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公开(公告)号:CN110095519B
公开(公告)日:2021-11-16
申请号:CN201910357225.5
申请日:2019-04-29
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
IPC: G01N27/327 , C12Q1/32 , C12Q1/28 , C12Q1/26
Abstract: 本发明属于生物检测技术领域,具体涉及一种银纳米簇基复合材料的制备方法以及基于该复合材料的核酸检测方法。本发明提供的银纳米簇基复合材料的制备方法,通过与土伦试剂反应,最终形成低聚团簇和银纳米粒子胶体,有效解决银纳米簇易聚集的问题。本发明提供的核酸检测方法,基于CHA反应,一个靶序列促进多组发夹结构H2链与发夹结构H1链结合,每个发夹结构H2链预先由一个标签1标定,形成H1‑H2功能化的磁珠后,再结合标签2功能化的酶分子,通过酶分子催化底物生成过氧化氢以催化银纳米簇基复合材料反应即可判定靶序列的含量,提高了核酸检测的灵敏度。
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公开(公告)号:CN117802206A
公开(公告)日:2024-04-02
申请号:CN202211211287.3
申请日:2022-09-30
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
IPC: C12Q1/6818 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及一种核酸检测试剂盒,属于分子生物学技术领域。本发明提供了一种基于CRISPR/Cas13a、HCR和FRET的核酸检测试剂盒,包括Cas13a蛋白、crRNA、插入或连接有核糖核苷酸序列的茎环DNA引物H0、带有供体标记的核酸发夹探针HP1和带有受体标记的核酸发夹探针HP2。使用所述核酸检测试剂盒对待测样本中的靶标核酸进行定量检测能够依靠CRISPR/Cas13a在短时间内高效识别靶标核酸,并且,能够依靠CRISPR/Cas13a和杂交链式反应进行双重信号放大,具有特异性高、灵敏度高、实时、步骤简单且低成本的优势。
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公开(公告)号:CN116515957A
公开(公告)日:2023-08-01
申请号:CN202210069206.4
申请日:2022-01-21
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
IPC: C12Q1/6816
Abstract: 本发明公开了一种基于基因编辑和流式分析技术的核酸检测试剂,其包括CRISPR‑Cas蛋白、crRNA、引发剂、磁珠和探针发夹核酸。采用该试剂进行核酸检测的方法为:先将待检测样品、CRISPR‑Cas12a蛋白、crRNA、引发剂混合,孵育;再加入磁珠反应,反应后分离取出磁珠,洗涤后再与修饰有标记物的发夹核酸混合,孵育;最后将反应后的磁珠分离取出,洗涤后通过流式细胞术检测荧光强度,再计算出待检测样品中的待检测的核酸靶标的浓度。本发明还构建了基于该试剂的快速检测DNA的方法,可在短时间内高效识别靶标,具有高特异性、高灵敏度等优点,检测限低至2pM,有望成为生物医学研究和临床诊断的有力检测手段。
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公开(公告)号:CN116497090A
公开(公告)日:2023-07-28
申请号:CN202310330621.5
申请日:2023-03-30
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
IPC: C12Q1/6818
Abstract: 本发明涉及一种核酸检测试剂盒及其应用,属于分子生物学技术领域。本发明提供了一种基于CRISPR/Cas12a、HCR和FRET的核酸检测试剂盒,包括修饰有供体荧光标记的核酸发夹探针A、修饰有受体荧光标记的核酸发夹探针B、引发链、Cas12a蛋白和crRNA,其中,核酸发夹探针A和核酸发夹探针B能够在引发链的作用下发生杂交链式反应形成双链,核酸发夹探针A和核酸发夹探针B形成双链后,供体荧光标记和受体荧光标记之间能够发生荧光共振能量转移,同时,两者之间的距离为0~16个碱基,引发链能够在Cas12a蛋白的反式切割活性下发生裂解,Cas12a蛋白能够和crRNA结合形成靶向靶标核酸的二元复合物。
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公开(公告)号:CN113969308A
公开(公告)日:2022-01-25
申请号:CN202111265031.6
申请日:2021-10-28
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
IPC: C12Q1/6816
Abstract: 本发明公开了一种基于基因编辑和流式分析技术的核酸检测方法,该方法为:先将待检测样品、CRISPR‑Cas12a蛋白、crRNA、引发剂混合,孵育;再加入磁珠反应,反应后分离取出磁珠,洗涤后再与修饰有标记物的发夹核酸混合,孵育;最后将反应后的磁珠分离取出,洗涤后通过流式细胞术检测荧光强度,再计算出待检测样品中的待检测的核酸靶标的浓度。本发明结合CRISPR‑Cas12a、杂交链式反应(HCR)和流式细胞术构建了一种快速检测DNA的方法,可在短时间内高效识别靶标,具有高特异性、高灵敏度等优点,检测限低至2pM,有望成为生物医学研究和临床诊断的有力检测手段。
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公开(公告)号:CN110095519A
公开(公告)日:2019-08-06
申请号:CN201910357225.5
申请日:2019-04-29
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
IPC: G01N27/327 , C12Q1/32 , C12Q1/28 , C12Q1/26
Abstract: 本发明属于生物检测技术领域,具体涉及一种银纳米簇基复合材料的制备方法以及基于该复合材料的核酸检测方法。本发明提供的银纳米簇基复合材料的制备方法,通过与土伦试剂反应,最终形成低聚团簇和银纳米粒子胶体,有效解决银纳米簇易聚集的问题。本发明提供的核酸检测方法,基于CHA反应,一个靶序列促进多组发夹结构H2链与发夹结构H1链结合,每个发夹结构H2链预先由一个标签1标定,形成H1-H2功能化的磁珠后,再结合标签2功能化的酶分子,通过酶分子催化底物生成过氧化氢以催化银纳米簇基复合材料反应即可判定靶序列的含量,提高了核酸检测的灵敏度。
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