公开(公告)号：CN118421666A

公开(公告)日：2024-08-02

申请号：CN202311821853.7

申请日：2023-12-27

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 孟祥晨 ,  蔡俊武 ,  李巧慧 ,  李岩 ,  苏倩 ,  陈思远 ,  赵鹏昊 ,  刘佳瑜

IPC: C12N15/70 ,  C12N15/56 ,  C12N1/21 ,  C12N9/24 ,  G01N33/573 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明提供一种在大肠杆菌中发酵生产具有活性的婴儿双歧杆菌α‑L‑岩藻糖苷酶的方法，属于食品微生物发酵领域。该方法利用无缝克隆技术成功在大肠杆菌BL21(DE3)中表达了H10‑1的4个α‑L‑岩藻糖苷酶（alfA1、alfA2、FUC95A和FUC1）。用His标签蛋白纯化法对表达的蛋白进行纯化，并用α岩藻糖苷酶(AFU)酶联免疫分析试剂盒对纯化的蛋白进行活性的鉴定。本发明通过大肠杆菌进行表达，可以提高酶的产量、缩短生产周期、节约成本，具有广阔的市场应用前景。

公开(公告)号：CN118932094A

公开(公告)日：2024-11-12

申请号：CN202411316954.3

申请日：2024-09-20

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 孟祥晨 ,  李岩 ,  蔡俊武 ,  赵鹏昊 ,  于航

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11 ,  C12R1/01

Abstract: 一种快速分离四种双歧杆菌的方法。本发明提供了一组共包括5对用于分离鉴定两歧双歧杆菌、短双歧杆菌、长双歧杆菌长亚种和长双歧杆菌婴儿亚种四种双歧杆菌的PCR引物及其应用，该应用与方法应当但不限于包含如下步骤，1）通过比较基因组学比较四种双歧杆菌的糖苷水解酶（GH）家族基因，寻找共有和各自特有的糖苷水解酶家族基因；2）针对比对结果设计四种双歧杆菌的共有和特有引物；3）使用目标细菌的菌落或DNA并应用所设计的引物进行PCR扩增，将扩增产物进行核酸电泳验证；4）其在目标位置出现双阳性条带，即可证明为上述四种双歧杆菌的一种。通过本发明所提供的引物从复杂样品中分离对应的种属的双歧杆菌，可达到准确、简便、高效且低成本的目的。