公开(公告)号：CN105695492A

公开(公告)日：2016-06-22

申请号：CN201610179466.1

申请日：2016-03-25

Applicant: 中国农业科学院生物技术研究所

Inventor： 张宇宏 ,  张伟 ,  刘波 ,  徐欣欣 ,  秦星

IPC: C12N15/60 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明公开了果胶裂解酶优化基因及其表达载体和应用。本发明首先在不改变果胶裂解酶氨基酸序列的前提下，通过包括密码子使用频率和分布,密码子适应指数CAI，改变特定基因区域的GC含量等多种序列优化方式，得到3个果胶裂解酶优化基因。进一步本发明将上述3个果胶裂解酶基因和1个野生型基因转入到毕赤酵母中进行表达，最终筛选出在毕赤酵母中的分泌表达量显著提高、酶活力最强的核苷酸序列为SEQ ID No.2所示的果胶裂解酶优化基因。本发明果胶裂解酶优化基因所表达的果胶裂解酶能够有效地降解苹果中的果胶类物质，提高出汁率，为进一步工业化扩大生产奠定了基础。

公开(公告)号：CN105695492B

公开(公告)日：2020-01-14

申请号：CN201610179466.1

申请日：2016-03-25

Applicant: 中国农业科学院生物技术研究所

Inventor： 张宇宏 ,  张伟 ,  刘波 ,  徐欣欣 ,  秦星

IPC: C12N15/60 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明公开了果胶裂解酶优化基因及其表达载体和应用。本发明首先在不改变果胶裂解酶氨基酸序列的前提下，通过包括密码子使用频率和分布,密码子适应指数CAI，改变特定基因区域的GC含量等多种序列优化方式，得到3个果胶裂解酶优化基因。进一步本发明将上述3个果胶裂解酶基因和1个野生型基因转入到毕赤酵母中进行表达，最终筛选出在毕赤酵母中的分泌表达量显著提高、酶活力最强的核苷酸序列为SEQ ID No.2所示的果胶裂解酶优化基因。本发明果胶裂解酶优化基因所表达的果胶裂解酶能够有效地降解苹果中的果胶类物质，提高出汁率，为进一步工业化扩大生产奠定了基础。