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公开(公告)号:CN117843773B
公开(公告)日:2024-10-11
申请号:CN202410059115.1
申请日:2024-01-15
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) , 珠海泰诺麦博制药股份有限公司
Inventor: 王亚玉 , 林跃智 , 廖化新 , 王晓钧 , 郑伟宏 , 郭巍 , 王月明 , 胡哲 , 袁晓辉 , 杜承 , 刘彤 , 王雪峰 , 王孝丽 , 刘荻萩 , 吴昌文 , 孙留克 , 贾振兴
Abstract: 本发明公开了一种能够中和马流感病毒的全马源单克隆抗体及其应用。所述的全马源单克隆抗体由轻链和重链组成,其中轻链的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,重链的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。细胞实验以及动物实验均证明该全马源单克隆抗体具有很好的中和马流感流行毒株JL89的能力。因此,该全马源单克隆抗体具有极高的研究价值,可以在大流行早期进行被动免疫保护,以减轻病毒在疫苗生产期间的危害。同时,本发明重点分析了该全马源单克隆抗体与HA蛋白的结合表位,为保护性流感疫苗的开发提供了基础。
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公开(公告)号:CN115128268A
公开(公告)日:2022-09-30
申请号:CN202210404918.7
申请日:2022-04-18
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/68 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种马流产沙门氏菌病4种致病病原菌通用型间接ELISA抗体检测试剂盒及其应用。所述的试剂盒中含有截短表达的沙门氏菌外膜重组蛋白OmpA包被的酶标板,所述的截短表达的沙门氏菌外膜重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明利用Pull down技术成功筛选到了马流产沙门氏菌病4种病原的共同优势抗原,并将其克隆到表达载体通过截短分段表达实现了对该OmpA蛋白的可溶性表达,同时建立了马流产沙门氏菌病4种致病病原菌通用型间接ELISA抗体检测试剂盒以及相应的iELISA抗体诊断方法,实验证明,使用该试剂盒建立的方法具有特异性强、敏感性高的优点,将成为马流产沙门菌病抗体检测的一种有效工具,也为未来疫苗研发的抗体监测奠定了方法学基础。
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公开(公告)号:CN105861555B
公开(公告)日:2019-05-14
申请号:CN201610309169.4
申请日:2016-05-11
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种双向转录/表达质粒及其在流感病毒反向遗传学中的应用。本发明的一种双向转录/表达质粒是以真核表达载体pEF4/myc‑His B为骨架进行改造得到的。为了建立马流感病毒(Equine influenza virus,EIV)的反向遗传操作系统,本发明使用构建得到的双向转录/表达质粒双向分别表达马流感病毒PB2、PB1、PA、HA、NP、NA、NS以及M基因,通过共转染、测序、生长曲线的绘制和酶切鉴定,成功拯救得到一株EIV及其突变体。同时与现有的pBD系统进行产毒量的比较,表明本发明建立的反向遗传操作系统优于pBD系统。本发明的提出为流感病毒的反向遗传研究提供了一种新的技术手段,同时也为日后深入研究马流感病毒的传播,致病机理,乃至疫苗候选株的筛选奠定了坚实基础。
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公开(公告)号:CN105861555A
公开(公告)日:2016-08-17
申请号:CN201610309169.4
申请日:2016-05-11
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
CPC classification number: C12N15/85 , C12N7/00 , C12N2760/16121 , C12N2760/16151 , C12N2800/107
Abstract: 本发明公开了一种高效的双向转录/表达质粒及其在流感病毒反向遗传学中的应用。本发明的一种双向转录/表达质粒是以真核表达载体pEF4/myc?His B为骨架进行改造得到的。为了建立马流感病毒(Equine influenza virus,EIV)的反向遗传操作系统,本发明使用构建得到的双向转录/表达质粒双向分别表达马流感病毒PB2、PB1、PA、HA、NP、NA、NS以及M基因,通过共转染、测序、生长曲线的绘制和酶切鉴定,成功拯救得到一株EIV及其突变体。同时与现有的pBD系统进行产毒量的比较,表明本发明建立的反向遗传操作系统优于pBD系统。本发明的提出为流感病毒的反向遗传研究提供了一种新的技术手段,同时也为日后深入研究马流感病毒的传播,致病机理,乃至疫苗候选株的筛选奠定了坚实基础。
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公开(公告)号:CN101892200A
公开(公告)日:2010-11-24
申请号:CN201010139024.7
申请日:2010-03-18
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了抗H3N8亚型马流感病毒单克隆抗体及其用途。本发明分泌抗H3N8亚型马流感病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株的微生物保藏号是CGMCC No.3543。通过EL1SA和Western-blot方法鉴定证明:本发明单克隆抗体与马传染性贫血病毒、马动脉炎病毒、正常鸡胚尿囊液均无交叉反应,本发明H3N8/10的腹水ELISA效价为1∶1.6×104。本发明抗H3N8亚型的单克隆抗体可应用于马A型流感病毒的抗原性分析、血清学诊断、疫苗质量监测及流行病学调查等方面。
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公开(公告)号:CN101665841A
公开(公告)日:2010-03-10
申请号:CN200810214354.0
申请日:2008-09-05
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种区分马传染性贫血中国弱毒疫苗株与美洲流行毒株的方法,包括:(1)从感染了待检测毒株的马外周血白细胞中提取DNA;(2)以该DNA为模板,以P1/P3为引物进行第一轮PCR扩增;(2)以P2/P3为引物进行第二轮PCR扩增;(3)PCR产物进行双酶切分析;如果酶切出了340bp,190bp和150bp片段,则该检测毒株为美洲流行毒株;如果仅切出了340bp片段,则该检测毒株为中国弱毒疫苗株。本发明方法可以对阿根廷代表毒株感染马和中国疫苗免疫马进行准确的区分,可以灵敏特异的检测感染马传贫病毒的马匹,能够鉴别到0.2ng细胞染色体DNA中的病毒特异性DNA片段,而且只用5-7小时就可以快速的进行区分。
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公开(公告)号:CN118326060A
公开(公告)日:2024-07-12
申请号:CN202410425800.1
申请日:2024-04-09
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/46
Abstract: 本发明公开了一种用于快速检测马链球菌马亚种(Streptococcus equi subspecies equi,S.equi)的实时重组酶辅助扩增试剂盒及其应用。所述的试剂盒中含有用于扩增马链球菌马亚种eqbE基因的引物和探针,所述的试剂盒中还含有反应缓冲液、实时RAA主试剂混合物以及乙酸镁缓冲液。本发明的试剂盒采用专门设计的探针和引物,增强了检测的整体特异性和敏感性。在优化后,可以在20分钟内检测到10个或更多的核酸拷贝。且不会与其他临床相关的病原体发生交叉反应。与实时PCR检测方法的一致性为96.94%(95/98),Kappa值为0.931(p
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公开(公告)号:CN112011479B
公开(公告)日:2022-04-22
申请号:CN202010780801.X
申请日:2020-08-06
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了驴源马链球菌马亚种HLJ2018D‑LX株及其在制备马链球菌马亚种灭活疫苗中的应用,属于生物疫苗领域。本发明的驴源马链球菌马亚种HLJ2018D‑LX株具有免疫原性好、培养特性好等优点,将本发明的马链球菌马亚种HLJ2018D‑LX株接种于链球菌增菌液,培养后,用甲醛(终浓度0.2%v/v)灭活后,制备成灭活疫苗。实验证明,使用本发明制备得到的马链球菌马亚种灭活疫苗免疫小鼠后,能够使小鼠免于强毒马链球菌马亚种的攻击,在驴体试验上大大降低发病率,此疫苗具有安全、低剂量免疫等优点,是首个驴用马链球菌马亚种灭活疫苗,可以作为一种预防由马链球菌马亚种引起的腺疫。
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公开(公告)号:CN101701219A
公开(公告)日:2010-05-05
申请号:CN200910212334.4
申请日:2009-11-06
Applicant: 哈尔滨医科大学 , 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了编码兔肝细胞生长因子的cDNA及其表达载体和应用。本发明应用5’RACE法和3’RACE分别扩增和克隆了未知的兔HGF cDNA的5’片段和3’片段,最后将克隆的5’和3’cDNA片段连接,测序获得了两种全长的兔HGF cDNA序列,分别命名为兔HGF-1(SEQ ID NO:1)和兔HGF-2(SEQ ID NO:2)。MTT法实验结果显示本发明所表达的重组兔肝细胞生长因子具有显著的促进细胞生长的生物学活性。
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公开(公告)号:CN117843773A
公开(公告)日:2024-04-09
申请号:CN202410059115.1
申请日:2024-01-15
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) , 珠海泰诺麦博制药股份有限公司
Inventor: 王亚玉 , 林跃智 , 廖化新 , 王晓钧 , 郑伟宏 , 郭巍 , 王月明 , 胡哲 , 袁晓辉 , 杜承 , 刘彤 , 王雪峰 , 王孝丽 , 刘荻萩 , 吴昌文 , 孙留克 , 贾振兴
Abstract: 本发明公开了一种能够中和马流感病毒的全马源单克隆抗体及其应用。所述的全马源单克隆抗体由轻链和重链组成,其中轻链的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,重链的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。细胞实验以及动物实验均证明该全马源单克隆抗体具有很好的中和马流感流行毒株JL89的能力。因此,该全马源单克隆抗体具有极高的研究价值,可以在大流行早期进行被动免疫保护,以减轻病毒在疫苗生产期间的危害。同时,本发明重点分析了该全马源单克隆抗体与HA蛋白的结合表位,为保护性流感疫苗的开发提供了基础。
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