程研究所
Abstract: 本发明提供了一种南极地衣链霉菌壳聚糖酶基因及其应用。本发明根据大肠杆菌密码子的偏好性,对链霉菌的壳聚糖酶编码基因进行了优化,优化后的核酸序列与原始核酸序列的同源性为73.39%,该壳聚糖酶SPAMC‑CSN在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达,获得的壳聚糖酶SPAMC‑CSN能高效降解壳聚糖,获得聚合度为2‑4的壳寡糖,其中壳三糖为主要降解产物;并且对不同脱乙酰度的壳聚糖底物有较高的水解活性,获得不同脱乙酰度的复杂壳寡糖。本发明提供的壳聚糖酶可用于壳寡糖及几丁寡糖等的规模制备,具有良好的工业应用前景。
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公开(公告)号:CN107603966B
公开(公告)日:2020-02-28
申请号:CN201711012737.5
申请日:2017-10-26
Applicant: 中国科学院过程工程研究所
Abstract: 本发明公开了一种热紫链霉菌几丁质酶(GH19家族)及其制备方法和应用。本发明根据毕赤酵母密码子偏爱性,利用全基因合成方法获得了热紫链霉菌(Streptomyces thermoviolaceus)中的几丁质酶编码基因序列,优化后的核酸序列如SEQ ID NO.2所示。进一步利用毕赤酵母表达系统对该所述优化的几丁质酶编码基因进行高效分泌表达,获得热紫链霉菌几丁质酶(GH19家族),其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明获得的热紫链霉菌几丁质酶(GH19家族)对低脱乙酰度的壳聚糖底物有较高的水解活性,摇瓶发酵产生的粗酶液即具有1mL(蛋白质含量约0.30mg)降解0.5g壳聚糖的水解能力,而降解相同量的壳聚糖约需要商品纤维素酶100mg,理论上效率提高300倍以上;具有良好的工业应用前景。
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公开(公告)号:CN109022403A
公开(公告)日:2018-12-18
申请号:CN201810757956.4
申请日:2018-07-11
Applicant: 中国科学院过程工程研究所
CPC classification number: C12N9/80 , C12N15/815 , C12P19/26 , C12Y305/01041
Abstract: 本发明公开了一种构巢曲霉几丁质脱乙酰酶及其制备方法和应用。本发明根据毕赤酵母密码子偏爱性,利用全基因合成方法获得了构巢曲霉(Aspergillus nidulans)中的几丁质脱乙酰酶编码基因序列,优化后的核酸序列如SEQ ID NO.2所示。进一步利用毕赤酵母表达系统对该所述优化的几丁质脱乙酰酶编码基因进行分泌表达,获得构巢曲霉几丁质脱乙酰酶,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明获得的构巢曲霉几丁质脱乙酰酶可对壳聚糖及壳寡糖中的乙酰基进行脱除,从而获得特定结构的壳聚糖或壳寡糖。这些经调控后的壳聚糖或壳寡糖与调控前相比,可具有新的或更高的生物活性。因此,该酶及其脱乙酰产物均具有良好的工业应用前景。
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