公开(公告)号：CN107338234B

公开(公告)日：2020-08-18

申请号：CN201710383874.3

申请日：2017-05-26

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 江正强 ,  闫巧娟 ,  孙倩 ,  耿芳 ,  龚思怡

IPC: C12N9/58 ,  C12N15/57 ,  C12N15/81 ,  A23J3/34 ,  A23L13/70

Abstract: 本发明公开了一种新型米黑根毛霉天冬氨酸蛋白酶的生产方法及其应用，具体涉及重组天冬氨酸蛋白酶、编码基因及其生产方法和应用。该重组天冬氨酸蛋白酶是由SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列组成的蛋白质，所述重组天冬氨酸蛋白酶的编码基因是SEQ ID NO：2所示的DNA分子。将米黑根毛霉的天冬氨酸蛋白酶基因RmproA连接至巴斯德毕赤酵母GS115表达载体pPIC9K，并转化至毕赤酵母中诱导表达得到重组天冬氨酸蛋白酶。经5L发酵罐高密度发酵后，重组菌株在156h时最高产蛋白酶活力为3400U/mL，蛋白含量为6.42mg/mL。本发明提供的重组天冬氨酸蛋白酶能有效嫩化猪肉，降低剪切力，使肉质适口，能够有效水解动物及植物蛋白，制备低分子量多肽。

公开(公告)号：CN103725708A

公开(公告)日：2014-04-16

申请号：CN201410014455.9

申请日：2014-01-13

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 于嘉林 ,  陈秀兰 ,  何震天 ,  韩成贵 ,  李大伟 ,  张宗英 ,  董槿 ,  安家爽 ,  邓新 ,  孙倩 ,  张容 ,  王建华 ,  王锦荣 ,  张永亮 ,  王颖 ,  王献兵

IPC: C12N15/82 ,  A01H5/00

Abstract: 本发明公开了黄花叶病毒P2蛋白及其基因在培育抗黄花叶病小麦中的应用。本发明提供的如下1）-3）中任一种物质在调控植物抗病性中的应用：1）蛋白P2；2）编码蛋白P2的DNA分子；3）含有编码蛋白P2的DNA分子的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌；所述蛋白P2的氨基酸序列为序列表中的序列2。本发明的实验证明，本发明将P2蛋白的编码基因导入小麦中，得到转基因小麦，该转基因小麦的抗黄花病性大于非转基因小麦，且同时获得了对病毒病具有较强抗性的转基因小麦新品系，说明该蛋白抗黄花病性，从而对于减少病毒病危害，保障小麦稳产具有重要意义。

公开(公告)号：CN107338234A

公开(公告)日：2017-11-10

申请号：CN201710383874.3

申请日：2017-05-26

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 江正强 ,  闫巧娟 ,  孙倩 ,  耿芳 ,  龚思怡

IPC: C12N9/58 ,  C12N15/57 ,  C12N15/81 ,  A23J3/34 ,  A23L13/70

Abstract: 本发明公开了一种新型米黑根毛霉天冬氨酸蛋白酶的生产方法及其应用，具体涉及重组天冬氨酸蛋白酶、编码基因及其生产方法和应用。该重组天冬氨酸蛋白酶是由SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列组成的蛋白质，所述重组天冬氨酸蛋白酶的编码基因是SEQ ID NO：2所示的DNA分子。将米黑根毛霉的天冬氨酸蛋白酶基因RmproA连接至巴斯德毕赤酵母GS115表达载体pPIC9K，并转化至毕赤酵母中诱导表达得到重组天冬氨酸蛋白酶。经5L发酵罐高密度发酵后，重组菌株在156h时最高产蛋白酶活力为3400U/mL，蛋白含量为6.42mg/mL。本发明提供的重组天冬氨酸蛋白酶能有效嫩化猪肉，降低剪切力，使肉质适口，能够有效水解动物及植物蛋白，制备低分子量多肽。

公开(公告)号：CN103740670B

公开(公告)日：2016-06-22

申请号：CN201410014620.0

申请日：2014-01-13

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 张宗英 ,  陈相儒 ,  韩成贵 ,  李大伟 ,  于嘉林 ,  燕永亮 ,  陆伟 ,  林敏 ,  孙倩 ,  王颖 ,  张永亮 ,  王献兵

IPC: C12N9/10 ,  C07K16/40 ,  G01N33/573

Abstract: 本发明公开了筛选草甘膦N-乙酰转移酶抗血清的试剂盒。本发明提供了草甘膦N-乙酰转移酶在制备筛选抗草甘膦N-乙酰转移酶血清试剂盒中的应用；所述草甘膦N-乙酰转移酶的氨基酸序列为如下1）或2）：1）序列表中的序列2自N端第114-260位氨基酸残基；2）序列表中的序列2。本发明的实验证明，本发明首次利用原核表达蛋白制备草甘膦N-乙酰转移酶抗血清的方法，成功地获得了GAT的抗血清，并且可以用于转基因植物目标蛋白的特异性检测。

公开(公告)号：CN103740670A

公开(公告)日：2014-04-23

申请号：CN201410014620.0

申请日：2014-01-13

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 张宗英 ,  陈相儒 ,  韩成贵 ,  李大伟 ,  于嘉林 ,  燕永亮 ,  陆伟 ,  林敏 ,  孙倩 ,  王颖 ,  张永亮 ,  王献兵

IPC: C12N9/10 ,  C07K16/40 ,  G01N33/573

CPC classification number: C07K16/06 ,  G01N33/573 ,  G01N2333/91051

Abstract: 本发明公开了筛选草甘膦N-乙酰转移酶抗血清的试剂盒。本发明提供了草甘膦N-乙酰转移酶在制备筛选抗草甘膦N-乙酰转移酶血清试剂盒中的应用；所述草甘膦N-乙酰转移酶的氨基酸序列为如下1）或2）：1）序列表中的序列2自N端第114-260位氨基酸残基；2）序列表中的序列2。本发明的实验证明，本发明首次利用原核表达蛋白制备草甘膦N-乙酰转移酶抗血清的方法，成功地获得了GAT的抗血清，并且可以用于转基因植物目标蛋白的特异性检测。