一种双向转录/表达质粒及其在流感病毒反向遗传学中的应用

    公开(公告)号:CN105861555B

    公开(公告)日:2019-05-14

    申请号:CN201610309169.4

    申请日:2016-05-11

    Abstract: 本发明公开了一种双向转录/表达质粒及其在流感病毒反向遗传学中的应用。本发明的一种双向转录/表达质粒是以真核表达载体pEF4/myc‑His B为骨架进行改造得到的。为了建立马流感病毒(Equine influenza virus,EIV)的反向遗传操作系统,本发明使用构建得到的双向转录/表达质粒双向分别表达马流感病毒PB2、PB1、PA、HA、NP、NA、NS以及M基因,通过共转染、测序、生长曲线的绘制和酶切鉴定,成功拯救得到一株EIV及其突变体。同时与现有的pBD系统进行产毒量的比较,表明本发明建立的反向遗传操作系统优于pBD系统。本发明的提出为流感病毒的反向遗传研究提供了一种新的技术手段,同时也为日后深入研究马流感病毒的传播,致病机理,乃至疫苗候选株的筛选奠定了坚实基础。

    一种高效的双向转录/表达质粒及其在流感病毒反向遗传学中的应用

    公开(公告)号:CN105861555A

    公开(公告)日:2016-08-17

    申请号:CN201610309169.4

    申请日:2016-05-11

    Abstract: 本发明公开了一种高效的双向转录/表达质粒及其在流感病毒反向遗传学中的应用。本发明的一种双向转录/表达质粒是以真核表达载体pEF4/myc?His B为骨架进行改造得到的。为了建立马流感病毒(Equine influenza virus,EIV)的反向遗传操作系统,本发明使用构建得到的双向转录/表达质粒双向分别表达马流感病毒PB2、PB1、PA、HA、NP、NA、NS以及M基因,通过共转染、测序、生长曲线的绘制和酶切鉴定,成功拯救得到一株EIV及其突变体。同时与现有的pBD系统进行产毒量的比较,表明本发明建立的反向遗传操作系统优于pBD系统。本发明的提出为流感病毒的反向遗传研究提供了一种新的技术手段,同时也为日后深入研究马流感病毒的传播,致病机理,乃至疫苗候选株的筛选奠定了坚实基础。

    区分马传染性贫血中国弱毒疫苗株与美洲流行毒株的方法

    公开(公告)号:CN101665841A

    公开(公告)日:2010-03-10

    申请号:CN200810214354.0

    申请日:2008-09-05

    Abstract: 本发明公开了一种区分马传染性贫血中国弱毒疫苗株与美洲流行毒株的方法,包括:(1)从感染了待检测毒株的马外周血白细胞中提取DNA;(2)以该DNA为模板,以P1/P3为引物进行第一轮PCR扩增;(2)以P2/P3为引物进行第二轮PCR扩增;(3)PCR产物进行双酶切分析;如果酶切出了340bp,190bp和150bp片段,则该检测毒株为美洲流行毒株;如果仅切出了340bp片段,则该检测毒株为中国弱毒疫苗株。本发明方法可以对阿根廷代表毒株感染马和中国疫苗免疫马进行准确的区分,可以灵敏特异的检测感染马传贫病毒的马匹,能够鉴别到0.2ng细胞染色体DNA中的病毒特异性DNA片段,而且只用5-7小时就可以快速的进行区分。

Patent Agency Ranking