来自纳米抗体可靶向CD163受体的短肽的制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN116874600B

    公开(公告)日:2024-07-05

    申请号:CN202310856530.5

    申请日:2023-07-13

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明涉及分子生物学及生物医学技术领域,旨在提供一种来自纳米抗体可靶向CD163受体的短肽的制备方法及其应用。所述短肽是以截取自纳米抗体的CDR3肽段作为靶向肽,经与人工合成的纳米颗粒mi3的N端连接而获得,CDR3肽段能够多拷贝地展示在mi3的表面;所述短肽包括如SEQ ID NO.14~18中任意一项所示的氨基酸序列,对应地编码所述氨基酸序列的核苷酸序列分别依次如SEQ ID NO.8~12所示。本发明提出从纳米抗体中获取能够靶向CD163受体的短肽的开发策略,该靶向肽能够实现与CD163受体进行特异性的结合、促进一些分子进入细胞,如纳米颗粒mi3和PCV2Cap、并具备抗病毒和抗炎症的功效;为针对CD163受体的靶向肽的开发提供了新的视角,也为同类靶向肽的开发提供了一个新的平台。

    用于鉴别猪瘟病毒2型感染的单克隆抗体制备方法及应用

    公开(公告)号:CN116554282A

    公开(公告)日:2023-08-08

    申请号:CN202310408644.3

    申请日:2023-04-17

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明涉及检测病毒的抗体制备技术,旨在提供一种用于鉴别猪瘟病毒2型感染的单克隆抗体制备方法及应用。本发明提供了组杆状病毒表达的CSFV 2型E2蛋白,该蛋白的编码区cDNA序列如SEQ ID NO.5所示。将前述CSFV 2型E2蛋白经纯化处理后,施用于经CSFV 2型毒株HZ08全病毒免疫后的小鼠以实现混合免疫;利用小鼠骨髓瘤细胞SP2/0和混合免疫后小鼠的脾脏细胞,制备杂交瘤细胞株;经过筛选和亚克隆,获得能稳定分泌特异性抗体的单克隆细胞株;对所获单克隆抗体进行亚型测定、IFA鉴定、免疫印迹鉴定和表位鉴定,筛选出能够阻断ELISA体系的单克隆抗体。本发明制得的单克隆抗体能够用于区分CSFV流行株和疫苗株,或区分接种疫苗的动物和自然感染的动物。

    来自纳米抗体可靶向CD163受体的短肽的制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN116874600A

    公开(公告)日:2023-10-13

    申请号:CN202310856530.5

    申请日:2023-07-13

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明涉及分子生物学及生物医学技术领域,旨在提供一种来自纳米抗体可靶向CD163受体的短肽的制备方法及其应用。所述短肽是以截取自纳米抗体的CDR3肽段作为靶向肽,经与人工合成的纳米颗粒mi3的N端连接而获得,CDR3肽段能够多拷贝地展示在mi3的表面;所述短肽包括如SEQ ID NO.14~18中任意一项所示的氨基酸序列,对应地编码所述氨基酸序列的核苷酸序列分别依次如SEQ ID NO.8~12所示。本发明提出从纳米抗体中获取能够靶向CD163受体的短肽的开发策略,该靶向肽能够实现与CD163受体进行特异性的结合、促进一些分子进入细胞,如纳米颗粒mi3和PCV2Cap、并具备抗病毒和抗炎症的功效;为针对CD163受体的靶向肽的开发提供了新的视角,也为同类靶向肽的开发提供了一个新的平台。

    促进猪病毒复制的MALT1稳转细胞系及其构建方法

    公开(公告)号:CN116804211A

    公开(公告)日:2023-09-26

    申请号:CN202310514087.3

    申请日:2023-05-09

    Applicant: 浙江大学

    Inventor: 何放 郑素雅 顾晗

    Abstract: 本发明属于分子生物学及兽用疫苗技术领域,本发明涉及一种利用慢病毒技术在Marc‑145和Vero细胞中过表达先天免疫蛋白MALT1的方法:通过嘌呤霉素不断加压筛选并扩大培养获得高表达的单克隆细胞系,对筛选的高表达细胞系进行稳定性评估,通过使用PRRSV,PEDV疫苗毒株感染该稳转细胞,进行荧光定量,间接免疫荧光等技术评价稳转细胞系对于病毒复制的促进效果。通过本发明方法,可以将PRRSV,PEDV在细胞中的培养滴度提高约10倍,降低临床生产成本。

    一种猪瘟病毒自组装蛋白纳米颗粒、制备方法及应用

    公开(公告)号:CN113354740B

    公开(公告)日:2022-06-07

    申请号:CN202110197932.X

    申请日:2021-02-22

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明涉及生物医学技术领域,旨在提供一种猪瘟病毒自组装蛋白纳米颗粒、制备方法及应用。是将目的抗原SP‑E2和自组装分子的基因通过杆状病毒表达系统融合表达,形成SP‑E2‑mi3融合蛋白;然后进一步通过纳米组装,形成自组装蛋白纳米颗粒;所述目的抗原SP‑E2和自组装分子的基因的编码序列如SEQ ID NO.1所示。本发明通过自组装分子基因融合CSFV E2,通过杆状病毒表达系统表达和纯化得到的融合蛋白,在体外可组装成SP‑E2‑mi3纳米颗粒。本发明用于疫苗制备时,较常规的亚单位疫苗免疫原性强,可通过鉴别诊断能够区分感染及免疫动物,能够从根本上净化猪瘟病毒。

    一种猪瘟病毒自组装蛋白纳米颗粒、制备方法及应用

    公开(公告)号:CN113354740A

    公开(公告)日:2021-09-07

    申请号:CN202110197932.X

    申请日:2021-02-22

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明涉及生物医学技术领域,旨在提供一种猪瘟病毒自组装蛋白纳米颗粒、制备方法及应用。是将目的抗原SP‑E2和自组装分子的基因通过杆状病毒表达系统融合表达,形成SP‑E2‑mi3融合蛋白;然后进一步通过纳米组装,形成自组装蛋白纳米颗粒;所述目的抗原SP‑E2和自组装分子的基因的编码序列如SEQ ID NO.1所示。本发明通过自组装分子基因融合CSFV E2,通过杆状病毒表达系统表达和纯化得到的融合蛋白,在体外可组装成SP‑E2‑mi3纳米颗粒。本发明用于疫苗制备时,较常规的亚单位疫苗免疫原性强,可通过鉴别诊断能够区分感染及免疫动物,能够从根本上净化猪瘟病毒。

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