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公开(公告)号：CN112680421B
公开(公告)日：2022-09-13
申请号：CN202110136987.X
申请日：2021-02-01
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) , 哈尔滨维科生物技术有限公司
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一株具有广谱性中和猪流行性腹泻病毒的单克隆抗体及其应用。所述的单克隆抗体是由保藏编号为CGMCC No.13840的杂交瘤细胞分泌产生。所述的单克隆抗体具有广谱性，能够有效中和PEDV‑LNCT2、PEDV‑LNSY和PEDV‑Hjms等G2基因亚型毒株，使其失去感染细胞的能力，也能够中和CV777毒株(G1基因亚型)。鉴于该单克隆抗体的生物学特性以及所具有的广谱性中和PEDV毒株的能力，该单克隆抗体可用于建立一系列包括阻断ELISA、捕获ELISA、间接ELISA、竞争ELISA和胶体金试纸条等方法在内的PEDV诊断方法，具备广阔的应用价值和研究价值。
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公开(公告)号：CN112680421A
公开(公告)日：2021-04-20
申请号：CN202110136987.X
申请日：2021-02-01
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) , 哈尔滨维科生物技术有限公司
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一株具有广谱性中和猪流行性腹泻病毒的单克隆抗体及其应用。所述的单克隆抗体是由保藏编号为CGMCC No.13840的杂交瘤细胞分泌产生。所述的单克隆抗体具有广谱性，能够有效中和PEDV‑LNCT2、PEDV‑LNSY和PEDV‑Hjms等G2基因亚型毒株，使其失去感染细胞的能力，也能够中和CV777毒株(G1基因亚型)。鉴于该单克隆抗体的生物学特性以及所具有的广谱性中和PEDV毒株的能力，该单克隆抗体可用于建立一系列包括阻断ELISA、捕获ELISA、间接ELISA、竞争ELISA和胶体金试纸条等方法在内的PEDV诊断方法，具备广阔的应用价值和研究价值。
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公开(公告)号：CN116286679B
公开(公告)日：2023-08-01
申请号：CN202310514420.0
申请日：2023-05-09
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N7/00 , A61K39/215 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一株经分离得到的猪流行性腹泻病毒变异株及其应用。属于生物技术领域。本发明发明人采集辽宁某猪场腹泻仔猪的小肠，将阳性病料接种Vero E6细胞分离病毒并继代，期间进行2次噬斑克隆，并通过RT‑PCR、间接免疫荧光试验和透射电镜鉴定，最终证实成功分离纯化得到一株猪流行性腹泻病毒变异株，命名为LNct2a，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC No.45224。将本发明分离的PEDV变异株LNct2a株制成灭活疫苗免疫仔猪后，免疫原性和安全性皆十分良好，可产生较高的中和抗体，最高可达1000倍以上。本发明的提出为猪流行性腹泻的防治提供了有效的技术手段。
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公开(公告)号：CN116286679A
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN202310514420.0
申请日：2023-05-09
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N7/00 , A61K39/215 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一株经分离得到的猪流行性腹泻病毒变异株及其应用。属于生物技术领域。本发明发明人采集辽宁某猪场腹泻仔猪的小肠，将阳性病料接种Vero E6细胞分离病毒并继代，期间进行2次噬斑克隆，并通过RT‑PCR、间接免疫荧光试验和透射电镜鉴定，最终证实成功分离纯化得到一株猪流行性腹泻病毒变异株，命名为LNct2a，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC No.45224。将本发明分离的PEDV变异株LNct2a株制成灭活疫苗免疫仔猪后，免疫原性和安全性皆十分良好，可产生较高的中和抗体，最高可达1000倍以上。本发明的提出为猪流行性腹泻的防治提供了有效的技术手段。
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公开(公告)号：CN112522443A
公开(公告)日：2021-03-19
申请号：CN202011506329.7
申请日：2020-12-18
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供了一种检测猪急性腹泻综合征冠状病毒的引物组合物和试剂盒以及应用，属于生物技术领域。本发明的目的是解决提高检测猪急性腹泻综合征冠状病毒的准确性、速度、灵敏性和稳定性的技术问题。本发明提供了一种检测猪急性腹泻综合征冠状病毒的引物组合物，所述引物组合物由以下序列组成：FIP引物、BIP引物、F3引物和B3引物，检测的步骤为提取检测样本的RNA，然后进行RT‑LAMP反应，本发明建立的RT‑LAMP检测方法可以用于临床样本的检测，且较普通RT‑PCR更加快速和简便，比RT‑PCR方法的灵敏性高103倍。
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公开(公告)号：CN110468113A
公开(公告)日：2019-11-19
申请号：CN201910728644.5
申请日：2019-08-07
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明涉及猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)强毒株的重组及表达。由于不同病毒株之间的序列存在特异性，本发明以TGEV流行强毒株AH为研究对象，以BAC载体pBeloBAC11为基本骨架，构建AH株感染性克隆，在感染性克隆的基础上，构建表达外源基因的重组质粒，获得了重组TGEV-AH病毒。
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公开(公告)号：CN110468112A
公开(公告)日：2019-11-19
申请号：CN201910728643.0
申请日：2019-08-07
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明涉及猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)弱毒株的重组及表达。由于不同病毒株之间的序列存在特异性，本发明以TGEV流行弱毒株H165为研究对象，以BAC载体pBeloBAC11为基本骨架，构建TGEV H165株感染性克隆，在感染性克隆的基础上，构建表达外源基因的重组质粒，获得了重组TGEV-H165病毒。
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公开(公告)号：CN110187097A
公开(公告)日：2019-08-30
申请号：CN201910452755.8
申请日：2019-05-28
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 , 南京微测生物科技有限公司 , 哈尔滨维科生物技术有限公司
IPC: G01N33/533 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了猪流行性腹泻病毒荧光定量检测试纸条及其制备方法和应用。所述的荧光定量检测试纸条按照连接顺序依次包括样品垫、喷有荧光标记物探针的荧光标记物结合垫、喷涂有检测线T和质控线C的硝酸纤维素膜以及吸水纸，还包括位于下方的塑料底衬、其中塑料底衬的作用是提供组装平台，其中，荧光标记物结合垫上喷涂有PEDV单抗荧光微球标记物和兔IgG荧光微球标记物，所述的硝酸纤维素膜上喷涂有PEDV单抗形成的检测线T以及羊抗兔IgG多抗形成的质控线C。实验证明，本发明的试纸条敏感性比现有的RT-PCR和胶体金试纸条检测方法至少提高10倍，而且对检测样本进行了初步定量，并将检测结果数字化，避免了人的主观性偏差，为早期确诊PEDV提供了技术手段。
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公开(公告)号：CN110187097B
公开(公告)日：2021-09-14
申请号：CN201910452755.8
申请日：2019-05-28
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 , 南京微测生物科技有限公司 , 哈尔滨维科生物技术有限公司
IPC: G01N33/533 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了猪流行性腹泻病毒荧光定量检测试纸条及其制备方法和应用。所述的荧光定量检测试纸条按照连接顺序依次包括样品垫、喷有荧光标记物探针的荧光标记物结合垫、喷涂有检测线T和质控线C的硝酸纤维素膜以及吸水纸，还包括位于下方的塑料底衬、其中塑料底衬的作用是提供组装平台，其中，荧光标记物结合垫上喷涂有PEDV单抗荧光微球标记物和兔IgG荧光微球标记物，所述的硝酸纤维素膜上喷涂有PEDV单抗形成的检测线T以及羊抗兔IgG多抗形成的质控线C。实验证明，本发明的试纸条敏感性比现有的RT‑PCR和胶体金试纸条检测方法至少提高10倍，而且对检测样本进行了初步定量，并将检测结果数字化，避免了人的主观性偏差，为早期确诊PEDV提供了技术手段。
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