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公开(公告)号:CN116262910A
公开(公告)日:2023-06-16
申请号:CN202111517914.1
申请日:2021-12-13
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所 , 西北农林科技大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种猪流行性腹泻病毒重组毒株、构建方法及应用。本发明将现有流行的猪流行性腹泻病毒PEDV CH/SX/2016株的S基因序列替换为SEQ ID NO.1所示的S2015基因序列后构建获得了一种PEDV CH/SX/2016株感染性克隆,将含有SEQ ID NO.4所示的感染性cDNA的质粒转染细胞,成功拯救获得了一株猪流行性腹泻病毒重组毒株rCH/SX/2016‑S2015;解决了原毒株无法利用反向遗传学工程被成功拯救的问题,获得的重组病毒株rCH/SX/2016‑S2015具有与原毒株相当的活性,可用于制备PEDV诊断试剂和/或疫苗。
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公开(公告)号:CN118879642A
公开(公告)日:2024-11-01
申请号:CN202310508992.8
申请日:2023-05-08
Applicant: 兰州大学 , 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域,涉及一种重组的猪繁殖与呼吸综合征病毒及其构建与应用。本发明将HP‑PRRSV GD株的NSP2基因序列用SEQ ID NO.1所示的基因序列替换,同时将ORF5‑7及3’UTR基因片段用SEQ ID NO.2所示的基因序列替换,拯救获得了重组的猪繁殖与呼吸综合征病毒。所述重组的猪繁殖与呼吸综合征病毒,可以感染MARC‑145细胞,且具有较高的病毒滴度;与HP‑PRRSV GD相比,所述重组的猪繁殖与呼吸综合征病毒不仅可以对HP‑PRRSV的攻击提供良好的保护,对类NADC30PRRSV的攻击同样可以提供良好的保护效果,可用于制备PRRSV诊断试剂或新型PRRSV疫苗。
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公开(公告)号:CN118813557A
公开(公告)日:2024-10-22
申请号:CN202310435620.7
申请日:2023-04-21
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)双荧光标签基因重组毒株的构建方法。本发明以猪繁殖与呼吸综合征病毒弱毒株GD为骨架,利用反向遗传操作技术在其ORF1和ORF2a之间插入转录调控序列TRS和红色荧光蛋白基因,在ORF7和3’UTR基因之间插入转录调控序列和绿色荧光蛋白基因,获得了可以同时稳定表达红色荧光蛋白和绿色荧光蛋白的PRRSV重组毒株;所述重组毒株中插入的两外源荧光标记基因遗传稳定,为实现PRRSV的可视化示踪、研制PRRSV基因工程疫苗和多联多价疫苗等奠定了基础。
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公开(公告)号:CN116236474B
公开(公告)日:2024-09-24
申请号:CN202310192714.6
申请日:2023-03-02
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: A61K31/352 , A61K31/365 , A61P31/14
Abstract: 本发明属于医药领域,具体涉及一种桑根酮C或含有桑根酮C的组合物在制备抗病毒药物中的应用。本发明首先发现,桑根酮C下调猪繁殖与呼吸综合征病毒衣壳蛋白的表达,抑制PRRSV的病毒滴度,抑制PRRSV的复制和增殖的作用,体外细胞药效实验显示其具有确切良好的抗病毒效果;其次,将桑根酮C与牛蒡苷元的组合物能够显著下调猪繁殖与呼吸综合征病毒衣壳蛋白的表达,抑制PRRSV的病毒滴度,抑制PRRSV的复制和增殖,体外细胞药效实验显示联合用药具有更加确切的抗病毒效果。本发明为PRRS的预防和治疗提供新的药物,具有剂量适中、疗效显著、用药方便、毒副作用小等特点,具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号:CN116462752B
公开(公告)日:2024-09-10
申请号:CN202310328048.4
申请日:2023-03-30
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种靶向BVDV非结构蛋白的重组纳米抗体及应用。本发明所述重组纳米抗体的氨基酸序列如SQE ID NO.1所示。本发明所述的重组纳米抗体通过大肠杆菌表达系统表达获得,制备方法简单;而且相较于现有的靶向BVDV非结构蛋白的纳米抗体,本发明所述的重组纳米抗体可自主穿过细胞膜,并能抑制细胞内BVDV的复制,为BVDV的防控提供新的技术手段。
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公开(公告)号:CN116236472B
公开(公告)日:2024-08-16
申请号:CN202310055910.9
申请日:2023-01-17
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: A61K31/225 , A61P31/14
Abstract: 本申请属于动物疫病防控技术领域,具体涉及一种化合物BAPTA‑AM在制备预防或治疗猪流行性腹泻药物中的应用。本发明意外发现化合物BAPTA‑AM能够抑制PEDV在真核生物细胞内的增殖,对PEDV具有一定的抑制作用,可抑制PEDV在细胞内的感染扩增,可用于制备预防或治疗猪流行性腹泻药物,为PED的防控奠定一定的技术基础,具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN116103446A
公开(公告)日:2023-05-12
申请号:CN202310060199.6
申请日:2023-01-17
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/70 , C12N15/113 , C12N15/55 , C12N15/867 , C12N7/00 , C12N5/10 , C12N15/57 , A61K39/215 , A61K45/00 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于基因工程领域,具体涉及NEP为靶点在抑制猪流行性腹泻病毒感染及疫苗生产中的应用。本发明首先发现敲除NEP蛋白/MME基因能够抑制PEDV的复制,即,NEP蛋白/MME基因作为靶点能够用于筛选抗PEDV感染的药物,表明抑制/沉默NEP蛋白/MME基因的试剂可作为抗PEDV感染的药物,用于预防或治疗PED,为PED的治疗提供一种新思路;其次,过表达NEP蛋白/MME基因能够促进PEDV的复制,即,促进NEP蛋白/MME基因表达的试剂能够用于PEDV或PEDV疫苗的生产增效剂;而且过表达NEP蛋白/MME基因的细胞可作为PEDV或PEDV疫苗生产细胞系,用于PEDV或PEDV疫苗的生产。
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公开(公告)号:CN119798381A
公开(公告)日:2025-04-11
申请号:CN202510007027.1
申请日:2025-01-03
Applicant: 兰州大学 , 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K14/01 , C07K7/06 , C12N15/13 , G01N33/577 , G01N33/569 , C07K16/08 , A61K39/12 , A61P31/20
Abstract: 本发明公开了一种猪圆环病毒4型Cap蛋白抗原表位肽及其单克隆抗体。所述抗原表位肽的氨基酸序列如SEQ ID No.11所示;所述单克隆抗体重链可变区包括SEQ ID No.1‑3所示的CDR1‑3;轻链可变区包括SEQ ID No.4‑6所示的CDR1‑3;所述单克隆抗体与PCV2、PCV3、PEDV、PRRSV等多种其他猪源病毒无反应,特异性良好;且可利用常规基因工程等生物学手段获得,避免了传统杂交瘤细胞长期冻存导致抗体遗传序列易丢失的问题;还有利于抗体在基因或蛋白水平上优化,进一步提高抗体的特异性和亲和力。
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公开(公告)号:CN116286816B
公开(公告)日:2024-12-20
申请号:CN202310059618.4
申请日:2023-01-19
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/867 , C12N5/10 , A61K39/12 , A61K38/46 , A61P31/14
Abstract: 本发明属于抗病毒研究技术领域,具体涉及一种PPARγ敲除细胞系的构建及作为PRRSV生产细胞系的应用。首先,本发明意外发现,在宿主细胞中敲除PPARγ基因,能够显著促进PRRSV的复制,因此,通过抑制/干扰/沉默/敲除宿主细胞中的PPARγ基因构建的细胞系可作为PRRSV或PRRSV疫苗生产细胞系,促进PRRSV或PRRSV疫苗的生产;其次,所述PPARγ基因可作为靶点用于筛选预防或治疗PRRS的药物,用于开发预防和治疗PRRSV的药物及抗PRRSV转基因猪的研究,具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN116103446B
公开(公告)日:2024-09-10
申请号:CN202310060199.6
申请日:2023-01-17
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/70 , C12N15/113 , C12N15/55 , C12N15/867 , C12N7/00 , C12N5/10 , C12N15/57 , A61K39/215 , A61K45/00 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于基因工程领域,具体涉及NEP为靶点在抑制猪流行性腹泻病毒感染及疫苗生产中的应用。本发明首先发现敲除NEP蛋白/MME基因能够抑制PEDV的复制,即,NEP蛋白/MME基因作为靶点能够用于筛选抗PEDV感染的药物,表明抑制/沉默NEP蛋白/MME基因的试剂可作为抗PEDV感染的药物,用于预防或治疗PED,为PED的治疗提供一种新思路;其次,过表达NEP蛋白/MME基因能够促进PEDV的复制,即,促进NEP蛋白/MME基因表达的试剂能够用于PEDV或PEDV疫苗的生产增效剂;而且过表达NEP蛋白/MME基因的细胞可作为PEDV或PEDV疫苗生产细胞系,用于PEDV或PEDV疫苗的生产。
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