公开(公告)号：CN114778852B

公开(公告)日：2023-09-01

申请号：CN202210447079.7

申请日：2022-04-26

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 韩军 ,  赵全红 ,  孔璨 ,  杨汉春 ,  周磊 ,  盖新娜 ,  张永宁 ,  郭鑫

IPC: G01N33/68 ,  G01N33/569 ,  G01N33/58 ,  G01N33/543 ,  C12N15/70 ,  C12N15/57 ,  C12N9/50

Abstract: 本发明公开了一种检测PRRSV PLP2抗体的间接ELISA方法，该方法针对PRRSV JXwn06PLP2(46～323)基因序列设计特异性引物，构建原核表达质粒pET28a(+)‑PLP2‑StrepⅡ，在E.coli BL21中实现了高效可溶性表达。经过亲和层析柱与Superdex75分子筛纯化，获得了高纯度PLP2重组蛋白，将其作为包被抗原，建立了检测PRRSV PLP2抗体的间接ELISA方法。本发明发现PLP2可作为一种新的PRRSV诊断抗原，应用其建立的抗体检测方法重复性和特异性好，能够在PRRSV感染仔猪后第3～5天检测到PLP2抗体，可用于PRRS抗体检测和早期诊断。

公开(公告)号：CN116875634A

公开(公告)日：2023-10-13

申请号：CN202310810120.7

申请日：2023-07-04

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 韩军 ,  孔璨 ,  高鹏 ,  杨汉春 ,  张永宁 ,  周磊 ,  盖新娜 ,  郭鑫

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/40 ,  C12N7/01 ,  A61K39/12 ,  A61P31/14 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明属于病毒基因工程技术领域，具体涉及一种置换nsp2基因的猪繁殖与呼吸综合征嵌合病毒，并进一步公开其构建的疫苗株及重组疫苗。本发明所述置换nsp2基因的猪繁殖与呼吸综合征嵌合病毒RvCHsx1401‑SPnsp2JX是以低致病性PRRSV毒株CHsx1401为骨架，置换了高致病性PRRSV毒株JXwn06非结构蛋白nsp2和结构蛋白编码区的嵌合病毒。该嵌合病毒具备较好的遗传稳定性和安全性，且接种后能够促进体内病毒清除，针对高致病性PRRSV毒株感染提供免疫保护，可作为猪繁殖与呼吸综合征的疫苗侯选株，具有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN114778852A

公开(公告)日：2022-07-22

申请号：CN202210447079.7

申请日：2022-04-26

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 韩军 ,  赵全红 ,  孔璨 ,  杨汉春 ,  周磊 ,  盖新娜 ,  张永宁 ,  郭鑫

IPC: G01N33/68 ,  G01N33/569 ,  G01N33/58 ,  G01N33/543 ,  C12N15/70 ,  C12N15/57 ,  C12N9/50

Abstract: 本发明公开了一种检测PRRSV PLP2抗体的间接ELISA方法，该方法针对PRRSV JXwn06PLP2(46～323)基因序列设计特异性引物，构建原核表达质粒pET28a(+)‑PLP2‑StrepⅡ，在E.coli BL21中实现了高效可溶性表达。经过亲和层析柱与Superdex75分子筛纯化，获得了高纯度PLP2重组蛋白，将其作为包被抗原，建立了检测PRRSV PLP2抗体的间接ELISA方法。本发明发现PLP2可作为一种新的PRRSV诊断抗原，应用其建立的抗体检测方法重复性和特异性好，能够在PRRSV感染仔猪后第3～5天检测到PLP2抗体，可用于PRRS抗体检测和早期诊断。