工程化的Cas12i核酸酶及其效应蛋白以及用途

    公开(公告)号:CN113151215B

    公开(公告)日:2022-11-18

    申请号:CN202110581290.3

    申请日:2021-05-27

    Abstract: 本申请提供了一种工程化的Cas12i核酸酶;其包含一种、两种、三种或四种以下基于参比Cas12i核酸酶的突变:(1)将参比Cas12i核酸酶中与PAM相互作用的一个或多个氨基酸替换为带正电的氨基酸;和/或(2)将参比Cas12i核酸酶中参与打开DNA双链的一个或多个氨基酸替换为带芳香环的氨基酸;和/或(3)将参比Cas12i核酸酶中位于RuvC结构域并与单链DNA底物相互作用的一个或多个氨基酸替换为带正电的氨基酸;和/或(4)将参比Cas12i核酸酶中与DNA‑RNA双螺旋相互作用的一个或多个氨基酸替换为带正电的氨基酸;尤其所述参比Cas12i核酸酶为天然Cas12i核酸酶,例如天然Cas12i2核酸酶,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所定义。

    一种细胞诱导的方法
    10.
    发明公开

    公开(公告)号:CN113881624A

    公开(公告)日:2022-01-04

    申请号:CN202111052331.6

    申请日:2019-01-29

    Abstract: 一种细胞诱导的方法,具体来说涉及:诱导成纤维细胞转分化为脂肪细胞的方法,包括以下步骤:将成纤维细胞培养在培养基中,在培养基中加入Myosin抑制剂和BMP4,继续培养,直至得到脂肪细胞。还涉及一种诱导成纤维细胞转化为永生化细胞的方法及其应用。所述方法包括以下步骤:将成纤维细胞培养在培养基中,在培养基中加入Myosin抑制剂,继续培养,直至得到永生化细胞。还涉及一种诱导肝细胞体外扩增的方法。还涉及Myosin抑制剂尤其是(‑)‑Blebbistatin或(S)‑(‑)‑Blebbistatin O‑Benzoate和通过所述方法获得的肝细胞在诱导肝细胞体外扩增、构建生物人工肝和构建肝脏疾病模型中的应用。

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