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公开(公告)号:CN117473603A
公开(公告)日:2024-01-30
申请号:CN202311379688.4
申请日:2023-10-24
Applicant: 中国电建集团华东勘测设计研究院有限公司 , 浙江大学
IPC: G06F30/13 , G06F30/23 , G06F119/14
Abstract: 本发明公开一种大直径盾构隧道开口扩挖管片受力特性仿真模拟方法,本发明提供的大直径盾构隧道开口扩挖管片受力特性仿真模拟方法,通过ABAQUS建模,基于荷载‑结构模式的实体离散管片模型,考虑接头螺栓及内置钢筋对隧道开口空间受力效应的影响,采用弹塑性分析法研究管片开口后隧道结构的力学特性及开口的影响范围,为大直径盾构隧道开口扩挖段管片设计以及加固方案的确定提供依据。
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公开(公告)号:CN116874600B
公开(公告)日:2024-07-05
申请号:CN202310856530.5
申请日:2023-07-13
Applicant: 浙江大学
IPC: C07K16/28 , C12N15/70 , A61K39/395 , A61P31/14 , A61P29/00
Abstract: 本发明涉及分子生物学及生物医学技术领域,旨在提供一种来自纳米抗体可靶向CD163受体的短肽的制备方法及其应用。所述短肽是以截取自纳米抗体的CDR3肽段作为靶向肽,经与人工合成的纳米颗粒mi3的N端连接而获得,CDR3肽段能够多拷贝地展示在mi3的表面;所述短肽包括如SEQ ID NO.14~18中任意一项所示的氨基酸序列,对应地编码所述氨基酸序列的核苷酸序列分别依次如SEQ ID NO.8~12所示。本发明提出从纳米抗体中获取能够靶向CD163受体的短肽的开发策略,该靶向肽能够实现与CD163受体进行特异性的结合、促进一些分子进入细胞,如纳米颗粒mi3和PCV2Cap、并具备抗病毒和抗炎症的功效;为针对CD163受体的靶向肽的开发提供了新的视角,也为同类靶向肽的开发提供了一个新的平台。
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公开(公告)号:CN116554282A
公开(公告)日:2023-08-08
申请号:CN202310408644.3
申请日:2023-04-17
Applicant: 浙江大学
IPC: C07K14/18 , C12N15/40 , C12N15/866 , C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明涉及检测病毒的抗体制备技术,旨在提供一种用于鉴别猪瘟病毒2型感染的单克隆抗体制备方法及应用。本发明提供了组杆状病毒表达的CSFV 2型E2蛋白,该蛋白的编码区cDNA序列如SEQ ID NO.5所示。将前述CSFV 2型E2蛋白经纯化处理后,施用于经CSFV 2型毒株HZ08全病毒免疫后的小鼠以实现混合免疫;利用小鼠骨髓瘤细胞SP2/0和混合免疫后小鼠的脾脏细胞,制备杂交瘤细胞株;经过筛选和亚克隆,获得能稳定分泌特异性抗体的单克隆细胞株;对所获单克隆抗体进行亚型测定、IFA鉴定、免疫印迹鉴定和表位鉴定,筛选出能够阻断ELISA体系的单克隆抗体。本发明制得的单克隆抗体能够用于区分CSFV流行株和疫苗株,或区分接种疫苗的动物和自然感染的动物。
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公开(公告)号:CN119569859A
公开(公告)日:2025-03-07
申请号:CN202411996337.2
申请日:2024-12-31
Applicant: 新昌县天姥实验室 , 浙江大学 , 浙江省动物疫病预防控制中心(浙江省兽药饲料监察所)
IPC: C07K16/08 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/577
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,旨在提供一种抗PCV2Cap蛋白的单克隆抗体27E7及其制备与应用方法。该单克隆抗体包含抗体重链的Ig结构域VH CDR1、VH CDR2和VH CDR3,以及抗体轻链的Ig结构域VL CDR1、VL CDR2和VL CDR3;其中,所述VH CDR1、VH CDR2和VH CDR3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:1~3所示;所述VL CDR1、VL CDR2和VL CDR3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:4~6所示。本发明的单克隆抗体为IgG1亚型,该抗体具有效价高、特异性强、亲和力高等优点;灵敏度高、特异性强,与其他基因型的猪圆环病毒无交叉反应;可以进一步用于PCV2的诊断试剂盒开发,能够有效进行PCV2诊断的推广与应用。
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公开(公告)号:CN116874600A
公开(公告)日:2023-10-13
申请号:CN202310856530.5
申请日:2023-07-13
Applicant: 浙江大学
IPC: C07K16/28 , C12N15/70 , A61K39/395 , A61P31/14 , A61P29/00
Abstract: 本发明涉及分子生物学及生物医学技术领域,旨在提供一种来自纳米抗体可靶向CD163受体的短肽的制备方法及其应用。所述短肽是以截取自纳米抗体的CDR3肽段作为靶向肽,经与人工合成的纳米颗粒mi3的N端连接而获得,CDR3肽段能够多拷贝地展示在mi3的表面;所述短肽包括如SEQ ID NO.14~18中任意一项所示的氨基酸序列,对应地编码所述氨基酸序列的核苷酸序列分别依次如SEQ ID NO.8~12所示。本发明提出从纳米抗体中获取能够靶向CD163受体的短肽的开发策略,该靶向肽能够实现与CD163受体进行特异性的结合、促进一些分子进入细胞,如纳米颗粒mi3和PCV2Cap、并具备抗病毒和抗炎症的功效;为针对CD163受体的靶向肽的开发提供了新的视角,也为同类靶向肽的开发提供了一个新的平台。
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公开(公告)号:CN116804211A
公开(公告)日:2023-09-26
申请号:CN202310514087.3
申请日:2023-05-09
Applicant: 浙江大学
IPC: C12N15/867 , C12N15/65 , C12N5/10 , C12N15/12 , C12N7/00 , A61K39/12 , A61K39/215 , A61P31/14
Abstract: 本发明属于分子生物学及兽用疫苗技术领域,本发明涉及一种利用慢病毒技术在Marc‑145和Vero细胞中过表达先天免疫蛋白MALT1的方法:通过嘌呤霉素不断加压筛选并扩大培养获得高表达的单克隆细胞系,对筛选的高表达细胞系进行稳定性评估,通过使用PRRSV,PEDV疫苗毒株感染该稳转细胞,进行荧光定量,间接免疫荧光等技术评价稳转细胞系对于病毒复制的促进效果。通过本发明方法,可以将PRRSV,PEDV在细胞中的培养滴度提高约10倍,降低临床生产成本。
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公开(公告)号:CN113354740B
公开(公告)日:2022-06-07
申请号:CN202110197932.X
申请日:2021-02-22
Applicant: 浙江大学
IPC: C07K19/00 , C12N15/866 , A61K39/187 , A61K39/39 , A61K9/16 , A61P31/20
Abstract: 本发明涉及生物医学技术领域,旨在提供一种猪瘟病毒自组装蛋白纳米颗粒、制备方法及应用。是将目的抗原SP‑E2和自组装分子的基因通过杆状病毒表达系统融合表达,形成SP‑E2‑mi3融合蛋白;然后进一步通过纳米组装,形成自组装蛋白纳米颗粒;所述目的抗原SP‑E2和自组装分子的基因的编码序列如SEQ ID NO.1所示。本发明通过自组装分子基因融合CSFV E2,通过杆状病毒表达系统表达和纯化得到的融合蛋白,在体外可组装成SP‑E2‑mi3纳米颗粒。本发明用于疫苗制备时,较常规的亚单位疫苗免疫原性强,可通过鉴别诊断能够区分感染及免疫动物,能够从根本上净化猪瘟病毒。
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公开(公告)号:CN113354740A
公开(公告)日:2021-09-07
申请号:CN202110197932.X
申请日:2021-02-22
Applicant: 浙江大学
IPC: C07K19/00 , C12N15/866 , A61K39/187 , A61K39/39 , A61K9/16 , A61P31/20
Abstract: 本发明涉及生物医学技术领域,旨在提供一种猪瘟病毒自组装蛋白纳米颗粒、制备方法及应用。是将目的抗原SP‑E2和自组装分子的基因通过杆状病毒表达系统融合表达,形成SP‑E2‑mi3融合蛋白;然后进一步通过纳米组装,形成自组装蛋白纳米颗粒;所述目的抗原SP‑E2和自组装分子的基因的编码序列如SEQ ID NO.1所示。本发明通过自组装分子基因融合CSFV E2,通过杆状病毒表达系统表达和纯化得到的融合蛋白,在体外可组装成SP‑E2‑mi3纳米颗粒。本发明用于疫苗制备时,较常规的亚单位疫苗免疫原性强,可通过鉴别诊断能够区分感染及免疫动物,能够从根本上净化猪瘟病毒。
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公开(公告)号:CN119751665A
公开(公告)日:2025-04-04
申请号:CN202411996354.6
申请日:2024-12-31
Applicant: 浙江大学 , 新昌县天姥实验室 , 浙江省动物疫病预防控制中心(浙江省兽药饲料监察所)
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , C12N5/20 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,旨在提供一种抗猪瘟病毒E2蛋白的单克隆抗体3B11及其制备与应用方法。该单克隆抗体包含抗体重链的Ig结构域VH CDR1、VH CDR2和VH CDR3,以及抗体轻链的Ig结构域VL CDR1、VL CDR2和VL CDR3;其中,所述VH CDR1、VH CDR2和VH CDR3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:1~3所示;所述VL CDR1、VL CDR2和VL CDR3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:4~6所示。本发明提供的单克隆抗体为IgG1亚型,该抗体具有效价高、特异性强、亲和力高等优点;灵敏度高、特异性强,与目前已知基因型的猪瘟病毒均可产生特异性反应;可进一步用于猪瘟病毒诊断试剂盒的开发,能够有效进行猪瘟病毒的诊断和净化。
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公开(公告)号:CN115960259B
公开(公告)日:2023-11-24
申请号:CN202211220721.4
申请日:2022-10-07
Applicant: 浙江大学
IPC: C07K19/00 , C07K14/01 , C12N15/62 , C12N15/70 , C12N15/866 , A61K39/187 , A61K39/12 , A61P31/14 , A61P31/20 , B82Y5/00 , B82Y40/00
Abstract: 本发明属于分子生物学及生物医学技术领域,涉及嵌合猪圆环病毒样颗粒的制备,以及双组分纳米颗粒在疫苗领域的应用。本发明公开了基于PCV2VLP的二联疫苗的制备方法:将SpyCatcher基因融合到PCV2Cap蛋白的C端构建Cap‑SC VLP,同时表达携带SpyTag的CSFV E2蛋白;基于SpyTag和SpyCatcher之间的异肽键形成,ST‑GFP和E2‑ST在体外与Cap‑SC VLP表面暴露的SpyCatcher结合,从而实现ST‑GFP和E2‑ST全长蛋白在PCV2VLP的表面展示。本发明的CSFV‑PCV2二联颗粒疫苗Cap‑E2NPs在细胞免疫方面表现出明显的性能提升。
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