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公开(公告)号：CN109609453A
公开(公告)日：2019-04-12
申请号：CN201910117703.5
申请日：2019-02-15
Applicant: 中国医学科学院医学生物学研究所
IPC: C12N5/0786
Abstract: 本发明涉及一种树鼩小胶质细胞培养基与其体外分离培养及纯化的方法，属于生物技术领域。本发明培养基以DMEM/F12完全培养基为基础培养基，并在基础培养基中加入10%胎牛血清、1%双抗、1%MGS和0.04%B27。本发明同时提供一种树鼩小胶质细胞体体外分离培养及纯化的方法，采用上述树鼩小胶质细胞培养基，包括消化脑组织、制备单细胞悬液、混合胶质细胞培养、小胶质细胞分离纯化等步骤，应用本发明树鼩小胶质细胞体外分离培养及纯化的方法可以培养出纯度较高、活力较强的树鼩小胶质细胞，基本可以满足医学、生物学等研究领域对小胶质细胞相关实验研究的要求。
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公开(公告)号：CN108315480A
公开(公告)日：2018-07-24
申请号：CN201810231031.6
申请日：2018-03-20
Applicant: 中国医学科学院医学生物学研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/6851 , C12Q2531/113 , C12Q2561/101 , C12Q2545/113
Abstract: 本发明涉及一种检测树鼩腺病毒的实时荧光定量PCR引物、探针和试剂盒，属于生物技术领域。该引物是根据本实验室分离鉴定并测序的树鼩全基因组3′端保守序列设计合成，与树鼩源及其他物种常见病毒无交叉反应，探针5’端连接有荧光报告基团，3’端连接有荧光淬灭基团。通过本发明试剂盒检测，所得结果更加准确、可靠、稳定性好、重复性好。灵敏度高、定量快速准确、检测范围广。也可以应用于树鼩腺病毒引起的流行病学调查，还可以为相关基础研究提供技术支持，应用前景十分广泛。
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公开(公告)号：CN112391346B
公开(公告)日：2024-03-29
申请号：CN202011378338.2
申请日：2020-11-30
Applicant: 中国医学科学院医学生物学研究所
IPC: C12N5/079
Abstract: 本发明涉及一种非酶消化法获取树鼩大脑星形胶质细胞的分离培养方法，属于细胞分离培养技术领域。本发明以gentleMACS全自动组织处理器解离脑组织，消化传代时用TrypLE Express替代常用的胰酶来消化树鼩大脑星形胶质细胞，并含10%胎牛血清、1%双抗DMEM/F12完全培养基进行培养。通过本发明方法可以轻松的实现树鼩大脑星形胶质细胞的体外分离培养，进一步简化了分离方法，缩短周期，减轻细胞伤害，分离效率大大提高，星形胶质细胞特异性标志物‑胶质纤维状酸性蛋白免疫荧光染色率高，能够满足医学、生物学等研究领域对星形胶质细胞相关实验研究的要求。
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公开(公告)号：CN113637707A
公开(公告)日：2021-11-12
申请号：CN202110909664.X
申请日：2021-08-09
Applicant: 中国医学科学院医学生物学研究所
IPC: C12N15/867 , C12N15/62 , C12N5/071 , C12N5/10
Abstract: 本发明公开了一种树鼩永生化皮肤成纤维细胞的建立方法，该方法是采用酶消化法从树鼩皮肤组织中分离纯化获得原代树鼩皮肤成纤维细胞，然后利用携带SV40T的慢病毒转染原代细胞，经过50代以上的传代，获得永生化树鼩皮肤成纤维细胞，方法实施过程中细胞培养使用的完全培养基为含有体积百分比10%胎牛血清、1%青‑链霉素、1‑3%NaHCO3、1‑3%非必需氨基酸的MEM培养基；本发明方法获得的细胞能够稳定传代至50代以上，有效维持了树鼩皮肤成纤维细胞稳定的生长状态和增殖能力，实现细胞的即用即取，为人类皮肤相关疾病的研究提供了能够稳定传代的皮肤成纤维细胞。
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公开(公告)号：CN108315480B
公开(公告)日：2021-01-29
申请号：CN201810231031.6
申请日：2018-03-20
Applicant: 中国医学科学院医学生物学研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及一种检测树鼩腺病毒的实时荧光定量PCR引物、探针和试剂盒，属于生物技术领域。该引物是根据本实验室分离鉴定并测序的树鼩全基因组3′端保守序列设计合成，与树鼩源及其他物种常见病毒无交叉反应，探针5’端连接有荧光报告基团，3’端连接有荧光淬灭基团。通过本发明试剂盒检测，所得结果更加准确、可靠、稳定性好、重复性好。灵敏度高、定量快速准确、检测范围广。也可以应用于树鼩腺病毒引起的流行病学调查，还可以为相关基础研究提供技术支持，应用前景十分广泛。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN107475198A
公开(公告)日：2017-12-15
申请号：CN201710715979.4
申请日：2017-08-21
Applicant: 中国医学科学院医学生物学研究所 , 昆明医科大学
IPC: C12N5/0793
Abstract: 本发明涉及一种树鼩多巴胺能神经元细胞分离培养方法，属于细胞分离培养技术领域。本发明将3日龄内的离体树鼩大脑放入预冷的含2%双抗的D-Hank's液中，去除软膜血管，剥离出大脑皮质及中脑组织，用D-Hank's液清洗后，剪碎，离心，弃上清，胰酶消化后，过细胞筛，滤液离心，弃上清，用神经元专用培养基重悬细胞，转入PDL包被的细胞板上培养，培养3d后换液，以后每3天换一次液；当细胞贴壁并长至70%-80%时，进行酪氨酸羟化酶及Nestin蛋白的双荧光免疫鉴定。利用本方法分离培养出的神经元细胞成活率高达95%，能为进一步的神经系统疾病的研究提供可靠的实验材料。
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公开(公告)号：CN102499105B
公开(公告)日：2013-07-24
申请号：CN201110293451.5
申请日：2011-10-06
Applicant: 中国医学科学院医学生物学研究所
IPC: A01K15/02
Abstract: 一种水迷宫空间学习记忆树鼩模型的建立方法，包括实验前对动物的筛选，实验装置准备，实验操作以及成模指标四个步骤，确定水迷宫空间学习树鼩模型的建立方法成模指标为：在定位航行实验中，正确率在90%以上；平均潜伏期介于20-25s之间作为判定树鼩在水迷宫实验中建立了空间学习性学习模型的标准；在空间探索实验中，以在靶象限活动时间的比率和穿台次数在训练前后有显著性差异作为判定树鼩在水迷宫实验中建立了空间记忆性模型的标准。
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公开(公告)号：CN102499105A
公开(公告)日：2012-06-20
申请号：CN201110293451.5
申请日：2011-10-06
Applicant: 中国医学科学院医学生物学研究所
IPC: A01K15/02
Abstract: 一种水迷宫空间学习记忆树鼩模型的建立方法，包括实验前对动物的筛选，实验装置准备，实验操作以及成模指标四个步骤，确定水迷宫空间学习树鼩模型的建立方法成模指标为：在定位航行实验中，正确率在90%以上；平均潜伏期介于20-25s之间作为判定树鼩在水迷宫实验中建立了空间学习性学习模型的标准；在空间探索实验中，以在靶象限活动时间的比率和穿台次数在训练前后有显著性差异作为判定树鼩在水迷宫实验中建立了空间记忆性模型的标准。
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公开(公告)号：CN115521901B
公开(公告)日：2023-09-05
申请号：CN202211247024.8
申请日：2022-10-12
Applicant: 中国医学科学院医学生物学研究所
IPC: C12N5/071 , C12N5/10 , C12N15/867 , C12Q1/02
Abstract: 本发明涉一种永生化树鼩视网膜微血管内皮细胞株及其构建方法与应用。该方法是使用混合酶消化法，采用Ⅱ型胶原酶、分散酶和脱氧核糖核酸酶I从树鼩视网膜组织中分离并通过差速消化法纯化获得原代树鼩视网膜微血管内皮细胞，然后利用携带SV40T的慢病毒转染原代细胞，胰酶消化后挑选单克隆并经过50代以上的传代，获得永生化树鼩视网膜微血管内皮细胞；本发明方法获得的细胞能够稳定传代至50代以上，有效维持了树鼩视网膜微血管内皮细胞稳定的生长状态和增殖能力，改善了目前视网膜血管研究只能现用现取的烦琐程序，为眼科相关疾病的研究提供了稳定的视网膜微血管内皮细胞系，真正做到省时、省力、高效、便利。
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公开(公告)号：CN115136928B
公开(公告)日：2023-07-28
申请号：CN202210785467.6
申请日：2022-07-05
Applicant: 中国医学科学院医学生物学研究所
IPC: A01K67/02 , A23K20/158 , A23K20/163 , A23K20/168 , A23K50/00
Abstract: 本发明涉及一种树鼩Ⅱ型糖尿病快速的造模方法，该方法是选用树鼩，采用高脂高糖饲料喂养12‑15天，自由取食，自由饮水；在喂养第7‑9天时，利用链脲佐菌素对树鼩给药，剂量为90‑110mg/kg；所述的高脂高糖饲料包括按照重量份数计的如下组分：基础饲料68‑70份、猪油9‑11份、白糖9‑11份、果糖9‑11份、胆固醇0.9‑1.2份。本方法可使树鼩表现为持续性高血糖，空腹血糖≥11.1mmol/L，尿糖++++，可作为研究糖尿病及其并发症发病机制以及药物作用机理的模型。并且本方法具有周期短、造模方法简单、死亡率低等优点，而且能模仿Ⅱ型糖尿病的发病经过，表型接近人类Ⅱ型糖尿病，易于推广应用。
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