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公开(公告)号：CN110396503B
公开(公告)日：2021-07-30
申请号：CN201910660873.8
申请日：2019-07-22
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明涉及一种利用桃蚜(Myzus persicae)获取马铃薯卷叶病毒属芸薹黄化病毒(Brassica yellows virus，BrYV)的方法，具体步骤为：S1：获得携带芸薹黄化病毒的病毒转基因植株；S2：获得饲毒用无毒蚜虫；S3：用所述无毒桃蚜从含有病毒基因组的转基因植株和冷冻病叶中获得病毒；S4：检测获毒后所述桃蚜的传毒能力。采用本发明建立的芸薹黄化病毒等马铃薯卷叶属病毒获毒方法可以很好地克服采用患病植株饲毒桃蚜中存在的植株难以长期保存、占用空间、不便于运送和毒源易混杂等的技术瓶颈，拓宽了介体昆虫获毒及品种抗性鉴定等的简便性、快速性和可靠性。
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公开(公告)号：CN110511955A
公开(公告)日：2019-11-29
申请号：CN201810488090.1
申请日：2018-05-21
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体公开了一种植物细胞质弹状病毒侵染性克隆、表达载体及其构建方法与应用。本发明所提供的植物细胞质弹状病毒表达载体为含有大麦黄条点花叶病毒(BYSMV)全基因组反向互补链的载体。本发明首次提供一种构建虫传植物病毒侵染性克隆的策略，即通过将前述表达载体与表达BYSMV的核衣壳(N)、磷蛋白(P)、大聚合酶蛋白(L)等病毒元件的载体经农杆菌介导在本生烟建立侵染性病毒，再利用本生烟发病汁液通过飞虱类昆虫接种单子叶植物并建立系统性侵染。不仅如此，本发明还进一步提供了所述植物细胞质弹状病毒表达载体在单子叶植物或飞虱类昆虫体内进行蛋白高效表达或者基因编辑等方面的广泛应用。
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公开(公告)号：CN109164261A
公开(公告)日：2019-01-08
申请号：CN201810970970.2
申请日：2018-08-24
Applicant: 中国农业大学
IPC: G01N33/68
Abstract: 本发明公开了一种检测马铃薯卷叶病毒的方法及其专用抗体。本发明首先制备了氨基酸序列如序列表中序列4或序列6所示的PLRV-MP蛋白，然后将PLRV-MP蛋白作为免疫原对动物加强免疫，获得的多克隆抗体。采用Western blot，以该多克隆抗体为一抗检测马铃薯卷叶病毒，不仅准确率高、灵敏度高，而且特异性好。本发明可检测待测样品是否含有马铃薯卷叶病毒，具有重大的应用价值。
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公开(公告)号：CN103740670B
公开(公告)日：2016-06-22
申请号：CN201410014620.0
申请日：2014-01-13
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N9/10 , C07K16/40 , G01N33/573
Abstract: 本发明公开了筛选草甘膦N-乙酰转移酶抗血清的试剂盒。本发明提供了草甘膦N-乙酰转移酶在制备筛选抗草甘膦N-乙酰转移酶血清试剂盒中的应用；所述草甘膦N-乙酰转移酶的氨基酸序列为如下1）或2）：1）序列表中的序列2自N端第114-260位氨基酸残基；2）序列表中的序列2。本发明的实验证明，本发明首次利用原核表达蛋白制备草甘膦N-乙酰转移酶抗血清的方法，成功地获得了GAT的抗血清，并且可以用于转基因植物目标蛋白的特异性检测。
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公开(公告)号：CN102329872B
公开(公告)日：2013-07-10
申请号：CN201110301170.X
申请日：2011-09-28
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明公开了鉴定甜菜褐斑病致病菌对多菌灵抗性的方法及其专用引物。本发明提供了一种用于鉴定或辅助鉴定甜菜褐斑病致病菌对多菌灵抗性的引物对，由序列表中序列1所示的引物和序列表中序列2所示的引物组成。本发明所提供的辅助鉴定甜菜褐斑病致病菌对多菌灵抗性的方法及其专用引物能有效地检测出对多菌灵表现为敏感或高抗的甜菜褐斑病菌，检测方法具有很高的特异性，且整个检测过程快速，检测成本较低，可操作性较强。因此，本发明所设计的引物和检测方法可用来快速、准确的检测甜菜褐斑病菌对多菌灵的抗性水平。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN115010793A
公开(公告)日：2022-09-06
申请号：CN202210688871.1
申请日：2022-06-17
Applicant: 中国农业大学
IPC: C07K14/08 , C12N15/70 , C07K16/10 , G01N33/569
Abstract: 本申请提供了一种玫瑰叶畸形病毒外壳蛋白多克隆抗体的制备方法及应用；所述制备方法中使用针对RrLDV cp基因设计的引物CP‑F‑NdeI：SEQ ID NO.3、引物CP‑R‑XhoI：SEQ ID NO.4进行扩增，并将其连接至pDB‑His‑MBP载体上进行原核表达，纯化外壳蛋白制备抗血清。
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公开(公告)号：CN110511959B
公开(公告)日：2021-05-14
申请号：CN201910422938.5
申请日：2019-05-21
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明提供早熟禾半潜隐病毒作为VIGS载体的应用。所述基因沉默载体系统包括含有早熟禾半潜病毒RNAα、RNAβ和RNAγ表达盒的质粒；其中，RNAα、RNAβ和RNAγ分别位于不同的表达盒中，这些表达盒位于同一质粒或位于不同质粒上；所述RNAγ表达盒中还含有靶标序列，所述靶标序列位于RNAγ中γb蛋白编码基因的3`端。本发明基于早熟禾半潜病毒的基因沉默载体系统可以对谷子等单子叶植物的基因组进行高效的基因沉默。
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公开(公告)号：CN111635455A
公开(公告)日：2020-09-08
申请号：CN202010431120.2
申请日：2020-05-20
Applicant: 中国农业大学
IPC: C07K14/415 , C12N15/29 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/20 , A01H6/46 , A01H6/60 , A01H6/54 , A01H6/82 , A01H6/74 , A01H6/34 , A01H6/02 , A01H6/00 , A01N59/20 , A01N47/44 , A01P1/00 , A01P21/00
Abstract: 本发明涉及植物生物技术领域，具体涉及一类植物抗病相关蛋白及其应用。本发明发现了一种植物抗病相关蛋白CCP，该蛋白属于铜伴侣蛋白，拟南芥中的CCP蛋白序列如SEQ ID NO.1所示。在植物中提高CCP蛋白的表达量能够显著提高植物对病原体的广谱抗病性，可单独或与其他植物药剂联合用于植物病害的防治，有利于提高植物的产量和质量。
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公开(公告)号：CN110938645A
公开(公告)日：2020-03-31
申请号：CN201911301623.1
申请日：2019-12-17
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N15/70 , C07K14/08 , C07K16/10 , G01N33/569
Abstract: 本发明涉及一种甘蔗黄叶病毒运动蛋白(ScYLV-MP)表达纯化方法以及ScYLV-MP多克隆抗血清的制备和检测试剂盒的构建，其中ScYLV-MP表达纯化步骤为：(1)ScYLV-MP基因的调取及扩增：(2)ScYLV-MP基因原核表达载体构建；(3)His-tag-(ScYLV-MP)融合蛋白的原核表达；(4)His-tag-(ScYLV-MP)融合蛋白的纯化；(5)ScYLV-MP蛋白的获得。采用本发明所述方法获得的ScYLV-MP蛋白多克隆抗血清不仅准确率高、灵敏度高，而且特异性好，可实现甘蔗黄叶病毒及其运动蛋白的准确检测，具有较大的应用价值和市场前景。
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公开(公告)号：CN102250945A
公开(公告)日：2011-11-23
申请号：CN201110187292.0
申请日：2011-07-05
Applicant: 中国农业大学 , 河北省农林科学院植物保护研究所
Abstract: 本发明公开了一种RNaseIII的突变基因在植物抗病中的应用。本发明提供一种培育转基因植物方法，为将RNaseIII突变体的编码基因导入目的植物，获得抗粗缩病的转基因植物；所述RNaseIII突变体的氨基酸序列为序列表中的序列4。本发明的实验证明，本发明培育的转基因玉米新品种对于常见玉米病毒病具有较强抗性，在大田栽培过程中，在相同的病毒病危害情况下，本发明培育的转基因玉米新品种与对照组相比具有明显的抗病效果，从而对于减少病毒病危害，保障玉米稳产具有重要意义。
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