一种高杀线活性的几丁质降解酶筛选方法

    公开(公告)号:CN120005858A

    公开(公告)日:2025-05-16

    申请号:CN202510502799.2

    申请日:2025-04-22

    Abstract: 本发明提供一种高杀线活性的几丁质降解酶筛选方法,属于酶筛选技术领域,本发明将线虫培养于含几丁质培养基中;添加待测酶液,测定透明圈比值作为线虫体壁顽固方程输入参数;测定酶液几丁质降解活性作为线虫体壁破坏方程输入参数;通过硫酸铵沉淀和离子交换色谱纯化酶液;测定活性组分对线虫体壁完整性影响,计算体壁顽固向量;测定活性组分对线虫体壁降解作用,计算体壁破坏向量;测定活性组分对线虫繁殖影响,计算生殖能力向量;计算综合评分筛选高活性酶;进行结构域分析和定点突变,创建突变体酶库;筛选活性提高50%以上的突变体,解决了现有技术中存在的难以准确评价几丁质降解酶对线虫几丁质体壁的实际降解效能及其生物学影响的技术问题。

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