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公开(公告)号：CN106146679B
公开(公告)日：2019-02-01
申请号：CN201510196021.X
申请日：2015-04-23
Applicant: 中国医学科学院医学生物学研究所
IPC: C08B37/00
Abstract: 本发明公开了一种纯化细菌荚膜多糖的方法，所述纯化方法利用非离子表面活性剂，通过相分离法纯化细菌荚膜多糖。细菌荚膜多糖疫苗的制备过程中需要尽可能多地去除杂质蛋白和内毒素，以减少疫苗的副反应。目前使用的苯酚抽提法、柱层析法以及乙醇沉淀法，均存在诸多的缺陷。与苯酚相比，非离子表面活性剂具有无腐蚀性无致癌性等特点，并且不会对环境造成危害。与柱层析相比，本发明的方法处理量大、省时、经济、容易扩大生产规模，是一种安全、环保、高效的细菌荚膜多糖的纯化方法。
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公开(公告)号：CN103757053B
公开(公告)日：2016-05-25
申请号：CN201410041906.8
申请日：2014-01-28
Applicant: 中国医学科学院医学生物学研究所
Abstract: 本发明提供了一种特异性的DNA病毒基因组定点改造及筛选方法，如下：一、构建定点切割单链、双链核酸酶系统及同源序列；二、导入定点切割单链核酸酶系统和同源序列的细胞感染DNA病毒，待细胞病变，收集P1子代病毒；三、导入定点切割双链核酸酶系统的细胞感染P1子代病毒，待细胞病变，收集P2子代病毒；最后从P2子代病毒中分离纯化获得目的子代病毒。上述二为病毒基因组同源重组步骤，在不引入随机突变的情况下，提高病毒基因组同源重组效率约十万倍；上述三为特异性扩增步骤，进一步提高特异性突变病毒在子代病毒中的比例约十倍左右。本发明能有效控制突变类型，并快速方便地筛选获得具有特定突变、缺失或插入的重组病毒。
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公开(公告)号：CN103757053A
公开(公告)日：2014-04-30
申请号：CN201410041906.8
申请日：2014-01-28
Applicant: 中国医学科学院医学生物学研究所
Abstract: 本发明提供了一种特异性的DNA病毒基因组定点改造及筛选方法，如下：一、构建定点切割单链、双链核酸酶系统及同源序列；二、导入定点切割单链核酸酶系统和同源序列的细胞感染DNA病毒，待细胞病变，收集P1子代病毒；三、导入定点切割双链核酸酶系统的细胞感染P1子代病毒，待细胞病变，收集P2子代病毒；最后从P2子代病毒中分离纯化获得目的子代病毒。上述二为病毒基因组同源重组步骤，在不引入随机突变的情况下，提高病毒基因组同源重组效率约十万倍；上述三为特异性扩增步骤，进一步提高特异性突变病毒在子代病毒中的比例约十倍左右。本发明能有效控制突变类型，并快速方便地筛选获得具有特定突变、缺失或插入的重组病毒。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN106434720A
公开(公告)日：2017-02-22
申请号：CN201610626742.4
申请日：2016-08-03
Applicant: 中国医学科学院医学生物学研究所
CPC classification number: C12N15/70 , C07K14/22 , C12N15/66 , C12N2810/55
Abstract: 本发明涉及提高重组脑膜炎奈瑟菌fHBP蛋白表达的方法，属于基因工程技术领域。本发明通过分别更换流感嗜血杆菌P4外膜蛋白信号肽、大肠杆菌脂蛋白-28信号肽和大肠杆菌主要外膜脂蛋白信号肽表达重组脑膜炎奈瑟菌fHBP，表达量与带原始信号肽的脑膜炎奈瑟菌fHBP相比分别提高了2.68±0.32、1.94±0.17和2.91±0.25倍，解决了fHBP蛋白表达量低的问题，为重组脑膜炎奈瑟菌fHBP蛋白的工艺研发及疫苗应用奠定了基础。
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公开(公告)号：CN119351339A
公开(公告)日：2025-01-24
申请号：CN202411512938.1
申请日：2024-10-28
Applicant: 中国医学科学院医学生物学研究所
IPC: C12N5/10 , C12N15/867 , C12N7/00 , C12N15/37 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种RSV感染永生化树鼩主动脉血管内皮细胞的模型，具体是从树鼩的主动脉中分离培养原代主动脉血管内皮细胞，并进一步建立永生化树鼩主动脉血管内皮细胞系，以该细胞系作为RSV病毒培养基质，建立RSV感染永生化树鼩主动脉血管内皮细胞模型，并实现高感染滴度RSV病毒的制备；本发明为RSV病毒的制备和检测、树鼩体内感染模型的构建提供了关键支撑，为开展比较医学研究或疫苗评价提供稳定的病毒来源，对于RSV致病机制的深入探索、药物及疫苗评价等均具有深远意义。
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公开(公告)号：CN103397018A
公开(公告)日：2013-11-20
申请号：CN201310364133.2
申请日：2013-08-20
Applicant: 中国医学科学院医学生物学研究所
Abstract: 本发明提供了一种DNA病毒基因组的定点改造方法，解决了现有技术诱导DNA病毒基因组定点突变困难，插入外源片段操作复杂，重组率较低的问题。将携带有核酸酶系统的质粒转染细胞后，再感染病毒，待细胞出现病变后，收集病变细胞，经冻融或超声处理后再离心，将上清液分离即得到子代病毒。本发明能够实现在筛选病毒减毒疫苗株、构建病毒性基因载体和溶瘤病毒、研究病毒功能序列等的应用，在病毒基因组进行改造过程中，提高诱变效率，精确控制DNA病毒进行基因组定点突变和特定基因敲除，简化外源基因插入DNA病毒载体的操作步骤，提高外源基因整合进入病毒基因组的效率，从而便于进行高通量的重组病毒筛选工作。
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公开(公告)号：CN106146679A
公开(公告)日：2016-11-23
申请号：CN201510196021.X
申请日：2015-04-23
Applicant: 中国医学科学院医学生物学研究所
IPC: C08B37/00
CPC classification number: A61K39/095 , C08B37/00 , C08B37/0003
Abstract: 本发明公开了一种纯化细菌荚膜多糖的方法，所述纯化方法利用非离子表面活性剂，通过相分离法纯化细菌荚膜多糖。细菌荚膜多糖疫苗的制备过程中需要尽可能多地去除杂质蛋白和内毒素，以减少疫苗的副反应。目前使用的苯酚抽提法、柱层析法以及乙醇沉淀法，均存在诸多的缺陷。与苯酚相比，非离子表面活性剂具有无腐蚀性无致癌性等特点，并且不会对环境造成危害。与柱层析相比，本发明的方法处理量大、省时、经济、容易扩大生产规模，是一种安全、环保、高效的细菌荚膜多糖的纯化方法。
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公开(公告)号：CN103397018B
公开(公告)日：2015-04-22
申请号：CN201310364133.2
申请日：2013-08-20
Applicant: 中国医学科学院医学生物学研究所
Abstract: 本发明提供了一种DNA病毒基因组的定点改造方法，解决了现有技术诱导DNA病毒基因组定点突变困难，插入外源片段操作复杂，重组率较低的问题。将携带有核酸酶系统的质粒转染细胞后，再感染病毒，待细胞出现病变后，收集病变细胞，经冻融或超声处理后再离心，将上清液分离即得到子代病毒。本发明能够实现在筛选病毒减毒疫苗株、构建病毒性基因载体和溶瘤病毒、研究病毒功能序列等的应用，在病毒基因组进行改造过程中，提高诱变效率，精确控制DNA病毒进行基因组定点突变和特定基因敲除，简化外源基因插入DNA病毒载体的操作步骤，提高外源基因整合进入病毒基因组的效率，从而便于进行高通量的重组病毒筛选工作。
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