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公开(公告)号：CN117757846A
公开(公告)日：2024-03-26
申请号：CN202311738194.0
申请日：2023-12-18
Applicant: 中国医学科学院医学生物学研究所
IPC: C12N15/867 , C12N5/079 , C12N5/10 , C12N7/00 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种树鼩角膜基质永生化细胞系的构建方法，该方法是使用组织块贴壁培养法，从树鼩角膜组织中分离获得原代树鼩角膜基质细胞，然后利用携带SV40T的慢病毒转染原代细胞，胰酶消化后挑选单克隆并经过50代以上的传代，获得树鼩角膜基质永生化细胞，并将其应用于单纯疱疹病毒Ⅰ型、登革病毒Ⅱ型、ZIKV以及H1N1病毒的扩增与培养，树鼩角膜基质永生化细胞对这4种病毒敏感，能有效复制并产生较高感染滴度，因此本发明构建的细胞系可用于单纯疱疹病毒、寨卡病毒、登革病毒和甲型流感病毒感染眼角膜疾病的作用机制研究以及病毒的分离培养及相关机制研究，同时也为树鼩角膜基质细胞作为疫苗生产或检定用细胞提供了前期基础数据。
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公开(公告)号：CN109609453A
公开(公告)日：2019-04-12
申请号：CN201910117703.5
申请日：2019-02-15
Applicant: 中国医学科学院医学生物学研究所
IPC: C12N5/0786
Abstract: 本发明涉及一种树鼩小胶质细胞培养基与其体外分离培养及纯化的方法，属于生物技术领域。本发明培养基以DMEM/F12完全培养基为基础培养基，并在基础培养基中加入10%胎牛血清、1%双抗、1%MGS和0.04%B27。本发明同时提供一种树鼩小胶质细胞体体外分离培养及纯化的方法，采用上述树鼩小胶质细胞培养基，包括消化脑组织、制备单细胞悬液、混合胶质细胞培养、小胶质细胞分离纯化等步骤，应用本发明树鼩小胶质细胞体外分离培养及纯化的方法可以培养出纯度较高、活力较强的树鼩小胶质细胞，基本可以满足医学、生物学等研究领域对小胶质细胞相关实验研究的要求。
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公开(公告)号：CN119351339A
公开(公告)日：2025-01-24
申请号：CN202411512938.1
申请日：2024-10-28
Applicant: 中国医学科学院医学生物学研究所
IPC: C12N5/10 , C12N15/867 , C12N7/00 , C12N15/37 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种RSV感染永生化树鼩主动脉血管内皮细胞的模型，具体是从树鼩的主动脉中分离培养原代主动脉血管内皮细胞，并进一步建立永生化树鼩主动脉血管内皮细胞系，以该细胞系作为RSV病毒培养基质，建立RSV感染永生化树鼩主动脉血管内皮细胞模型，并实现高感染滴度RSV病毒的制备；本发明为RSV病毒的制备和检测、树鼩体内感染模型的构建提供了关键支撑，为开展比较医学研究或疫苗评价提供稳定的病毒来源，对于RSV致病机制的深入探索、药物及疫苗评价等均具有深远意义。
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公开(公告)号：CN109609453B
公开(公告)日：2022-07-19
申请号：CN201910117703.5
申请日：2019-02-15
Applicant: 中国医学科学院医学生物学研究所
IPC: C12N5/0786
Abstract: 本发明涉及一种树鼩小胶质细胞培养基与其体外分离培养及纯化的方法，属于生物技术领域。本发明培养基以DMEM/F12完全培养基为基础培养基，并在基础培养基中加入10%胎牛血清、1%双抗、1%MGS和0.04%B27。本发明同时提供一种树鼩小胶质细胞体体外分离培养及纯化的方法，采用上述树鼩小胶质细胞培养基，包括消化脑组织、制备单细胞悬液、混合胶质细胞培养、小胶质细胞分离纯化等步骤，应用本发明树鼩小胶质细胞体外分离培养及纯化的方法可以培养出纯度较高、活力较强的树鼩小胶质细胞，基本可以满足医学、生物学等研究领域对小胶质细胞相关实验研究的要求。
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公开(公告)号：CN112391346A
公开(公告)日：2021-02-23
申请号：CN202011378338.2
申请日：2020-11-30
Applicant: 中国医学科学院医学生物学研究所
IPC: C12N5/079
Abstract: 本发明涉及一种非酶消化法获取树鼩大脑星形胶质细胞的分离培养方法，属于细胞分离培养技术领域。本发明以gentleMACS全自动组织处理器解离脑组织，消化传代时用TrypLE Express替代常用的胰酶来消化树鼩大脑星形胶质细胞，并含10%胎牛血清、1%双抗DMEM/F12完全培养基进行培养。通过本发明方法可以轻松的实现树鼩大脑星形胶质细胞的体外分离培养，进一步简化了分离方法，缩短周期，减轻细胞伤害，分离效率大大提高，星形胶质细胞特异性标志物‑胶质纤维状酸性蛋白免疫荧光染色率高，能够满足医学、生物学等研究领域对星形胶质细胞相关实验研究的要求。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN106244549B
公开(公告)日：2019-11-29
申请号：CN201610690263.9
申请日：2016-08-19
Applicant: 中国医学科学院医学生物学研究所
Abstract: 本发明公开一种树鼩角膜内皮细胞的体外分离及纯化方法，经树鼩角膜内皮原代细胞的分离、纯化、CECs的传代培养，得到角膜内皮细胞。分离得到的角膜内皮细胞具有较高的细胞活力，在传至P3代可以实现树鼩角膜内皮细胞的纯化，纯化的细胞具有典型的内皮细胞形态，经NSE免疫荧光鉴定，染色率高。该方法纯化效率大大提高，价格低廉、使用方便，可以获得大量树鼩角膜内皮细胞。实现树鼩角膜内皮细胞的体外培养，填补了目前没有针对树鼩这一物种特定的角膜内皮原代细胞体外培养技术的空白，本发明提供的原代细胞的取材及纯化方法操作简单，价格低廉，体外培养的树鼩角膜内皮细胞可以在长期的传代培养过程中维持良好的细胞形态。
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公开(公告)号：CN103276055B
公开(公告)日：2015-02-18
申请号：CN201310104794.1
申请日：2013-03-28
Applicant: 中国医学科学院医学生物学研究所
Abstract: 一种以树鼩IL-2质粒为标准品的TAQMAN探针荧光定量PCR方法，包括以树鼩IL-2基因为目标，设计TAQMANPCR引物和探针，设计实验找到最优条件下引物的退火温度、引物浓度、探针浓度，提纯树鼩IL-2质粒计算IL-2基因片段拷贝数，以计算好的树鼩IL-2质粒用10倍梯度稀释，配制拷贝数为105～109copies阳性质粒建立标准曲线，并检测其灵敏性。
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公开(公告)号：CN112391346B
公开(公告)日：2024-03-29
申请号：CN202011378338.2
申请日：2020-11-30
Applicant: 中国医学科学院医学生物学研究所
IPC: C12N5/079
Abstract: 本发明涉及一种非酶消化法获取树鼩大脑星形胶质细胞的分离培养方法，属于细胞分离培养技术领域。本发明以gentleMACS全自动组织处理器解离脑组织，消化传代时用TrypLE Express替代常用的胰酶来消化树鼩大脑星形胶质细胞，并含10%胎牛血清、1%双抗DMEM/F12完全培养基进行培养。通过本发明方法可以轻松的实现树鼩大脑星形胶质细胞的体外分离培养，进一步简化了分离方法，缩短周期，减轻细胞伤害，分离效率大大提高，星形胶质细胞特异性标志物‑胶质纤维状酸性蛋白免疫荧光染色率高，能够满足医学、生物学等研究领域对星形胶质细胞相关实验研究的要求。
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公开(公告)号：CN116849179A
公开(公告)日：2023-10-10
申请号：CN202310995689.5
申请日：2023-08-09
Applicant: 中国医学科学院医学生物学研究所
IPC: A01K67/027
Abstract: 本发明涉及一种帕金森病树鼩模型的构建方法，属于动物模型构建技术领域。该方法是将A53T突变型α‑synuclein‑EGFP腺相关病毒载体给药至树鼩左脑黑质，从而建立帕金森病树鼩模型。在病毒载体给药3个月时，通过行为学实验观察行为学的改变，检测海马BDNF的蛋白表达，检测α‑synuclein的过表达对认知能力的影响，检测α‑synuclein是否在黑质表达，以及α‑synuclein的表达对黑质多巴胺能神经元的损伤及路易小体形成的影响。本发明首次建立A53T‑α‑synuclein诱导的帕金森病树鼩模型，为推动PD机制解析和药物开发提供动物模型及研究平台。
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公开(公告)号：CN109666642B
公开(公告)日：2022-08-16
申请号：CN201910115106.9
申请日：2019-02-14
Applicant: 中国医学科学院医学生物学研究所
IPC: C12N5/079
Abstract: 本发明涉及一种树鼩大脑皮层少突胶质前体细胞体外分离纯化的方法，属于细胞分离纯化技术领域。该方法利用胰蛋白酶与DNaseⅠ联合消化大脑皮层，通过两次差速贴壁纯化，较好的分离纯化树鼩OPCs。本发明方法操作步骤简单，具有细胞贴壁快、存活率高等特点，在后续的鉴定实验中呈现极高的细胞纯度，鉴定结果可信度高，可以满足医学、生物学、药学和生命科学各研究领域对树鼩OPCs相关实验研究的要求，适宜在一般实验室进行推广应用。
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