葡萄糖淀粉酶GA51及其突变体和应用

    公开(公告)号:CN116949016B

    公开(公告)日:2023-12-12

    申请号:CN202311225491.5

    申请日:2023-09-21

    Abstract: 本发明公开了葡萄糖淀粉酶GA51及其突变体和应用。本发明首先公开了葡萄糖淀粉酶GA51,其氨基酸序列为SEQ ID No.1所示。本发明进一步将葡萄糖淀粉酶GA51进行突变获得催化效率显著提升的突变体;具体的,将氨基酸序列为SEQ ID No.1所示的葡萄糖淀粉酶GA51分别进行A304S、G590S、A557S、L576T、I397V、N207A、A606S、D563N或D571S单位点突变获得了9个单位点突变体。酶活测定结果显示所有突变体的相对酶比活基本均为野生型的2倍以上,其中A557S相对酶比活最高,为葡萄糖淀粉酶GA51的2.88±0.03倍,突变体A557S的催化效率约为葡萄糖淀粉酶GA51的4.13倍。

    Taq DNA聚合酶突变体及其应用

    公开(公告)号:CN113373127A

    公开(公告)日:2021-09-10

    申请号:CN202110640339.8

    申请日:2021-03-30

    Abstract: 本发明公开了Taq DNA聚合酶突变体及其应用。本发明提供了一种热稳定性提高的Taq DNA聚合酶单位点突变体,该突变体通过将SEQ ID No.1所示氨基酸序列进行G79E、G80A、D177E、A180V、E189P、S357A、A472E或G504K中的单位点突变所获得的突变体。在单位点突变的基础上,本发明提供了热稳定性进一步提高的Taq DNA聚合酶多位点突变体。qPCR热稳定性检测表明,本发明提供的Taq DNA聚合酶单位点或多位点突变体较野生型酶活有显著提高,热稳定性明显优于野生型Taq DNA聚合酶。本发明还提供了所述突变体作为Taq DNA聚合酶在基因扩增中的用途。

    α-葡聚糖磷酸化酶突变体及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN119177224B

    公开(公告)日:2025-03-14

    申请号:CN202411700313.8

    申请日:2024-11-26

    Abstract: 本发明公开了α‑葡聚糖磷酸化酶突变体及其制备方法和应用。本发明针对纤维素制淀粉的关键酶元件存在催化效率低、稳定性和适配性差、异源表达难等问题,通过宏基因组和公共数据库的大数据分析及生物信息学方法,精准挖掘新型纤维素降解和淀粉合成关键酶元件挖掘鉴定得到来自烟草的α‑葡聚糖磷酸化酶,该酶较土豆来源的α‑葡聚糖磷酸化酶具有更好的酶活及淀粉合成功能;本发明进一步对来源于烟草的α‑葡聚糖磷酸化酶的Cap结构域进行单位点突变,结果发现将氨基酸序列为SEQ ID No.1所示的烟草来源的α‑葡聚糖磷酸化酶进行N563T单位点突变所获得的单位点突变体,其酶活以及表达量均显著高于野生型α‑葡聚糖磷酸化酶。

    PET塑料降解酶BMHETase突变体及其应用

    公开(公告)号:CN118222523B

    公开(公告)日:2024-07-26

    申请号:CN202410645986.1

    申请日:2024-05-23

    Abstract: 本发明公开了PET塑料降解酶BMHETase突变体及其应用。本发明将SEQ ID No.1所示的野生型BMHETase进行单位点或多位点突变得到单位点突变体或多位点突变体,这些突变体对BHET和MHET的降解活性相比野生型均有明显提高,且随着突变位点的叠加或增加,多位点突变体降解MHET以及BHET的活性逐渐提高,其中,六位点突变体BMHETase6M水解活性最高,分别是野生型BMHETase降解MHET、BHET的7.53倍和2.31倍;最佳反应温度检测结果表明,BMHETase6M降解MHET和BHET的最适反应温度分别为60℃和65℃,均比野生型BMHETase提高了5℃。

    低温过氧化氢酶及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN112143721A

    公开(公告)日:2020-12-29

    申请号:CN202011347024.6

    申请日:2020-11-26

    Abstract: 本发明公开了低温过氧化氢酶及其制备方法和应用。本发明从天山土壤宏基因中分离得到过氧化氢酶基因,其多核苷酸序列为SEQ ID No.1所示,编码502个氨基酸和一个终止密码子。本发明过氧化氢酶的最适温度是10‑20℃,并且在0~30℃的低温范围内均具有较高的酶活性,具有低温酶的特性,能在低温环境中发挥清除H2O2的作用。本发明的过氧化氢酶具有良好的热稳定性,在40℃具有良好的热稳定性,处理3 h后仍残留74%的酶活性,在50℃具有一定的热稳定性,处理0.5 h后仍残留78%的酶活性。本发明过氧化氢酶的最适pH为8.0。本发明进一步提供了所述的过氧化氢酶作为抗氧化剂在清除H2O2中的应用。

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